摘要 | 第7-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
第1章 文献综述 | 第12-40页 |
1.1 枇杷果实品质育种概述 | 第12页 |
1.2 植物单性结实研究概况 | 第12-19页 |
1.2.1 植物单性结实的类型 | 第13-14页 |
1.2.2 有关植物单性结实激素含量测定研究 | 第14-18页 |
1.2.3 单性结实相关基因研究 | 第18-19页 |
1.3.植物激素的检测 | 第19-23页 |
1.3.1 植物激素的生物学功能及相互作用 | 第19-21页 |
1.3.2 植物激素的提取与含量测定方法 | 第21-23页 |
1.4 高等植物中的赤霉素代谢途径 | 第23-36页 |
1.4.1 赤霉素的合成 | 第23-25页 |
1.4.2 赤霉素的钝化 | 第25-26页 |
1.4.3 赤霉素代谢途径关键酶基因 | 第26-33页 |
1.4.4 赤霉素代谢途径的调控 | 第33-35页 |
1.4.5 赤霉素信号转导 | 第35-36页 |
1.5 实时荧光定量PCR技术理论及在植物研究领域的应用 | 第36-40页 |
1.5.1 荧光定量PCR技术的理论依据 | 第36-37页 |
1.5.2 荧光定量PCR技术中的重要参数 | 第37页 |
1.5.3 实时荧光定量PCR的类型 | 第37-38页 |
1.5.4 实时荧光定量PCR技术在植物领域的应用 | 第38-40页 |
第2章 引言 | 第40-42页 |
2.1 研究的目的和意义 | 第40页 |
2.2 研究内容 | 第40页 |
2.2.1 枇杷果实发育过程中植物激素含量的测定 | 第40页 |
2.2.2 赤霉素代谢途径关键氧化酶家族基因片段的克隆 | 第40页 |
2.2.3 赤霉素代谢途径关键氧化酶家族基因的表达特性分析 | 第40页 |
2.3 研究技术路线 | 第40-42页 |
第3章 枇杷果实发育过程中多种植物激素的提取及检测 | 第42-58页 |
3.1 材料与试剂 | 第42页 |
3.1.1 试验材料 | 第42页 |
3.1.2 主要试剂 | 第42页 |
3.2 主要仪器与设备 | 第42页 |
3.3 试验方法 | 第42-43页 |
3.3.1 植物激素的提取与纯化 | 第42-43页 |
3.3.2 色谱条件 | 第43页 |
3.3.3 标准品制配 | 第43页 |
3.3.4 定性和定量测定 | 第43页 |
3.4 结果与分析 | 第43-54页 |
3.4.1 流动相条件的选择 | 第43-46页 |
3.4.2 检测方法的线性范围与检出限 | 第46页 |
3.4.3 检测方法的精密度 | 第46页 |
3.4.4 样品回收率测定 | 第46-47页 |
3.4.5 枇杷果实发育过程中激素含量的测定 | 第47-54页 |
3.5 讨论 | 第54-58页 |
3.5.1 木本植物提取剂的选择和C18固相萃取小柱的应用 | 第55页 |
3.5.2 植物激素测定的波长选择 | 第55-56页 |
3.5.3 枇杷果实发育过程中多种植物激素的测定 | 第56-58页 |
第4章 枇杷赤霉素代谢途径关键酶基因的克隆 | 第58-80页 |
4.1 材料与试剂 | 第58页 |
4.1.1 试验材料 | 第58页 |
4.1.2 主要试剂 | 第58页 |
4.2 主要仪器设备 | 第58页 |
4.3 试验方法 | 第58-63页 |
4.3.1 RNA的制备 | 第58-59页 |
4.3.2 cDNA的合成 | 第59-60页 |
4.3.3 引物设计及反应体系和扩增程序 | 第60-61页 |
4.3.4 目的片段回收 | 第61页 |
4.3.5 目的片段与载体的连接 | 第61页 |
4.3.6 重组质粒转化入大肠杆菌 | 第61-62页 |
4.3.7 阳性克隆的鉴定 | 第62页 |
4.3.8 序列分析工具 | 第62-63页 |
4.4 结果与分析 | 第63-77页 |
4.4.1 RNA提取质量检测 | 第63页 |
4.4.2 赤霉素关键酶基因克隆片段与序列分析 | 第63-64页 |
4.4.3 赤霉素关键酶基因cDNA序列的电子克隆及序列分析 | 第64-72页 |
4.4.4 赤霉素关键酶基因蛋白理化性质分析 | 第72-73页 |
4.4.5 蛋白结构域及蛋白motif搜索 | 第73-74页 |
4.4.6 蛋白结构预测 | 第74-75页 |
4.4.7 蛋白进化关系分析 | 第75-77页 |
4.5 讨论 | 第77-80页 |
第5章 枇杷赤霉素代谢途径关键酶基因及DELLA基因的表达特性分析 | 第80-88页 |
5.1 材料与试剂 | 第80页 |
5.1.1 试验材料 | 第80页 |
5.1.2 主要试剂 | 第80页 |
5.2 主要仪器设备 | 第80页 |
5.3 试验方法 | 第80-82页 |
5.3.1 总RNA提取和检测 | 第80页 |
5.3.2 cDNA的合成 | 第80-81页 |
5.3.3 荧光定量引物设计 | 第81-82页 |
5.3.4 荧光定量反应体系和程序 | 第82页 |
5.4 结果与分析 | 第82-86页 |
5.4.1 RNA提取结果检测 | 第82-83页 |
5.4.2 荧光定量PCR引物特异性及内参基因的检测 | 第83-84页 |
5.4.3 赤霉素代谢途径关键酶基因及DELLA基因的表达分析 | 第84-86页 |
5.5 讨论 | 第86-88页 |
5.5.1 赤霉素诱导的赤霉素代谢基因的表达 | 第86-87页 |
5.5.2 赤霉素诱导的赤霉素信号响应及调控 | 第87-88页 |
第6章 结论、创新点与展望 | 第88-90页 |
参考文献 | 第90-104页 |
附录 缩略词表 | 第104-105页 |
在学期间所发表文章及参研项目 | 第105-106页 |
致谢 | 第106页 |