中文摘要 | 第4-8页 |
Abstract | 第8-12页 |
缩略语 | 第16-17页 |
前言 | 第17-20页 |
研究现状、成果 | 第17-18页 |
研究目的、方法 | 第18-20页 |
一、AC1MMYR2逆转高剂量紫杉醇诱导的细胞侵袭的体外研究 | 第20-55页 |
1.1 对象和方法 | 第20-27页 |
1.1.1 细胞系 | 第20页 |
1.1.2 实验材料 | 第20-27页 |
1.2 实验方法 | 第27-41页 |
1.2.1 细胞培养 | 第27页 |
1.2.2 原位杂交和免疫组化检测miR-21和CDK5的表达水平 | 第27-29页 |
1.2.3 Western blot检测EMT相关蛋白的表达水平 | 第29-32页 |
1.2.4 Real-time PCR检测不同浓度紫杉醇对miR-21表达水平的影响 | 第32-34页 |
1.2.5 免疫荧光检测侵袭伪足的形成 | 第34-35页 |
1.2.6 Transwell和划痕检测细胞迁移和侵袭能力 | 第35-36页 |
1.2.7 Western blot检测CDK5通路中相关蛋白的表达水平 | 第36-37页 |
1.2.8 Western blot检测敲除和过表达CDK5后EMT相关蛋白的表达情况 | 第37-38页 |
1.2.9 免疫荧光检测EMT相关蛋白的表达情况及亚细胞定位 | 第38页 |
1.2.10 Western blot检测CDK5RAP1、Egr-1 和p39表达水平 | 第38页 |
1.2.11 免疫共沉淀检测CDK5和p39之间的相互作用 | 第38-39页 |
1.2.12 免疫荧光检测p39的亚细胞定位 | 第39页 |
1.2.13 Western blot检测细胞核和细胞质中p39的表达水平 | 第39-40页 |
1.2.14 统计学方法 | 第40-41页 |
1.3 实验结果 | 第41-51页 |
1.3.1 miR-21和CDK5的表达水平与肿瘤转移之间的关系 | 第41-42页 |
1.3.2 不同剂量紫杉醇对EMT相关蛋白表达水平的影响 | 第42-43页 |
1.3.3 不同剂量紫杉醇对miR-21表达水平的影响 | 第43页 |
1.3.4 AC1MMYR2对侵袭伪足形成的影响 | 第43-44页 |
1.3.5 AC1MMYR2对细胞侵袭和迁移的影响 | 第44-45页 |
1.3.6 AC1MMYR2对CDK5通路中相关蛋白表达的影响 | 第45-46页 |
1.3.7 敲除和过表达CDK5对EMT相关蛋白表达的影响 | 第46-47页 |
1.3.8 AC1MMYR2对EMT标志物蛋白表达的影响及亚细胞定位 | 第47-48页 |
1.3.9 AC1MMYR2对CDK5RAP1、Egr-1 和p39表达的影响 | 第48-49页 |
1.3.10 AC1MMYR2对CDK5和p39之间相互作用的影响 | 第49-50页 |
1.3.11 AC1MMYR2对p39的亚细胞定位的影响 | 第50页 |
1.3.12 AC1MMYR2对细胞核和细胞质中p39表达水平的影响 | 第50-51页 |
1.4 讨论 | 第51-54页 |
1.4.1 miR-21和CDK5的表达水平与肿瘤转移之间的关系 | 第51页 |
1.4.2 高剂量紫杉醇对EMT的影响 | 第51-52页 |
1.4.3 AC1MMYR2对高剂量紫杉醇诱导的细胞侵袭和转移的影响 | 第52页 |
1.4.4 CDK5在AC1MMYR2逆转高剂量紫杉醇诱导的细胞侵袭中的地位 | 第52-53页 |
1.4.5 AC1MMYR2调控CDK5活性的机制 | 第53-54页 |
1.5 小结 | 第54-55页 |
二、AC1MMYR2抑制肿瘤发生、减少高剂量紫杉醇诱导的肿瘤转移体内研究 | 第55-64页 |
2.1 实验材料 | 第55-56页 |
2.1.1 细胞系及重组慢病毒载体 | 第55页 |
2.1.2 实验动物 | 第55页 |
2.1.3 实验药品与试剂 | 第55页 |
2.1.4 实验仪器 | 第55-56页 |
2.2 实验方法 | 第56-57页 |
2.2.1 重组慢病毒的转染 | 第56页 |
2.2.2 乳腺癌原位肿瘤模型 | 第56-57页 |
2.2.3 H&E染色 | 第57页 |
2.2.4 免疫组化检测CDK5和 β-catenin | 第57页 |
2.2.5 统计学处理 | 第57页 |
2.3 结果 | 第57-62页 |
2.3.1 肿瘤治疗的效果 | 第57-59页 |
2.3.2 肺转移情况 | 第59-60页 |
2.3.3 H&E染色和免疫组化结果 | 第60-61页 |
2.3.4 AC1MMYR2逆转紫杉醇诱导的肿瘤转移的机制 | 第61-62页 |
2.4 讨论 | 第62-63页 |
2.5 小结 | 第63-64页 |
结论 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-71页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第71-72页 |
综述 MiRNAs在调控EMT过程中的作用 | 第72-87页 |
综述参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87页 |