| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| 1.1 转基因雄性不育研究进展 | 第10-13页 |
| 1.1.1 利用细胞毒素基因的特异表达获得基因工程雄性不育 | 第10页 |
| 1.1.2 通过控制胼胝质壁的降解获得基因工程雄性不育 | 第10-11页 |
| 1.1.3 通过控制细胞质相关基因创造基因工程雄性不育 | 第11页 |
| 1.1.4 利用反义RNA技术创造基因工程雄性不育 | 第11-12页 |
| 1.1.5 利用双组份系统创造基因工程雄性不育 | 第12页 |
| 1.1.6 其他方法 | 第12-13页 |
| 1.2 基因工程雄性不育系的保持 | 第13页 |
| 1.3 基因工程雄性不育的育性恢复 | 第13-15页 |
| 1.3.1 利用Barnase/Barstar系统创建基因工程雄性不育恢复系 | 第13页 |
| 1.3.2 利用诱导型基因表达系统获得基因工程雄性不育恢复系 | 第13-14页 |
| 1.3.3 利用反义RNA技术获得基因工程雄性不育恢复系 | 第14页 |
| 1.3.4 利用位点特异重组系统获得基因工程雄性不育恢复系 | 第14-15页 |
| 1.4 内含肽的研究和应用 | 第15-17页 |
| 1.4.1 内含肽的概念 | 第15页 |
| 1.4.2 内含肽的结构和分类 | 第15页 |
| 1.4.3 内含肽的剪接机理 | 第15-17页 |
| 1.4.4 内含肽在植物育种上的应用 | 第17页 |
| 1.5 草甘膦除草剂的研究和应用 | 第17-20页 |
| 1.5.1 草甘膦的性质及其作用机理 | 第17-18页 |
| 1.5.2 抗草甘膦除草剂基因工程的研究进展 | 第18-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| 2.1 研究的目的和意义 | 第20-21页 |
| 2.2 技术路线 | 第21-22页 |
| 第3章 材料与方法 | 第22-30页 |
| 3.1 材料 | 第22-24页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第22页 |
| 3.1.2 实验药品及试剂 | 第22-23页 |
| 3.1.3 培养基配方 | 第23页 |
| 3.1.4 实验涉及的主要仪器设备如表3-4所示 | 第23-24页 |
| 3.2 实验方法 | 第24-30页 |
| 3.2.1 质粒转化农杆菌 | 第24-25页 |
| 3.2.2 农杆菌介导法转化芥菜 | 第25-26页 |
| 3.2.3 农杆菌介导法转化甘蓝 | 第26页 |
| 3.2.4 转基因芥菜、甘蓝植株DNA的提取 | 第26-27页 |
| 3.2.5 转基因芥菜、甘蓝DNA的PCR鉴定 | 第27页 |
| 3.2.6 转基因芥菜、甘蓝植株的RT-PCR分析 | 第27页 |
| 3.2.7 转基因甘蓝植株形态学观察 | 第27-28页 |
| 3.2.8 转基因芥菜植株的PPT抗性分析及草丁膦抗性分析 | 第28-30页 |
| 第4章 结果与分析 | 第30-46页 |
| 4.1 芥菜双组份雄性不育系统的建立 | 第30-37页 |
| 4.1.1 Npu DnaE内含肽介导split-EPSPS功能重建 | 第30-36页 |
| 4.1.1.1 pCABarESN、pCABarESC、pCABarESP转基因芥菜的获得 | 第30-31页 |
| 4.1.1.2 转基因植株基因表达的RT-PCR分析及草甘膦抗性分析 | 第31-33页 |
| 4.1.1.3 转基因芥菜PPT抗性分析、杂交F_1代的草甘膦抗性分析及PCR检测 | 第33-36页 |
| 4.1.2 基于草甘膦筛选的芥菜双组分雄性不育系的创建 | 第36-37页 |
| 4.1.2.1 pCABarSNZESN、pCABarSCZESC转基因芥菜植株的获得 | 第36-37页 |
| 4.2 甘蓝双组分雄性不育系统的建立 | 第37-46页 |
| 4.2.1 甘蓝绒毡层特异表达Barnase毒蛋白基因导致雄性不育 | 第37-41页 |
| 4.2.1.1 pCABarABn转基因甘蓝植株的获得 | 第37-39页 |
| 4.2.1.2 pCABarABn转基因甘蓝植株的花器官形态比较 | 第39-40页 |
| 4.2.1.3 pCABarABn转基因甘蓝植株与野生型甘蓝植株花药、花粉发育过程的比较 | 第40页 |
| 4.2.1.4 pCABarABn转基因甘蓝植株田间结籽情况的调查 | 第40-41页 |
| 4.2.2 基于草甘膦筛选的甘蓝双组分雄性不育系的创建 | 第41-46页 |
| 4.2.2.1 pCABarSNZESN、pCABarSCZESC转基因甘蓝植株的获得 | 第41-42页 |
| 4.2.2.2 pCABarSNESN、pCABarSCZESC转基因甘蓝植株的RT-PCR分析 | 第42-44页 |
| 4.2.2.3 pCABarSNESN、pCABarSCZESC转基因甘蓝植株田间结籽情况的调查 | 第44-46页 |
| 第5章 讨论 | 第46-50页 |
| 第6章 结论 | 第50-52页 |
| 参考文献 | 第52-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
| 致谢 | 第60-62页 |
| 在学期间发表的文章、参加项目及会议情况 | 第62页 |
