甘肃省冬虫夏草遗传多样性分析和人工培养条件的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1 绪论 | 第11-23页 |
| ·冬虫夏草的生物学特性 | 第11-18页 |
| ·冬虫夏草的形态特征与分布 | 第11-12页 |
| ·冬虫夏草寄主特征与研究 | 第12-13页 |
| ·冬虫夏草菌的研究概况 | 第13-16页 |
| ·分子生物学技术在系统分类及冬虫夏草研究中的应用 | 第16-18页 |
| ·冬虫夏草的主要活性成份及药理作用 | 第18-21页 |
| ·虫草多糖 | 第19页 |
| ·甘露醇 | 第19页 |
| ·虫草素 | 第19-20页 |
| ·腺苷 | 第20-21页 |
| ·冬虫夏草主要活性成份的提取和测定方法 | 第21页 |
| ·虫草多糖和甘露醇的提取和测定方法 | 第21页 |
| ·核苷类的提取和测定方法 | 第21页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第21-23页 |
| 2 材料与方法 | 第23-33页 |
| ·材料 | 第23-25页 |
| ·实验材料 | 第23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·实验药品 | 第23-24页 |
| ·培养基和溶液的配制 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-27页 |
| ·冬虫夏草菌的分离与纯化 | 第26页 |
| ·培养基的筛选及菌落形态观察 | 第26页 |
| ·最适温度的选择 | 第26页 |
| ·菌种的培养 | 第26-27页 |
| ·菌丝的观察 | 第27页 |
| ·DNA的提取及测定 | 第27-28页 |
| ·DNA的提取 | 第27页 |
| ·DNA纯度及浓度分析 | 第27-28页 |
| ·ISSR-PCR技术 | 第28-29页 |
| ·ISSR反应体系及反应程序的选用 | 第28页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·ISSR-PCR反应体系的优化 | 第28-29页 |
| ·ISSR-PCR扩增 | 第29页 |
| ·ISSR数据统计 | 第29页 |
| ·18S rDNA技术 | 第29-30页 |
| ·引物设计与合成 | 第29页 |
| ·扩增反应 | 第29-30页 |
| ·扩增产物的检测与测序 | 第30页 |
| ·DNA序列分析 | 第30页 |
| ·系统进化及多样性分析 | 第30-31页 |
| ·同源性比较及同源树的构建 | 第30-31页 |
| ·系统发育分析 | 第31页 |
| ·冬虫夏草菌主要活性成分测定 | 第31-33页 |
| ·虫草多糖和甘露醇的提取及含量测定 | 第31页 |
| ·虫草素和腺苷的提取及含量测定 | 第31-33页 |
| 3 结果与分析 | 第33-50页 |
| ·菌株的分离、培养与观察 | 第33-37页 |
| ·冬虫夏草菌的分离 | 第33-34页 |
| ·冬虫夏草菌固体培养基的筛选 | 第34-35页 |
| ·冬虫夏草菌落特征 | 第35-36页 |
| ·冬虫夏草菌最适温度的选择 | 第36-37页 |
| ·菌丝显微观察 | 第37页 |
| ·DNA的检测 | 第37-38页 |
| ·基因组DNA的电泳检测 | 第37页 |
| ·DNA浓度及纯度检测 | 第37-38页 |
| ·ISSR-PCR分析 | 第38-43页 |
| ·引物筛选 | 第38页 |
| ·反应体系的优化 | 第38-40页 |
| ·ISSR-PCR扩增 | 第40页 |
| ·ISSR扩增多态性 | 第40-41页 |
| ·聚类分析 | 第41-43页 |
| ·18S rDNA-PCR分析 | 第43-47页 |
| ·扩增产物电泳图谱 | 第43页 |
| ·测序分析 | 第43-44页 |
| ·18个菌株无性型的分子鉴定 | 第44-45页 |
| ·同源性树比较及同源树的构建 | 第45页 |
| ·基因系统发育分析 | 第45-47页 |
| ·主要活性成份测定 | 第47-50页 |
| ·虫草多糖和甘露醇测定 | 第47-48页 |
| ·虫草素和腺苷测定 | 第48-49页 |
| ·不同产区活性成份含量比较 | 第49页 |
| ·同一区域活性成份含量比较 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-53页 |
| ·培养基的选择 | 第50页 |
| ·基因组DNA提取方法的改进 | 第50页 |
| ·ISSR研究分析 | 第50-51页 |
| ·无性型的鉴定 | 第51页 |
| ·甘肃虫草资源的分子系统学分析 | 第51-52页 |
| ·冬虫夏草质量标准 | 第52-53页 |
| 结论 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录A 活性成分多重比对结果表 | 第60-63页 |
| 附录A 序列比对结果 | 第63-66页 |
| 附录A ISSR扩增部分电泳图 | 第66-67页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第67页 |
