摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4页 |
第一章 绪论 | 第7-14页 |
1.1 共培养产漆酶研究现状 | 第7-9页 |
1.1.1 漆酶的特性 | 第7页 |
1.1.2 漆酶的应用 | 第7-8页 |
1.1.3 共培养产漆酶菌株对的筛选 | 第8页 |
1.1.4 共培养促进产漆酶的机理 | 第8-9页 |
1.2 真菌漆酶基因的表达研究 | 第9-11页 |
1.2.1 真菌漆酶基因扩增手段 | 第9-10页 |
1.2.2 漆酶基因的差异表达研究 | 第10页 |
1.2.3 漆酶基因上游调控序列的扩增及分析 | 第10-11页 |
1.3 丝状真菌蛋白质组学概述 | 第11-12页 |
1.3.1 双向电泳及图谱分析 | 第11-12页 |
1.3.2 蛋白质的鉴定分析 | 第12页 |
1.3.3 双向电泳在侧耳属真菌中的应用 | 第12页 |
1.4 课题立题背景与意义 | 第12-13页 |
1.5 主要研究内容 | 第13-14页 |
第二章 材料和方法 | 第14-22页 |
2.1 实验材料 | 第14-15页 |
2.1.1 菌株 | 第14页 |
2.1.2 菌株培养方法 | 第14页 |
2.1.3 主要试剂 | 第14页 |
2.1.4 主要仪器与设备 | 第14-15页 |
2.2 实验方法 | 第15-20页 |
2.2.1 单培养与共培养发酵产漆酶的纯化及其酶学性质的比较 | 第15-16页 |
2.2.2 漆酶基因序列的扩增及分析 | 第16-18页 |
2.2.3 阿魏蘑蛋白表达差异的研究 | 第18-20页 |
2.3 测定方法 | 第20-22页 |
2.3.1 漆酶活力测定 | 第20-22页 |
第三章 结果与讨论 | 第22-40页 |
3.1 单培养与共培养发酵产漆酶的纯化及其酶学性质的初步比较 | 第22-28页 |
3.1.1 HiTrap Capto Q离子交换柱纯化 | 第22页 |
3.1.2 Superdex~(TM)7510/300GL凝胶柱纯化 | 第22-23页 |
3.1.3 单/共培养漆酶分离纯化结果 | 第23-24页 |
3.1.4 温度及pH对单/共培养漆酶的影响比较 | 第24-25页 |
3.1.5 金属离子及抑制剂对漆酶活性影响的比较 | 第25-27页 |
3.1.6 单/共培养漆酶的动力学参数比较 | 第27-28页 |
3.2 漆酶蛋白序列及基因序列的扩增及分析 | 第28-36页 |
3.2.1 漆酶基因序列的扩增 | 第28页 |
3.2.2 漆酶基因序列的分析 | 第28-30页 |
3.2.3 漆酶蛋白测序结果分析 | 第30页 |
3.2.4 目的片段在毕赤酵母中的表达 | 第30-31页 |
3.2.5 基因上游序列的扩增及分析 | 第31-34页 |
3.2.6 实时荧光定量PCR结果分析 | 第34-36页 |
3.3 发酵过程中蛋白表达差异的研究 | 第36-40页 |
3.3.1 电泳图谱的分析 | 第37页 |
3.3.2 差异点的质谱分析 | 第37-40页 |
主要结论与展望 | 第40-41页 |
主要结论 | 第40页 |
展望 | 第40-41页 |
致谢 | 第41-42页 |
参考文献 | 第42-49页 |
附录A:基因序列 | 第49-51页 |
附录B:作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |