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三维串联液质联用蛋白质组学分离方法的建立

摘要第1-3页
ABSTRACT第3-4页
目录第4-6页
第一章 绪论:多维液相色谱分离在复杂蛋白质组学样品鉴定中的应用第6-17页
   ·蛋白质组学基本技术手段第6-9页
     ·蛋白质组学研究中的分离技术第7-8页
       ·凝胶分离技术(gel-based approach)第7页
       ·非凝胶分离技术(gel-free approach)第7-8页
     ·液相色谱-质谱联用的蛋白质组学检测平台第8-9页
   ·多维 LC-MS/MS 在蛋白质组学中的应用第9-15页
     ·二维液相色谱分离系统第9-10页
     ·基于肽段水平一维分离的三维液相色谱分离系统第10-11页
     ·基于蛋白水平一维分离的三维液相色谱分离系统第11-15页
       ·基于离子交换色谱的蛋白预分离第12-13页
       ·基于尺寸排阻色谱的蛋白预分离第13-14页
       ·基于反相色谱的蛋白预分离第14-15页
   ·前景与展望第15-17页
第二章 2-D LC-MS/MS 系统对复杂样品的鉴定第17-29页
   ·前言第17-18页
   ·实验部分第18-23页
     ·材料、试剂和仪器第18-20页
     ·细胞培养第20页
     ·肽段样品制备第20-21页
     ·在线 2-D LC-MS/MS 分析第21-22页
     ·质谱数据分析第22-23页
     ·蛋白的物理化学性质分析第23页
   ·结果与讨论第23-27页
     ·在线的基于分步盐梯度洗脱的 2-D LC-MS/MS第23-25页
     ·蛋白鉴定结果概览第25页
     ·所有蛋白的不重复肽段数目分析第25-26页
     ·蛋白的物理化学性质分析结果第26-27页
   ·小结第27-29页
第三章 基于肽段预分离的 3-D LC-MS/MS 系统对复杂样品的鉴定第29-50页
   ·前言第29-30页
   ·实验部分第30-37页
     ·试剂、材料和仪器第30-31页
     ·肽段样品制备第31-32页
     ·亲水作用色谱模式分离简单肽段样品第32-33页
     ·亲水作用色谱模式分离复杂肽段样品第33-35页
     ·在线 2-D LC-MS/MS 分析第35-36页
     ·质谱数据分析第36页
     ·物理化学性质分析第36-37页
   ·结果与讨论第37-48页
     ·亲水作用色谱模式分离简单肽段样品的情况第37-40页
     ·亲水作用色谱模式分离复杂肽段样品的情况第40-43页
     ·复杂肽段样品的蛋白鉴定结果概览第43-44页
     ·所有蛋白的不重复肽段数目分析第44-45页
     ·高丰度蛋白产生的肽段在所有组分中的分布情况分析第45-47页
     ·鉴定到的蛋白在所有组分中的出现次数分析第47页
     ·蛋白物理化学性质分析结果第47-48页
   ·小结第48-50页
第四章 基于蛋白预分离的 3-D LC-MS/MS 系统对复杂样品的鉴定第50-70页
   ·前言第50-52页
   ·实验部分第52-58页
     ·试剂、材料和仪器第52-54页
     ·复杂蛋白样品制备第54页
     ·混合离子交换色谱模式分离复杂蛋白样品第54-55页
     ·混合离子交换色谱模式分离复杂蛋白样品回收率测定第55页
     ·分离后的蛋白组分 SDS-PAGE 分析第55页
     ·分离后的蛋白组分的酶解第55-56页
     ·在线 2-D LC-MS/MS 分析第56-57页
     ·质谱数据分析第57-58页
     ·蛋白水平分离程度分析第58页
     ·蛋白理化性质分析第58页
   ·结果与讨论第58-68页
     ·Mixed-bed IEX 模式分离复杂蛋白样品的情况第58-60页
     ·分离后的复杂样品 SDS-PAGE 分析结果第60-61页
     ·蛋白鉴定结果第61-62页
     ·高丰度蛋白在 Mixed-bed IEX 分离后组分中的分布情况第62-63页
     ·蛋白水平分离程度分析第63-64页
     ·蛋白的物理化学性质分析结果第64-65页
     ·混合离子交换色谱的保留性质分析第65-68页
   ·小结第68-70页
第五章 总结与展望第70-73页
参考文献第73-79页
致谢第79-80页
攻读学位期间发表的学术论文第80-81页
附件第81-83页

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