| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-20页 |
| ·植物ABC转运蛋白研究进展 | 第10-16页 |
| ·ABC转运蛋白的结构 | 第10-11页 |
| ·ABC转运蛋白的三维结构 | 第11页 |
| ·ABC转运蛋白的作用机理 | 第11-13页 |
| ·植物ABC转运蛋白分类 | 第13-16页 |
| ·蜡梅简介 | 第16-17页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第17-20页 |
| ·实时荧光定量PCR的定义和主要工作原理 | 第17-18页 |
| ·实时荧光定量PCR过程中涉及的概念 | 第18页 |
| ·实时荧光定量PCR过程中的数学理论 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量PCR中的常用方法 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR的应用 | 第19-20页 |
| 第2章 引言 | 第20-22页 |
| ·研究背景和意义 | 第20-22页 |
| 第3章 CpABC基因的克隆与分子特性 | 第22-44页 |
| ·技术路线 | 第22页 |
| ·实验材料 | 第22-23页 |
| ·蜡梅花cDNA文库 | 第22页 |
| ·菌株与载体 | 第22页 |
| ·主要仪器及化学试剂 | 第22-23页 |
| ·自配主要试剂 | 第23页 |
| ·实验方法 | 第23-34页 |
| ·蜡梅DNA提取(CTAB法) | 第23-24页 |
| ·蜡梅DNA初提物纯化 | 第24页 |
| ·蜡梅RNA提取 | 第24-25页 |
| ·蜡梅cDNA一链的合成 | 第25-26页 |
| ·利用hiTAIL-PCR扩增5'中间片段 | 第26-31页 |
| ·CpABC基因5'RACE模板合成(SMARTerTM RACE cDNA Amplification) | 第31页 |
| ·利用5'RACE克隆CpABC基因5'端cDNA序列 | 第31-33页 |
| ·CpABC基因克隆 | 第33-34页 |
| ·实验结果与分析 | 第34-42页 |
| ·蜡梅CpABC基因的克隆 | 第34-35页 |
| ·蜡梅ABC基因编码蛋白的生物信息学分析 | 第35-42页 |
| ·讨论 | 第42-44页 |
| 第4章 原核表达载体和植物表达载体的构建 | 第44-56页 |
| ·技术路线 | 第44页 |
| ·实验材料 | 第44-45页 |
| ·菌株与载体 | 第44页 |
| ·主要仪器及生化试剂 | 第44页 |
| ·常用溶液配方 | 第44-45页 |
| ·常用培养基 | 第45页 |
| ·实验方法 | 第45-52页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第45-48页 |
| ·CpABC蛋白诱导表达 | 第48-49页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第49-52页 |
| ·结果与分析 | 第52-55页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第52页 |
| ·重组质粒pET-28a/ABC在Transetta(DE3)中的诱导表达及检测 | 第52-53页 |
| ·CpABC基因植物表达载体的构建 | 第53-55页 |
| ·结论 | 第55-56页 |
| ·关于CpABC蛋白的原核表达 | 第55页 |
| ·原核表达菌株的选择 | 第55-56页 |
| 第5章 CpABC基因在蜡梅花朵不同组织和不同时期表达的荧光定量分析 | 第56-66页 |
| ·实验材料 | 第56页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第56页 |
| ·主要试剂和设备 | 第56页 |
| ·实验方法 | 第56-59页 |
| ·总RNA的提取和cDNA第一链的合成 | 第56页 |
| ·CpABC基因在蜡梅花不同组织及不同时期表达的荧光定量分析 | 第56-59页 |
| ·实验结果与分析 | 第59-65页 |
| ·总RNA提取 | 第59页 |
| ·引物扩增特异性检测 | 第59-60页 |
| ·熔解曲线分析 | 第60-61页 |
| ·标准曲线分析 | 第61-63页 |
| ·蜡梅CpABC基因在蜡梅花朵不同时期及不同组织中的荧光定量分析 | 第63-65页 |
| ·结论 | 第65-66页 |
| 第6章 讨论 | 第66-68页 |
| ·关于CpABC基因克隆 | 第66页 |
| ·生物信息学分析基因功能的必要性 | 第66页 |
| ·关于CpABC基因的原核表达及植物表达载体的构建 | 第66-67页 |
| ·CpABC基因在蜡梅花的不同花期、不同器官的表达特性分析 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-74页 |
| 缩略词 | 第74-76页 |
| 致谢 | 第76-78页 |
| 发表的论文 | 第78页 |
