| 中文摘要 | 第24-28页 |
| Abstract | 第28-33页 |
| 符号说明 | 第34-37页 |
| 前言 | 第37-42页 |
| 1 SAMC药理作用研究概述 | 第37-39页 |
| 1.1 抗肿瘤机制 | 第38页 |
| 1.2 抗氧化应激 | 第38-39页 |
| 1.3 肝脏保护作用 | 第39页 |
| 2 大蒜硫化物代谢研究概述 | 第39-41页 |
| 3 本课题设计思路 | 第41-42页 |
| 第一章 SAMC合成工艺及其基本性质研究 | 第42-67页 |
| 引言 | 第42-43页 |
| 一、仪器和材料 | 第43页 |
| 1 仪器 | 第43页 |
| 2 试药与试剂 | 第43页 |
| 二、实验方法与结果 | 第43-65页 |
| 1 SAMC的合成工艺 | 第43-45页 |
| 1.1 氧化反应 | 第43-44页 |
| 1.2 取代反应 | 第44页 |
| 1.3 纯度分析 | 第44-45页 |
| 2 结构确证 | 第45-49页 |
| 2.1 紫外吸收光谱 | 第45-46页 |
| 2.2 红外吸收光谱 | 第46页 |
| 2.3 核磁共振氢谱 | 第46-47页 |
| 2.4 核磁共振碳谱 | 第47-48页 |
| 2.5 HRMS确证 | 第48-49页 |
| 3 SAMC分析方法 | 第49-58页 |
| 3.1 色谱条件 | 第49页 |
| 3.2 储备液的制备 | 第49-50页 |
| 3.3 吸收波长的确定 | 第50页 |
| 3.4 方法学验证 | 第50-58页 |
| 3.4.1 系统适用性试验 | 第50页 |
| 3.4.2 专属性试验 | 第50-55页 |
| 3.4.3 线性试验 | 第55-56页 |
| 3.4.4 准确度试验 | 第56-57页 |
| 3.4.5 精密度验证 | 第57页 |
| 3.4.6 耐用性试验 | 第57-58页 |
| 4 SAMC理化性质考察 | 第58-63页 |
| 4.1 性状 | 第58-59页 |
| 4.2 溶解度的测定 | 第59-60页 |
| 4.3 引湿性 | 第60-61页 |
| 4.4 分配系数 | 第61页 |
| 4.5 热重分析 | 第61-62页 |
| 4.6 解离常数 | 第62-63页 |
| 4.7 X-RAY分析 | 第63页 |
| 5 SAMC稳定性考察 | 第63-65页 |
| 5.1 不同pH溶液 | 第63-64页 |
| 5.2 加速试验 | 第64-65页 |
| 三、讨论 | 第65-66页 |
| 四、小结 | 第66-67页 |
| 第二章 SAMC肝中代谢研究 | 第67-84页 |
| 引言 | 第67页 |
| 一、仪器和材料 | 第67-68页 |
| 1 仪器 | 第67-68页 |
| 2 器材 | 第68页 |
| 3 试剂 | 第68页 |
| 4 实验动物 | 第68页 |
| 二、方法与结果 | 第68-82页 |
| 1 肝细胞中代谢 | 第68-71页 |
| 1.1 试剂配制 | 第68-69页 |
| 1.2 肝细胞 | 第69-70页 |
| 1.3 肝细胞染色、计数及活力测定 | 第70页 |
| 1.4 肝细胞代谢 | 第70-71页 |
| 2 肝微粒体模型 | 第71-82页 |
| 2.1 溶液配制 | 第71-72页 |
| 2.2 肝微粒体制备 | 第72-74页 |
| 2.2.1 肝脏获取 | 第72页 |
| 2.2.2 组织匀浆 | 第72页 |
| 2.2.3 差速离心 | 第72页 |
| 2.2.4 重悬沉淀 | 第72页 |
| 2.2.5 蛋白定量 | 第72-74页 |
| 2.3 SAMC在肝微粒体中的代谢 | 第74-80页 |
| 2.3.1 代谢产物的鉴定 | 第74-75页 |
| 2.3.2 不同温孵时间对SAMC代谢的影响 | 第75-76页 |
| 2.3.3 不同蛋白浓度对SAMC代谢的影响 | 第76-77页 |
| 2.3.4 酶促动力学研究 | 第77-78页 |
| 2.3.5 参与SAMC代谢的CYP450鉴定 | 第78-80页 |
| 2.3.6 SAMC对CYP450酶抑制作用 | 第80页 |
| 2.4 样品分析方法 | 第80-82页 |
| 2.4.1 HPLC-UV | 第81页 |
| 2.4.2 GC-MS分析方法 | 第81-82页 |
| 三、讨论 | 第82-83页 |
| 四、小结 | 第83-84页 |
| 第三章 SAMC血中代谢机理研究 | 第84-102页 |
| 引言 | 第84页 |
| 一、仪器和材料 | 第84-85页 |
| 1 仪器 | 第84页 |
| 2 试药与试剂 | 第84-85页 |
| 3 实验动物 | 第85页 |
| 二、实验方法与结果 | 第85-100页 |
| 1 实验相关试药、试液配制 | 第85页 |
| 2 大鼠全血及各成分制备 | 第85-86页 |
| 3 代谢产物的鉴定 | 第86-87页 |
| 4 SAMC的代谢 | 第87-88页 |
| 5 代谢产物的生成 | 第88-89页 |
| 6 代谢部位的确定 | 第89-90页 |
| 6.1 不同血液部位对SAMC代谢的影响 | 第89页 |
| 6.2 不同分子量蛋白对SAMC代谢的影响 | 第89-90页 |
| 7 巯基对SAMC代谢的影响 | 第90-92页 |
| 7.1 内源性含有巯基的化合物对SAMC代谢的作用 | 第90-91页 |
| 7.2 巯基封闭剂的抑制作用 | 第91-92页 |
| 8 在红细胞中代谢动力学的研究 | 第92-94页 |
| 8.1 不同密度红细胞悬浮液的制备 | 第92页 |
| 8.2 反应时间及红细胞密度优化 | 第92页 |
| 8.3 酶促动力学研究 | 第92-93页 |
| 8.4 在红细胞悬液中的代谢动力学 | 第93-94页 |
| 9 血浆蛋白结合试验 | 第94-95页 |
| 10 血红蛋白结合试验 | 第95-100页 |
| 10.1 血红蛋白的制备 | 第95页 |
| 10.2 血红蛋白结合体外试验 | 第95-96页 |
| 10.3 大鼠血红蛋白结合体内实验 | 第96页 |
| 10.4 样品制备 | 第96-97页 |
| 10.4.1 蛋白酶解 | 第96页 |
| 10.4.2 Ziptip处理样品方法 | 第96-97页 |
| 10.5 LC-LTQ位点分析方法 | 第97页 |
| 10.6 体外结合试验结果 | 第97-99页 |
| 10.7 体内结合试验结果 | 第99-100页 |
| 三、讨论 | 第100-101页 |
| 四、小结 | 第101-102页 |
| 第四章 SAMC体内ADME研究 | 第102-129页 |
| 引言 | 第102页 |
| 一、仪器和材料 | 第102-103页 |
| 1 仪器 | 第102页 |
| 2 实验动物 | 第102页 |
| 3 实验相关试药、试液配制 | 第102-103页 |
| 二、方法与结果 | 第103-127页 |
| 1 分析方法建立 | 第103-114页 |
| 1.1 GC-MS分析方法 | 第103-110页 |
| 1.1.1 色谱条件 | 第103页 |
| 1.1.2 样品处理 | 第103-104页 |
| 1.1.3 方法学验证 | 第104-110页 |
| 1.1.3.1 专属性 | 第104-105页 |
| 1.1.3.2 标准曲线与线性范围 | 第105页 |
| 1.1.3.3 精密度试验 | 第105-107页 |
| 1.1.3.4 提取回收率实验 | 第107-109页 |
| 1.1.3.5 稳定性实验 | 第109-110页 |
| 1.1.3.6 定量下限 | 第110页 |
| 1.2 HPLC-MS分析方法 | 第110-114页 |
| 1.2.1 色谱条件 | 第110-111页 |
| 1.2.2 样品处理 | 第111页 |
| 1.2.3 方法学验证 | 第111-114页 |
| 1.2.3.1 专属性 | 第111-112页 |
| 1.2.3.2 线性 | 第112页 |
| 1.2.3.3 精密度和准确度 | 第112-113页 |
| 1.2.3.4 回收率 | 第113页 |
| 1.2.3.5 基质效应 | 第113-114页 |
| 1.2.3.6 稳定性 | 第114页 |
| 2 SAMC口服给药药代研究 | 第114-119页 |
| 2.1 SAMC混悬液制备 | 第114-115页 |
| 2.2 给药方式 | 第115页 |
| 2.3 血浆样品分析 | 第115页 |
| 2.4 代谢物鉴定 | 第115-116页 |
| 2.5 试验数据 | 第116-119页 |
| 3 SAMC注射给药代谢动力学研究 | 第119-122页 |
| 3.1 SAMC注射液制备 | 第119页 |
| 3.2 溶血性试验 | 第119-120页 |
| 3.2.1 2%(V/V)血细胞混悬液的配制 | 第119页 |
| 3.2.2 受试溶液的制备 | 第119页 |
| 3.2.3 操作方法 | 第119-120页 |
| 3.2.4 试验结果 | 第120页 |
| 3.3 给药方案 | 第120-121页 |
| 3.4 试验数据 | 第121-122页 |
| 4 SAMC在小鼠体内组织分布 | 第122-125页 |
| 4.1 给药方式 | 第122页 |
| 4.2 组织样品处理 | 第122-125页 |
| 5 SAMC在大鼠体内的排泄 | 第125-127页 |
| 5.1 给药方式 | 第125页 |
| 5.2 尿液、粪便和胆汁样品的采集 | 第125页 |
| 5.3 样品处理 | 第125-126页 |
| 5.3.1 尿液样品处理 | 第125页 |
| 5.3.2 粪便样品处理 | 第125-126页 |
| 5.3.3 胆汁样品处理 | 第126页 |
| 5.4 分析方法 | 第126页 |
| 5.5 测定结果 | 第126-127页 |
| 三、讨论 | 第127-128页 |
| 四、小结 | 第128-129页 |
| 第五章 SAMC对慢性阻塞性肺病的保护作用 | 第129-154页 |
| 引言 | 第129-130页 |
| 一、仪器与材料 | 第130-131页 |
| 1 药物与细胞 | 第130页 |
| 2 仪器 | 第130页 |
| 3 试剂与试药 | 第130-131页 |
| 二、方法和结果 | 第131-150页 |
| 1 试液配制 | 第131页 |
| 2 统计分析 | 第131-132页 |
| 3 细胞的培养 | 第132页 |
| 4 SPC-A1模型 | 第132-142页 |
| 4.1 细胞的SAMC和LPS处理方法 | 第132页 |
| 4.2 细胞毒性试验 | 第132-133页 |
| 4.3 LPS诱导的SPA-A1细胞中MUC5AC的诱导作用 | 第133-134页 |
| 4.4 SAMC对LPS诱导的SPC-A1细胞中MUC5AC和AQP5表达的影响 | 第134-135页 |
| 4.5 荧光实时定量PCR检测SPC-Al细胞中MUC5AC的mRNA转录水平 | 第135-138页 |
| 4.5.1 Trizol抽提SPC-A1细胞中总RNA | 第135页 |
| 4.5.2 RNA浓度及纯度检测 | 第135-136页 |
| 4.5.3 RNA逆转录成cDNA | 第136页 |
| 4.5.4 目的片段扩增 | 第136-137页 |
| 4.5.5 SAMC对LPS诱导SPC-A1细胞中MUC5AC mRNA转录水平的影响 | 第137-138页 |
| 4.6 Western blot的分析 | 第138-140页 |
| 4.6.1 细胞中浆蛋白和核蛋白的提取 | 第138页 |
| 4.6.2 BCA法测定蛋白的浓度 | 第138-139页 |
| 4.6.3 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第139页 |
| 4.6.4 SAMC对LPS诱导的核转录因子激活的抑制作用 | 第139-140页 |
| 4.7 免疫荧光分析 | 第140-141页 |
| 4.7.1 操作方法 | 第140页 |
| 4.7.2 SAMC对SPC-A1细胞中NF-κB P65核转移的影响 | 第140-141页 |
| 4.8 SAMC对MUC5AC的蛋白修饰作用 | 第141-142页 |
| 4.8.1 分析方法 | 第141-142页 |
| 4.8.2 试验结果 | 第142页 |
| 5 NR8383模型 | 第142-144页 |
| 5.1 NR8383细胞的SAMC和LPS处理方法及分组 | 第142-143页 |
| 5.2 SAMC对LPS诱导的NR8383细胞中SOD、ROS和MDA的影响 | 第143-144页 |
| 5.3 SAMC对LPS诱导的NR8383细胞中TNF-α、IL-1β和IL-8的影响 | 第144页 |
| 5.4 SAMC对LPS诱导的NR8383细胞中P65的影响 | 第144页 |
| 6 大鼠模型 | 第144-150页 |
| 6.1 试验分组及给药方案 | 第145页 |
| 6.2 SAMC对肺灌洗液中炎症细胞和促炎因子的影响 | 第145-146页 |
| 6.3 SAMC对LPS诱导的肺湿重干重比率(W/D)和病理改变的影响 | 第146-148页 |
| 6.4 免疫组化分析 | 第148-149页 |
| 6.5 SAMC对肺部MPO活性及NO水平的影响 | 第149-150页 |
| 三、讨论 | 第150-152页 |
| 四、小结 | 第152-154页 |
| 第六章 SAMC对泊沙康唑所致不良反应的治疗作用 | 第154-167页 |
| 引言 | 第154页 |
| 一、材料和仪器 | 第154-155页 |
| 1 药品 | 第154页 |
| 2 试剂 | 第154-155页 |
| 3 仪器 | 第155页 |
| 4 实验动物 | 第155页 |
| 二、方法和结果 | 第155-164页 |
| 1 POS肠溶制剂的制备 | 第155-159页 |
| 1.1 溶液粘度测量 | 第155-156页 |
| 1.2 制备工艺 | 第156页 |
| 1.3 POS肠溶微球的表征 | 第156-159页 |
| 1.3.1 形态学研究 | 第156-157页 |
| 1.3.2 差示扫描量热法(DSC) | 第157-158页 |
| 1.3.3 粉末X射线衍射(PXRD) | 第158页 |
| 1.3.4 粒度测量 | 第158-159页 |
| 1.3.5 载药量 | 第159页 |
| 1.3.6 微球表面药物 | 第159页 |
| 2 SAMC与POS联用 | 第159-164页 |
| 2.1 实验分组与给药方案 | 第159-160页 |
| 2.2 样本采集 | 第160页 |
| 2.3 统计学分析 | 第160页 |
| 2.4 小鼠形态、体重变化情况 | 第160-161页 |
| 2.4.1 小鼠形态 | 第160页 |
| 2.4.2 小鼠体重变化情况 | 第160-161页 |
| 2.5 炎症因子测定 | 第161-163页 |
| 2.5.1 小鼠血清中TNF-α、IL-1β和IL-8的检测 | 第161-162页 |
| 2.5.2 SOD和MDA的测定 | 第162-163页 |
| 2.6 结肠组织HE染色分析 | 第163-164页 |
| 三、讨论 | 第164-166页 |
| 四、小结 | 第166-167页 |
| 全文总结 | 第167-171页 |
| 一、结论 | 第167-169页 |
| 二、创新与发现 | 第169-170页 |
| 三、展望 | 第170-171页 |
| 参考文献 | 第171-189页 |
| 致谢 | 第189-190页 |
| 博士期间发表的论文及申请的专利 | 第190-191页 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 | 第191页 |
