| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章 综述 | 第11-23页 |
| 1.1 多杀性巴氏杆菌的生物学特性 | 第11-12页 |
| 1.1.1 多杀性巴氏杆菌的血清型分类 | 第11-12页 |
| 1.1.2 多杀性巴氏杆菌的形态学特征及相关特性 | 第12页 |
| 1.1.3 多杀性巴氏杆菌的培养特性及理化特性 | 第12页 |
| 1.2 多杀性巴氏杆菌的危害 | 第12-15页 |
| 1.2.1 猪肺疫和猪萎缩性鼻炎 | 第12页 |
| 1.2.2 出血性败血病 | 第12-13页 |
| 1.2.3 牛流行性肺炎 | 第13-14页 |
| 1.2.4 禽霍乱 | 第14页 |
| 1.2.5 兔巴氏杆菌病 | 第14-15页 |
| 1.3 多杀性巴氏杆菌的毒力因子及致病机理 | 第15-18页 |
| 1.3.1 脂多糖 | 第15-16页 |
| 1.3.2 荚膜 | 第16-17页 |
| 1.3.3 外膜蛋白 | 第17页 |
| 1.3.4 毒素 | 第17-18页 |
| 1.4 多杀性巴氏杆菌病的疫苗研究进展 | 第18-23页 |
| 1.4.1 全菌疫苗 | 第18-20页 |
| 1.4.2 单位疫苗 | 第20-23页 |
| 第二章 猪源多杀性巴氏杆菌5个外膜蛋白基因的克隆、载体构建、原核表达及蛋白纯化 | 第23-39页 |
| 2.1 实验材料 | 第23-25页 |
| 2.1.1 菌株和质粒 | 第23-25页 |
| 2.1.2 PCR引物设计 | 第25页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第25页 |
| 2.2 试验方法和步骤 | 第25-27页 |
| 2.2.1 多杀性巴氏杆菌基因的重组质粒的构建 | 第25-26页 |
| 2.2.2 目的片段在重组表达菌中的诱导表达 | 第26页 |
| 2.2.3 重组蛋白的大量表达、亲和层析纯化 | 第26页 |
| 2.2.4 重组表达蛋白的Western Blot检测 | 第26-27页 |
| 2.3 结果分析 | 第27-37页 |
| 2.3.1 基因的扩增、克隆与鉴定 | 第27页 |
| 2.3.2 质粒的双酶切鉴定 | 第27-28页 |
| 2.3.3 目的片段在重组表达菌中的诱导表达鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.4 重组表达蛋白的Western Blot检测结果 | 第29-30页 |
| 2.3.5 测序结果及生物信息学分析 | 第30-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37-39页 |
| 第三章 猪源多杀性巴氏杆菌5个基因表达产物对小鼠的攻毒保护性试验 | 第39-49页 |
| 3.1 材料与方法 | 第39-40页 |
| 3.1.1 菌株与实验动物 | 第39-40页 |
| 3.1.2 试验所用试剂及仪器 | 第40页 |
| 3.2 实验方法与步骤 | 第40-42页 |
| 3.2.1 CVCC 439菌株在小鼠体内复壮 | 第40-41页 |
| 3.2.2 CVCC 439菌株对KM小鼠LD_(50)测定 | 第41页 |
| 3.2.3 CVCC 439菌株灭活疫苗的制备 | 第41页 |
| 3.2.4 亚单位-铝胶疫苗的制备 | 第41页 |
| 3.2.5 实验动物的分组及免疫程序 | 第41-42页 |
| 3.2.6 免疫小鼠血清酶联免疫法检测抗体水平 | 第42页 |
| 3.2.7 动物攻毒保护性实验 | 第42页 |
| 3.2.8 病原分离 | 第42页 |
| 3.3 试验结果 | 第42-45页 |
| 3.3.1 CVCC 439株对KM小鼠的LD50测定 | 第43页 |
| 3.3.2 CVCC 439灭活疫苗无菌检验与安全检验结果 | 第43页 |
| 3.3.3 各组小鼠抗体水平变化 | 第43-44页 |
| 3.3.4 攻毒保护试验结果 | 第44-45页 |
| 3.4 讨论 | 第45-49页 |
| 3.4.1 关于动物的攻毒保护试验中NlpI疫苗实验组保护效果评估 | 第45-46页 |
| 3.4.2 关于用于小鼠免疫的疫苗的佐剂的选择 | 第46页 |
| 3.4.3 各组小鼠免疫抗体水平与保护性分析 | 第46-49页 |
| 第四章 猪源多杀性巴氏杆菌5个基因表达产物对小鼠的交叉免疫保护性研究 | 第49-59页 |
| 4.1 材料 | 第49-50页 |
| 4.1.1 菌株和试验动物 | 第49-50页 |
| 4.1.2 实验试剂 | 第50页 |
| 4.2 试验步骤 | 第50-51页 |
| 4.2.1 CVCC 444以及CVCC 434菌株在小鼠体内复壮 | 第50页 |
| 4.2.2 CVCC 444以及CVCC 434菌株对KM小鼠LD_(50)测定 | 第50页 |
| 4.2.3 CVCC 444以及CVCC 434菌株灭活疫苗的制备 | 第50页 |
| 4.2.4 亚单位-弗氏完全/不完全佐剂疫苗的制备 | 第50页 |
| 4.2.5 实验动物的分组及免疫程序 | 第50页 |
| 4.2.6 免疫小鼠血清酶联免疫法检测抗体水平 | 第50-51页 |
| 4.2.7 动物攻毒保护性实验 | 第51页 |
| 4.2.8 病原分离 | 第51页 |
| 4.3 试验结果 | 第51-54页 |
| 4.3.1 CVCC 444以及CVCC 434对KM小鼠LD_(50)测定 | 第51页 |
| 4.3.2 CVCC 444以及CVCC 434灭活疫苗无菌检验与安全检验结果 | 第51-52页 |
| 4.3.3 各组小鼠抗体水平变化 | 第52-53页 |
| 4.3.4 攻毒保护试验结果 | 第53-54页 |
| 4.4 讨论 | 第54-56页 |
| 4.5 结论 | 第56-59页 |
| 参考文献 | 第59-75页 |
| 致谢 | 第75-77页 |
| 作者简历 | 第77页 |
