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玉米DULL1煎Shrunken 1基因启动子的克隆与功能分析

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
1 文献综述第8-18页
   ·真核启动子的概述第8-10页
     ·启动子的结构第8-9页
     ·RNA聚合酶第9页
     ·转录因子第9-10页
   ·启动子的类型第10-13页
     ·组成型启动子第10-11页
     ·诱导型启动子第11页
     ·组织特异型启动子第11-13页
   ·启动子序列的分析方法第13-14页
     ·TRANSAFC数据库第13页
     ·PLACE数据库第13页
     ·PlantCARE数据库第13-14页
   ·启动子的功能检测第14-15页
     ·启动子表达活性强弱分析第14页
     ·启动子的缺失分析第14-15页
   ·植物遗传转化法第15-16页
     ·根瘤农杆菌介导的遗传转化法第15页
     ·根瘤农杆菌转化的分子机制第15-16页
     ·其他植物转基因方法第16页
   ·本课题研究目的和意义第16页
   ·本课题的技术路线第16-18页
2 材料和方法第18-31页
   ·材料第18-21页
     ·植物材料第18页
     ·宿主菌与质粒第18页
     ·工具酶和生化试剂第18页
     ·主要仪器设备第18页
     ·常用培养基配制第18-19页
     ·常用抗生素储备液浓度第19页
     ·CTAB法提取植物总DNA所用溶液第19页
     ·碱法提取质粒DNA的溶液配制第19-20页
     ·GUS酶活性检测所用溶液第20页
     ·培养基相关溶液配制第20-21页
   ·实验方法第21-31页
     ·CTAB法提取植物总DNA第21-22页
     ·PCR克隆启动子序列、酶切位点的分析第22-23页
     ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备第23页
     ·DNA片段的回收和纯化第23-24页
     ·PCR扩增片段与pMD18-TVector的连接第24页
     ·接产物转化大肠杆菌DH5α第24页
     ·质粒DNA的提取第24-25页
     ·载体构建全过程及5’端筛检示意图第25-26页
     ·重组质粒的构建第26-27页
     ·农杆菌感受态的制备第27页
     ·重组质粒转化根癌农杆菌第27-28页
     ·根瘤农杆菌介导的水稻转化第28页
     ·转基因植株的hyg基因和目的片段的PCR检测第28-29页
     ·GUS基因的组织化学染色第29页
     ·GUS酶活性检测第29-31页
3 结果与分析第31-44页
   ·DULL1和Shrunken 1基因启动子的克隆与序列分析第31-35页
     ·酶切位点选择第31-32页
     ·片段克隆结果第32页
     ·序列分析结果第32-35页
   ·表达载体的构建结果第35-36页
   ·水稻的遗传转化及转基因植株的分子检测第36-38页
   ·GUS组织染色结果与分析第38-41页
   ·筛检片段的克隆、分析和转基因株的检测第41-42页
   ·GUS定量检测第42-44页
4 讨论第44-46页
5 结论第46-47页
参考文献第47-53页
附录A:中英文缩写与注释第53-54页
附录B:双元表达载体pCAMBIA1301示意图第54-55页
致谢第55-56页
个人简介第56页
攻读硕士学位期间研究成果第56页

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