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内源H2O2和Ca2+参与高表达转玉米C4-pepc基因水稻耐旱性调节

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
符号说明第12-14页
第一部分 文献综述第14-25页
     ·植物体中PEPC分类、结构和功能第14-15页
     ·转C_4-pepc基因的研究进展第15-16页
     ·高表达转玉米C_4-pepc基因水稻的生理特性第16-17页
     ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶与胁迫环境的关系第17-18页
     ·干旱胁迫对作物生长和产量的影响第18页
     ·干旱胁迫对光合的影响第18-19页
     ·干旱胁迫下活性氧(reactive oxygen species,ROS)的产生第19页
     ·干旱胁迫下的抗氧化系统第19-20页
     ·相关信号分子对干旱胁迫的响应第20-22页
       ·过氧化氢与干旱胁迫第20-21页
       ·一氧化氮与干旱胁迫第21页
       ·钙离子与干旱胁迫第21页
       ·过氧化氢、一氧化氮和钙离子的互作与干旱胁迫第21-22页
     ·水稻中干旱胁迫响应基因的研究第22-23页
     ·选题依据及意义第23-25页
技术路线流程图第25-26页
第二部分 外源喷施CaCl_2对高表达转玉米C_4-pepc基因水稻光合的影响第26-32页
     ·材料与方法第26-27页
       ·供试材料及处理第26-27页
       ·光合参数的测定第27页
       ·可溶性蛋白含量测定第27页
       ·叶片Ca~(2+)含量测定第27页
       ·统计与分析第27页
     ·结果与分析第27-30页
       ·两种材料叶片内源钙含量的比较第27-28页
       ·叶面喷施钙对供试水稻光合参数的影响第28-30页
     ·讨论第30-32页
第三部分 PEG-6000和复水条件下高表达转玉米C_4-pepc水稻耐旱性机理的探究第32-54页
     ·材料与方法第32-38页
       ·供试材料第32-33页
       ·材料的干旱胁迫处理第33页
       ·叶片相对含水量(relative water content,RWC)的测定第33页
       ·净光合速率(Pn)和气孔导度(Gs)的测定第33页
       ·可溶性蛋白含量的测定第33页
       ·抗氧化酶活性及丙二醛(MDA)含量的测定第33-34页
       ·H_2O_2和Ca~(2+)含量测定第34页
       ·PEPC酶活性测定第34-35页
       ·蛋白激酶活性测定第35页
     ·总RNA提取和荧光定量PCR第35-37页
       ·统计与分析第37-38页
     ·结果第38-50页
       ·PEG6000处理下PC维持较高的相对含水量第38-39页
       ·PEG6000处理下PC的净光合速率降低较少第39-40页
       ·在转pepc水稻中H_2O_2和Ca~(2+)含量的变化是感受干旱逆境的最初元件第40-42页
       ·总蛋白酶活性的增强和PEPC酶活性诱导的增加则是PC快速感受干旱逆境的中间环节第42-43页
       ·在转录水平转pepc水稻体内转录因子的高表达促进了C_4-pepc基因诱导增强是响应干旱逆境的重要步骤第43-45页
       ·PEG处理下在转录水平上诱导抗氧化酶基因的增加和诱导了抗氧化酶活性在复水过程的增强是PC体内响应干旱的重要生理机制第45-47页
       ·供试材料各参数之间的相关性分析第47-50页
     ·讨论第50-54页
第四部分 高表达转玉米C_4-pepc水稻悬浮细胞通过H_2O_2和~(2+)提高对20% PEG处理的耐氧化特性第54-76页
     ·材料与方法第54-59页
       ·供试材料第54页
       ·水稻悬浮细胞系的建立第54-55页
       ·外源化学试剂的引入第55页
       ·悬浮细胞生长曲线的测定和台盼蓝染色第55页
       ·超氧阴离子自由基含量和丙二醛含量测定第55-56页
       ·可溶性蛋白含量的测定第56页
       ·过氧化氢(H_2O_2)和Ca~(2+)含量测定第56页
       ·一氧化氮(NO)含量的测定第56页
       ·磷酸烯醇式丙酮酸羧化酶(PEPC)活性测定第56-57页
       ·总RNA提取和半定量PCR第57-59页
       ·统计与分析第59页
     ·结果第59-72页
       ·供试材料悬浮细胞的生长曲线和20% PEG渗透胁迫下悬浮细胞完整度第59-61页
       ·PEG处理下悬浮细胞中O_2~·产生速率和MDA含量的变化第61-62页
       ·悬浮细胞内H_2O_2、NO和Ca~(2+)对PEG渗透胁迫的响应第62-64页
       ·不同外源试剂对PEG胁迫下供试材料O_2~·产生速率和MDA含量的影响第64-67页
       ·不同外源试剂对PEG胁迫下供试材料H_2O_2含量的影响第67-68页
       ·不同外源试剂对PEG胁迫下供试材料NO含量的影响第68-69页
       ·不同外源试剂对PEG胁迫下供试材料Ca~(2+)浓度的影响第69-71页
       ·不同外源试剂对PEG胁迫下供试材料PEPC活性和pepc基因表达的影响第71-72页
     ·讨论第72-76页
参考文献第76-88页
全文总结第88-90页
致谢第90-92页
硕士攻读期间发表论文第92页

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