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胆固醇结合基序对mCRP与配体互作调控的机制研究

摘要第1-4页
Abstract第4-8页
第一章 引言第8-18页
   ·五聚体C反应蛋白简介(Pentameric C-reactive protein)第8-9页
   ·CRP与炎症第9-10页
   ·CRP的体外研究与动物模型第10-11页
   ·五聚体CRP解离为mCRP第11-12页
   ·mCRP与炎症第12-14页
   ·mCRP与配体第14-15页
   ·mCRP的潜在研究价值第15页
   ·固有无序蛋白(intrinsically disorder proteins,IDPs)第15-17页
   ·本文的研究意义第17-18页
第二章 材料与方法第18-31页
   ·mCRP突变体蛋白的表达和纯化步骤第18-21页
     ·mCRP突变体的构建第18-19页
     ·mCRP突变体蛋白的表达和纯化第19-20页
     ·脲变性mCRP的制备:第20页
     ·SDS-PAGE第20-21页
     ·BCA法测定蛋白浓度第21页
   ·圆二色谱技术第21-22页
   ·荧光光谱分析第22-23页
     ·内源荧光第22-23页
     ·ANS荧光第23页
   ·蛋白与配体的结合第23-24页
   ·单层膜插膜实验第24页
   ·分子动力学模拟第24-27页
     ·MD的模拟步骤第25页
     ·力场参数的选择第25页
     ·系统构建第25-26页
     ·分析方法第26-27页
   ·单核细胞和内皮细胞的粘附第27-29页
     ·细胞第27-28页
     ·粘附实验第28页
     ·流式细胞实验第28-29页
   ·小鼠的炎症诱导第29-31页
     ·小鼠腹腔注射步骤第29页
     ·ELISA检测腹腔液中IL-6 的分泌第29-31页
第三章 结果与分析第31-53页
   ·mCRP突变体的表达纯化第31-36页
     ·质粒构建第31页
     ·蛋白表达纯化第31-36页
   ·CRP来源多肽的合成第36-38页
   ·CBS缺失的mCRP突变体蛋白削弱了与配体的结合能力第38-43页
     ·mCRP突变体蛋白与ApoB的结合第38-39页
     ·mCRP突变体蛋白与C1q的结合第39页
     ·mCRP突变体蛋白与FN、FIB和IV型胶原的结合第39-41页
     ·mCRP突变体蛋白与胆固醇的结合第41-42页
     ·膜天平插膜实验第42-43页
   ·CBS序列的固有无序性和其构像特征第43-46页
     ·分子动力学模拟第44页
     ·NAMD模拟中碳原子骨架相对时间的RMSD变化第44-45页
     ·MD模拟的肽段二级结构可视化结果第45页
     ·MD模拟过程中肽段在不同时间点的构像叠加第45-46页
   ·细胞水平CBS对mCRP促炎功能的影响第46-48页
     ·单核-内皮粘附第46-47页
     ·流式细胞术检测粘附因子的释放第47-48页
     ·不同浓度的mCRP对单核-内皮粘附的影响第48页
   ·小鼠中CBS肽段对mCRP的影响第48-49页
   ·结果与讨论第49-53页
     ·实验模式图第49-50页
     ·讨论第50-53页
参考文献第53-59页
在学期间研究成果第59-60页
致谢第60页

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