摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
第一章 引言 | 第8-18页 |
·五聚体C反应蛋白简介(Pentameric C-reactive protein) | 第8-9页 |
·CRP与炎症 | 第9-10页 |
·CRP的体外研究与动物模型 | 第10-11页 |
·五聚体CRP解离为mCRP | 第11-12页 |
·mCRP与炎症 | 第12-14页 |
·mCRP与配体 | 第14-15页 |
·mCRP的潜在研究价值 | 第15页 |
·固有无序蛋白(intrinsically disorder proteins,IDPs) | 第15-17页 |
·本文的研究意义 | 第17-18页 |
第二章 材料与方法 | 第18-31页 |
·mCRP突变体蛋白的表达和纯化步骤 | 第18-21页 |
·mCRP突变体的构建 | 第18-19页 |
·mCRP突变体蛋白的表达和纯化 | 第19-20页 |
·脲变性mCRP的制备: | 第20页 |
·SDS-PAGE | 第20-21页 |
·BCA法测定蛋白浓度 | 第21页 |
·圆二色谱技术 | 第21-22页 |
·荧光光谱分析 | 第22-23页 |
·内源荧光 | 第22-23页 |
·ANS荧光 | 第23页 |
·蛋白与配体的结合 | 第23-24页 |
·单层膜插膜实验 | 第24页 |
·分子动力学模拟 | 第24-27页 |
·MD的模拟步骤 | 第25页 |
·力场参数的选择 | 第25页 |
·系统构建 | 第25-26页 |
·分析方法 | 第26-27页 |
·单核细胞和内皮细胞的粘附 | 第27-29页 |
·细胞 | 第27-28页 |
·粘附实验 | 第28页 |
·流式细胞实验 | 第28-29页 |
·小鼠的炎症诱导 | 第29-31页 |
·小鼠腹腔注射步骤 | 第29页 |
·ELISA检测腹腔液中IL-6 的分泌 | 第29-31页 |
第三章 结果与分析 | 第31-53页 |
·mCRP突变体的表达纯化 | 第31-36页 |
·质粒构建 | 第31页 |
·蛋白表达纯化 | 第31-36页 |
·CRP来源多肽的合成 | 第36-38页 |
·CBS缺失的mCRP突变体蛋白削弱了与配体的结合能力 | 第38-43页 |
·mCRP突变体蛋白与ApoB的结合 | 第38-39页 |
·mCRP突变体蛋白与C1q的结合 | 第39页 |
·mCRP突变体蛋白与FN、FIB和IV型胶原的结合 | 第39-41页 |
·mCRP突变体蛋白与胆固醇的结合 | 第41-42页 |
·膜天平插膜实验 | 第42-43页 |
·CBS序列的固有无序性和其构像特征 | 第43-46页 |
·分子动力学模拟 | 第44页 |
·NAMD模拟中碳原子骨架相对时间的RMSD变化 | 第44-45页 |
·MD模拟的肽段二级结构可视化结果 | 第45页 |
·MD模拟过程中肽段在不同时间点的构像叠加 | 第45-46页 |
·细胞水平CBS对mCRP促炎功能的影响 | 第46-48页 |
·单核-内皮粘附 | 第46-47页 |
·流式细胞术检测粘附因子的释放 | 第47-48页 |
·不同浓度的mCRP对单核-内皮粘附的影响 | 第48页 |
·小鼠中CBS肽段对mCRP的影响 | 第48-49页 |
·结果与讨论 | 第49-53页 |
·实验模式图 | 第49-50页 |
·讨论 | 第50-53页 |
参考文献 | 第53-59页 |
在学期间研究成果 | 第59-60页 |
致谢 | 第60页 |