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过表达IbP5CR、IbERD3、IbELT、IbNFU1基因的甘薯植株的获得及耐盐性鉴定

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-15页
缩写词表第15-17页
引言第17-18页
第一章 文献综述第18-32页
   ·植物耐盐机理研究进展第18-29页
     ·渗透调节机制第18-20页
     ·离子平衡与跨膜运输第20页
     ·ROS清除系统第20-21页
     ·盐胁迫信号传导途径第21-24页
     ·转录调控和蛋白修饰第24-26页
     ·光合作用第26-27页
     ·P5CR基因研究进展第27页
     ·ERD3基因研究进展第27页
     ·ELT基因研究进展第27-28页
     ·NFU基因研究进展第28-29页
   ·甘薯耐盐育种研究进展第29-31页
     ·甘薯耐盐基因克隆研究进展第29-30页
     ·甘薯耐盐转基因育种研究进展第30页
     ·甘薯耐盐诱变育种研究进展第30-31页
   ·本研究的目的和意义第31-32页
第二章 过表达IbP5CR基因甘薯植株的获得及耐盐性鉴定第32-67页
   ·材料与方法第32-48页
     ·植物材料第32页
     ·甘薯胚性细胞悬浮培养系的建立第32-33页
     ·根癌农杆菌菌液的制备第33-35页
     ·甘薯遗传转化与植株再生第35-36页
     ·转基因植株的GUS检测第36-37页
     ·转基因植株基因组DNA的提取第37-38页
     ·转基因植株的PCR检测第38页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第38页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第38-39页
     ·转基因植株的SOD活性测定第39-41页
     ·转基因植株的MDA含量测定第41页
     ·转基因植株的水培鉴定第41-42页
     ·转基因植株的盆栽鉴定第42页
     ·转基因植株的田间耐盐性鉴定第42页
     ·转基因植株的Southern blot检测第42-46页
     ·转基因植株光合活性测定第46页
     ·转基因植株H_2O_2积累量分析第46页
     ·转基因植株总RNA的提取第46-47页
     ·转基因植株总RNA的反转录第47-48页
     ·转基因植株脯氨酸合成、光合作用和ROS清除相关基因的实时荧光定量PCR分析第48页
   ·结果与分析第48-64页
     ·胚性愈伤组织的诱导第48-50页
     ·胚性细胞悬浮培养系的建立第50页
     ·Hyg抗性愈伤组织的形成第50页
     ·拟转基因植株的再生第50-51页
     ·转基因植株的GUS检测第51页
     ·转基因植株的PCR分析第51-52页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第52-53页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第53-54页
     ·转基因植株的SOD活性测定第54页
     ·转基因植株的MDA含量测定第54页
     ·转基因植株的驯化与移栽第54-56页
     ·转基因植株的耐盐性水培鉴定第56-58页
     ·转基因植株的耐盐性盆栽鉴定第58-59页
     ·转基因植株的耐盐性田间鉴定第59-60页
     ·耐盐转基因株系的Southern blot分析第60页
     ·耐盐转基因株系的光合活性分析第60-62页
     ·耐盐转基因株系的H_2O_2积累量分析第62页
     ·耐盐转基因株系的脯氨酸合成、光合作用和ROS清除相关基因表达分析第62-64页
   ·讨论第64-67页
     ·IbP5CR基因的过表达显著增强甘薯植株的耐盐性第64页
     ·IbP5CR基因的过表达调节甘薯植株的渗透平衡,保护膜完整性第64-65页
     ·IbP5CR基因的过表达保护转基因植株的光合活性第65页
     ·IbP5CR基因的过表达激活转基因植株的ROS清除系统第65-66页
     ·过表达IbP5CR基因甘薯植株的盐胁迫响应及耐盐分子机制第66-67页
第三章 过表达IbERD3基因甘薯植株的获得及耐盐性鉴定第67-90页
   ·材料与方法第67-75页
     ·植物材料第67页
     ·IbERD3基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第67页
     ·IbERD3基因原核表达载体的构建第67-70页
     ·IbERD3基因重组表达菌的诱导表达和检测第70-71页
     ·植物表达载体的构建第71-73页
     ·根癌农杆菌茵液的制备第73页
     ·甘薯胚性细胞悬浮培养系的建立第73页
     ·甘薯遗传转化与植株再生第73-74页
     ·转基因植株的PCR检测第74页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第74页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第74页
     ·转基因植株的SOD活性测定第74页
     ·转基因植株的MDA含量测定第74页
     ·转基因植株的水培鉴定第74页
     ·转基因植株的盆栽鉴定第74页
     ·转基因植株光合活性测定第74-75页
     ·转基因植株qRT-PCR分析第75页
   ·结果与分析第75-88页
     ·IbERD3基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第75页
     ·IbERD3基因原核表达分析第75-76页
     ·IbERD3基因植物表达载体的构建第76-77页
     ·胚性愈伤组织的诱导第77-78页
     ·胚性细胞悬浮培养系的建立第78页
     ·PPT抗性愈伤组织的形成第78页
     ·拟转基因植株的再生第78-79页
     ·转基因植株的PCR分析第79页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第79-80页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第80页
     ·转基因植株的SOD活性测定第80页
     ·转基因植株的MDA含量测定第80页
     ·转基因植株的驯化与移栽第80页
     ·转基因植株的耐盐性水培鉴定第80-84页
     ·转基因植株的耐盐性盆栽鉴定第84-86页
     ·耐盐转基因株系的光合活性分析第86-87页
     ·耐盐转基因甘薯株系的qRT-PCR分析第87-88页
   ·讨论第88-90页
     ·IbERD3基因是一个盐胁迫和ABA响应基因第88页
     ·IbERD3基因的过表达显著提高甘薯植株的耐盐性第88页
     ·过表达IbERD3基因甘薯植株的盐胁迫响应及耐盐分子机制第88-90页
第四章 过表达IbELT基因甘薯植株的获得及耐盐性鉴定第90-104页
   ·材料与方法第90-92页
     ·植物材料第90页
     ·IbELT基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第90页
     ·植物表达载体的构建第90页
     ·根癌农杆菌菌液的制备第90页
     ·甘薯胚性细胞悬浮培养系的建立第90页
     ·遗传转化与植株再生第90页
     ·转基因植株的PCR检测第90-91页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第91页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第91页
     ·转基因植株的SOD活性测定第91页
     ·转基因植株的MDA含量测定第91页
     ·转基因植株的水培鉴定第91页
     ·转基因植株的盆栽鉴定第91页
     ·转基因植株光合活性测定第91页
     ·转基因植株的qRT-PCR分析第91-92页
   ·结果与分析第92-103页
     ·IbELT基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第92页
     ·IbELT基因植物表达载体的构建第92-93页
     ·胚性愈伤组织的诱导第93页
     ·胚性细胞悬浮培养系的建立第93-94页
     ·PPT抗性愈伤组织的形成第94页
     ·拟转基因植株的再生第94页
     ·转基因植株的PCR分析第94-95页
     ·转基因植株的耐盐性离体鉴定第95页
     ·转基因植株的脯氨酸含量测定第95-96页
     ·转基因植株的SOD活性测定第96页
     ·转基因植株的MDA含量测定第96页
     ·转基因植株的驯化与移栽第96页
     ·转基因植株的耐盐性水培鉴定第96-100页
     ·转基因植株的耐盐性盆栽鉴定第100-101页
     ·耐盐转基因甘薯株系的光合活性分析第101-102页
     ·耐盐转基因甘薯株系的qRT-PCR分析第102-103页
   ·讨论第103-104页
     ·IbELT基因是一个盐胁迫响应基因第103页
     ·IbELT基因的过表达提高甘薯植株的耐盐性第103-104页
第五章 过表达IbNFU1基因甘薯植株的耐盐性鉴定第104-114页
   ·材料与方法第104-105页
     ·植物材料第104页
     ·IbNFU1基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第104页
     ·转基因植株的耐盐性盆栽鉴定第104页
     ·转基因植株Southern blot分析第104页
     ·转基因植株的光合活性测定第104页
     ·转基因植株H_2O_2积累量分析第104-105页
     ·转基因植株抗坏血酸盐含量测定第105页
     ·转基因植株脯氨酸合成、光合作用和ROS清除相关基因的qRT-PCR分析第105页
   ·结果与分析第105-110页
     ·IbNFU1基因在甘薯耐盐品系ND98中的表达分析第105-106页
     ·转基因植株的耐盐性盆栽鉴定第106-107页
     ·耐盐转基因甘薯株系的Southern blot分析第107页
     ·耐盐转基因甘薯株系的qRT-PCR分析第107页
     ·耐盐转基因甘薯株系的光合活性分析第107页
     ·耐盐转基因甘薯株系的H_2O_2积累量分析第107-109页
     ·耐盐转基因甘薯株系的抗坏血酸盐含量测定第109-110页
     ·耐盐转基因甘薯株系脯氨酸合成、光合作用和ROS清除相关基因表达分析第110页
   ·讨论第110-114页
     ·IbNFU1基因的过表达显著提高甘薯植株的耐盐性第110页
     ·IbNFU1基因的过表达增加转基因植株的脯氨酸含量第110-112页
     ·IbNFU1基因的过表达保护转基因植株的光合活性第112页
     ·IbNFU1基因的过表达激活抗坏血酸盐介导的ROS清除系统第112页
     ·过表达IbNFU1基因甘薯植株的盐胁迫响应及耐盐分子机制第112-114页
第六章 综合讨论第114-116页
   ·甘薯耐盐性的鉴定方法第114页
   ·基因插入拷贝数、表达量和转基因甘薯耐盐性的关系第114-115页
   ·IbP5CR、IbERD3、IbELT和IbNFU1基因的耐盐机制第115-116页
第七章 结论第116-117页
参考文献第117-133页
致谢第133-135页
个人简介第135页

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