中文摘要 | 第1-12页 |
Abstract | 第12-18页 |
第一章 绪论 | 第18-30页 |
·芸薹属植物自交不亲和反应 | 第18-26页 |
·S基因座相关SI基因 | 第18-21页 |
·S基因座的结构 | 第21-22页 |
·SRK下游的SI相关基因(THL,ARC1,MLPK,EXO70A1) | 第22-25页 |
·自交不亲和反应途径 | 第25-26页 |
·蛋白质互作与SI反应之间的关系 | 第26-27页 |
·研究蛋白质互作的常用技术 | 第26-27页 |
·蛋白质互作与SI反应之间的关联 | 第27页 |
·基因定位与基因定位的常用技术 | 第27-30页 |
·分子杂交法 | 第28-29页 |
·其他的基因定位技术 | 第29-30页 |
第二章 引言 | 第30-32页 |
第三章 甘蓝SI元件(SRK、ARC1和EXO70A1)编码基因的克隆与分析 | 第32-90页 |
·材料与方法 | 第32-37页 |
·试验材料 | 第32页 |
·引物设计 | 第32页 |
·总RNA提取和cDNA合成 | 第32-34页 |
·基因组DNA的提取 | 第34-35页 |
·基因及其编码区(coding sequence,CDS)的扩增 | 第35页 |
·大肠杆菌的培养与感受态细胞的制备 | 第35-36页 |
·三种基因的生物信息学分析 | 第36-37页 |
·EXO70A1在酵母中的表达分析 | 第37页 |
·EXO70A1在甘蓝中的表达分析 | 第37页 |
·SRK的克隆与序列分析 | 第37-60页 |
·SRK6的CDS的克隆 | 第37-38页 |
·SRK的序列分析 | 第38-57页 |
·SRK的功能域分析 | 第57-60页 |
·ARC1的克隆与分析 | 第60-67页 |
·ARC1的序列分析 | 第60-63页 |
·ARC1的结构分析 | 第63-65页 |
·ARC1的结构域分析 | 第65-67页 |
·EXO70A1的克隆与分析 | 第67-85页 |
·EXO70A1的克隆与分析 | 第67-83页 |
·EXO70A1的表达分析 | 第83-85页 |
·讨论 | 第85-89页 |
·ARC1的功能以及基于序列探讨甘蓝型油菜、甘蓝与白菜的亲缘关系 | 第85-86页 |
·EXO70A1基因的进化保守性 | 第86-87页 |
·SRK基因在芸薹属植物中的高变性与保守性 | 第87-88页 |
·SRK、ARC1和EXO70A1在芸薹属植物中的表达 | 第88-89页 |
·结论 | 第89-90页 |
第四章 三种SI关键元件编码基因在甘蓝染色体上的定位 | 第90-106页 |
·材料与方法 | 第90-92页 |
·试验材料 | 第90页 |
·探针的标记 | 第90页 |
·染色体与染色体纤维的制备 | 第90-91页 |
·荧光原位杂交 | 第91-92页 |
·应用Blast搜索辅助基因的染色体定位 | 第92页 |
·结果 | 第92-102页 |
·DNA纤维的制备 | 第92-94页 |
·染色体纤维质量的鉴定 | 第94-96页 |
·SRK基因定位 | 第96-98页 |
·ARC1基因的染色体定位 | 第98-100页 |
·EXO70A1的定位 | 第100-102页 |
·讨论 | 第102-104页 |
·结论 | 第104-106页 |
第五章 3种SI关键元件(SRK、ARC1和EX070A1)之间的相互作用 | 第106-124页 |
·材料与方法 | 第106-109页 |
·试验材料 | 第106页 |
·重组“猎物(activation domain,AD)”载体的构建和鉴定 | 第106-107页 |
·重组“诱饵(binding domain,BD)”载体转化酵母细胞Y2HGold | 第107页 |
·pGBKT7-ARC1和pGBKT7-ARC1_T对酵母Y2HGold毒性的检测 | 第107-108页 |
·自身转录激活活性鉴定 | 第108页 |
·ARC1(ARC1_T)与SRK_J之间相互作用检测 | 第108页 |
·ARC1(ARC1_T)与EXO7OA1之间相互作用检测 | 第108-109页 |
·结果与分析--酵母细胞的融合及检测 | 第109-113页 |
·重组“诱饵”质粒pGBKT7-ARC1与pGBKT7-ARC1_T的鉴定 | 第109-111页 |
·重组“猎物”质粒pGADT7-EXO70A1与pGADT7-SRK_J的鉴定 | 第111页 |
·重组质粒的毒性及自激活检测分析 | 第111-112页 |
·转化细胞Y187与Y2HGold之间的融合 | 第112-113页 |
·结果与分析--三种SI元件之间的相互作用 | 第113-119页 |
·SRK_J和ARC1之间的互作 | 第113-114页 |
·EXO70A1与ARC1之间相互作用检测分析 | 第114-117页 |
·EXO70A1-ARC1互作的序列分析 | 第117-119页 |
·讨论 | 第119-121页 |
·结论 | 第121-124页 |
第六章 论文创新点和不足之处 | 第124-125页 |
·论文创新点 | 第124页 |
·论文的不足之处 | 第124-125页 |
参考文献 | 第125-136页 |
酵母双杂交载体 | 第136-137页 |
Gold酵母双杂交系统报告基因 | 第137-138页 |
缩略词表 | 第138-140页 |
在读期间发表论文目录及参研课题情况 | 第140-142页 |
致谢 | 第142页 |