柑橘裂皮病毒侵染对寄主基因表达的影响研究
| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第10-11页 |
| 1 文献综述 | 第11-16页 |
| ·柑橘裂皮类病毒生物学特性 | 第11-12页 |
| ·类病毒的分类地位及分子特性 | 第12页 |
| ·类病毒与寄主的互作对其在植物体内移动的影响 | 第12-13页 |
| ·类病毒引起的细胞内病理变化与基因沉默 | 第13-14页 |
| ·类病毒侵染引起的寄主基因表达差异分析相关研究 | 第14-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-23页 |
| ·供试材料与试剂 | 第16页 |
| ·引物的设计与合成 | 第16页 |
| ·RNA的提取 | 第16-18页 |
| ·环状RNA的提取 | 第16-17页 |
| ·总RNA的提取 | 第17-18页 |
| ·Dnase的消化 | 第18-19页 |
| ·RT-PCR | 第19页 |
| ·凝胶电泳 | 第19-20页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳及染色 | 第19页 |
| ·变性及非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳及染色 | 第19-20页 |
| ·目标片段的回收与纯化 | 第20页 |
| ·大肠杆菌DH5a感受态细胞的制备 | 第20页 |
| ·连接与转化(E.coli) | 第20-21页 |
| ·序列测定及分析 | 第21页 |
| ·保存菌株活化及质粒DNA的小量制备 | 第21页 |
| ·体外转录及纯化 | 第21-22页 |
| ·接种 | 第22页 |
| ·接种材料的基因芯片分析 | 第22-23页 |
| 3 结果与分析 | 第23-38页 |
| ·植物材料的接种前检测 | 第23页 |
| ·体外构建具有侵染性的二聚体RNA | 第23-24页 |
| ·接种材料的带毒检测 | 第24-26页 |
| ·接种材料的基因芯片分析 | 第26-30页 |
| ·下调表达基因的验证 | 第30-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 参考文献 | 第40-46页 |
| 附录A：主要试剂及溶液的配制 | 第46-48页 |
| 附录B：根据芯片分析结果克隆到的序列 | 第48-51页 |
| 附录C：研究生期间第一署名发表的论文 | 第51-52页 |
| 致谢 | 第52页 |
