| 中文摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-12页 |
| 第一部分 兔椎间盘纤维环细胞的培养及生物学特性的观察 | 第12-18页 |
| 一、实验材料与实验方法 | 第12-15页 |
| (一) 实验材料 | 第12-13页 |
| 1. 实验动物 | 第12页 |
| 2. 实验试剂 | 第12页 |
| 3. 实验耗材 | 第12-13页 |
| 4. 实验仪器 | 第13页 |
| 5. 其他 | 第13页 |
| (二) 实验方法 | 第13-15页 |
| 1. 纤维环细胞的制取及培养 | 第13-14页 |
| 2. 检测指标及方法 | 第14-15页 |
| 二、实验结果 | 第15-16页 |
| (一) 细胞形态观察 | 第15页 |
| (二) 细胞活力检测 | 第15页 |
| (三) 组织学观察 | 第15页 |
| (四) MTT绘制生长曲线 | 第15-16页 |
| 三、实验分析与讨论 | 第16-17页 |
| (一) 椎间盘细胞培养的难点 | 第16页 |
| 1. 降低消化酶浓度是关键 | 第16页 |
| 2. 酶消化法与组织块法联合培养 | 第16页 |
| 3. 控制细胞密度及培养液高度 | 第16页 |
| (二) 实验细胞的选择 | 第16-17页 |
| 四、小结 | 第17-18页 |
| 第二部分 不同H_2O_2氧化应激浓度对纤维环细胞的影响 | 第18-23页 |
| 一、实验材料与实验方法 | 第18-19页 |
| (一) 实验材料 | 第18页 |
| 1. 实验动物 | 第18页 |
| 2. 实验试剂 | 第18页 |
| 3. 实验耗材 | 第18页 |
| 4. 实验仪器 | 第18页 |
| (二) 实验方法 | 第18-19页 |
| 1. 纤维环细胞的制取及培养 | 第18页 |
| 2. 检测指标及方法 | 第18-19页 |
| 二、实验结果 | 第19-21页 |
| (一) 细胞组织学观察 | 第19-20页 |
| (二) 细胞活力测定 | 第20页 |
| (三) 细胞增殖情况 | 第20页 |
| (四) 衰老相关-β-半乳糖苷酶活性检测 | 第20-21页 |
| (五) 细胞周期及凋亡检测 | 第21页 |
| 三、分析与讨论 | 第21-22页 |
| 四、小结 | 第22-23页 |
| 第三部分 P38MAPK抑制剂对氧化应激诱导的纤维环细胞生物特性的影响 | 第23-29页 |
| 一、实验材料与实验方法 | 第23-24页 |
| (一) 实验材料 | 第23页 |
| 1. 实验动物 | 第23页 |
| 2. 实验试剂 | 第23页 |
| 3. 实验耗材 | 第23页 |
| 4. 实验仪器 | 第23页 |
| (二) 实验方法 | 第23-24页 |
| 1. 纤维环细胞的制取及培养 | 第23页 |
| 2. 分组及细胞预处理 | 第23-24页 |
| 3. 检测指标及方法 | 第24页 |
| 二、实验结果 | 第24-27页 |
| (一) 细胞组织学观察 | 第24-25页 |
| (二) 细胞活力测定 | 第25页 |
| (三) 细胞增殖情况 | 第25-26页 |
| (四) 衰老相关-β-半乳糖苷酶活性检测 | 第26页 |
| (五) 细胞周期及凋亡检测 | 第26-27页 |
| 三、分析与讨论 | 第27-28页 |
| (一) P38 MAPK阻滞剂对衰老的纤维环细胞有效 | 第27页 |
| (二) P38 MAPK阻滞剂无法完全逆转衰老 | 第27-28页 |
| 四、小结 | 第28-29页 |
| 第四部分 P38MAPK抑制剂对氧化应激诱导的纤维环细胞基因表达的影响 | 第29-33页 |
| 一、实验材料与实验方法 | 第29-31页 |
| (一) 实验材料 | 第29-30页 |
| 1. 实验动物 | 第29页 |
| 2. 实验试剂 | 第29页 |
| 3. 实验耗材 | 第29页 |
| 4. 实验仪器 | 第29-30页 |
| 5. 其他 | 第30页 |
| (二) 实验方法 | 第30-31页 |
| 1. 纤维环细胞的制取及培养 | 第30页 |
| 2. 分组及细胞预处理 | 第30页 |
| 3. 逆转录PCR检测P38、P53、P16、PRb mRNA的表达 | 第30页 |
| 4. 数据统计与分析 | 第30-31页 |
| 二、实验结果 | 第31页 |
| 三、分析与讨论 | 第31页 |
| 四、小结 | 第31-33页 |
| 结论 | 第33-34页 |
| 参考文献 | 第34-35页 |
| 附图 | 第35-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 文献综述 | 第42-50页 |
| 参考文献 | 第47-50页 |
