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桉树CAD、COMT基因的RNAi载体构建及烟草转化研究

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-8页
缩略词第8-11页
1 文献综述第11-29页
   ·木质素的结构第11-12页
   ·木质素生物合成途径及调控基因第12-14页
   ·木质素基因工程调控研究进展第14-18页
     ·苯丙烷途径的生物调控第14-16页
     ·木质素单体特异合成途径的生物调控第16-17页
     ·木质素特异合成途径的生物调控第17-18页
   ·RNA干扰第18-22页
     ·RNAi的发现第18-19页
     ·RNAi的机制和原理第19-20页
     ·RNAi技术在植物生物学中的应用第20-22页
   ·植物遗传转化技术第22-27页
     ·载体介导法第23-24页
     ·直接转化法第24-27页
   ·目的意义、研究内容与技术路线第27-29页
2 材料与方法第29-49页
   ·实验材料与试剂第29-32页
     ·植物材料第29页
     ·菌株和质粒第29-30页
     ·主要仪器设备和试剂第30-32页
   ·实验方法第32-49页
     ·烟草无菌苗的培养第32-33页
     ·CAD、COMT的RNAi干扰片段的获得第33-36页
     ·植物干扰载体pRi-cE-Ec-CDA、pRi-Ec-COMT的构建第36-44页
     ·pRi-Ec-CAD、pRi-Ec-COMT的农杆菌转化第44-45页
     ·叶盘法转化烟草第45页
     ·转基因植株的形态观察及检测分析第45-49页
3 结果与分析第49-67页
   ·CAD、COMT基因RNA干扰片段的选择第49-51页
     ·桉树CAD基因RNAi片段的选择第49-50页
     ·桉树COMT基因RNAi片段的选择第50-51页
   ·PCR扩增CAD、COMT正、反义基因干扰片段第51-52页
   ·CAD、COMT基因RNAI载体的设计和构建第52-56页
     ·CAD、COMT正义基因干扰片段转载第53-54页
     ·CAD、COMT反义基因干扰片段转载第54-55页
     ·CAD、COMT基因正、反义基因干扰片段连接及转化第55-56页
   ·RNA干扰载体PRI-EC-CAD、PRI-EC-COMT的农杆菌转化检测第56-58页
     ·菌液PCR验证第56-57页
     ·酶切验证第57-58页
   ·烟草转化及抗性筛选第58-59页
   ·转化植株的PCR检测及干扰效果检测第59-65页
     ·抗性植株的PCR检测第59-60页
     ·转化植株表型观察及分析第60-64页
     ·转化植株木质素含量的检测第64-65页
   ·下一步需要开展的研究第65-67页
4 结论与创新点第67-69页
   ·结论第67页
   ·创新点第67-69页
参考文献第69-78页
附录第78-79页
致谢第79页

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