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霍乱弧菌中受毒力相关蛋白调控的过氧化物酶TagD抵御氧胁迫的机制及其生理功能的研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-11页
縮略语第11-12页
第一章 文献综述第12-20页
 1. 霍乱与霍乱弧菌第12-17页
   ·霍乱的流行概况第12页
   ·霍乱弧的菌生物学性状及分类第12-13页
   ·霍乱弧菌基因组学第13-14页
   ·霍乱弧菌流行性病原学第14-17页
 2. ROS与氧胁迫第17-18页
 3. 过氧化物酶家族第18-20页
第二章 霍乱弧菌tagD突变株的生长缺陷及TagD的关键氨基酸位点的研究第20-40页
 第一节 霍乱弧tagD突变株的生长缺陷第21-33页
  1. 材料与方法第21-28页
   ·菌株与质粒第21页
   ·培养基与培养条件第21-22页
   ·实验用酶及试剂第22页
   ·基本实验方法第22-24页
   ·tagD突变株的构建第24-27页
   ·tagD回复突变菌株的构建第27页
   ·tagD突变株的生长检测第27-28页
   ·纸片法检测氧化压力下tagD突变株的生长第28页
   ·氧化压力下tagD突变株的生长曲线检测第28页
   ·氧化压力下tagD突变株的存活率检测第28页
  2. 结果与分析第28-32页
   ·tagD突变株的构建第28-29页
   ·tagD回复突变菌株的构建第29页
   ·tagD突变株的生长检测第29-30页
   ·纸片法检测氧化压力下tagD突变株的生长第30页
   ·氧胁迫下tagD突变株的生长检测第30-31页
   ·氧化压力下tagD突变株的存活率检测第31-32页
  3. 小结与讨论第32-33页
 第二节 TagD蛋白抗氧胁迫相关的关键氨基酸位点的研究第33-40页
  1. 材料与方法第33-36页
   ·菌株与质粒第33页
   ·培养基与培养条件第33-34页
   ·实验用酶及试剂第34页
   ·定点突变回复突变菌株的构建第34-35页
   ·氧化压力下TagD定点突变回复菌株的生长曲线检测第35页
   ·氧化压力下TagD定点突变回复菌株的存活率检测第35-36页
  2. 结果与分析第36-38页
   ·定点突变回突变复株的构建第36页
   ·氧化压力下TagD定点突变回复突变菌株的生长曲线检测第36-37页
   ·氧化压力下TagD定点突变回复突变菌株的存活率检测第37-38页
  3. 小结与讨论第38-40页
第三章 霍乱弧菌毒力基因的表达与菌株抗氧胁迫能力的研究第40-48页
 1. 材料与方法第40-42页
   ·菌株与质粒第40-41页
   ·培养基与培养条件第41页
   ·实验用酶及试剂第41页
   ·Luminescence检测菌株的构建第41页
   ·霍乱弧菌毒力基因对菌体抗氧胁迫的影响第41-42页
   ·Luminescence检测毒力基因对tagD的调控第42页
 2. 结果与分析第42-46页
   ·Luminescence检测菌株的构建第42页
   ·霍乱弧菌毒力基因对菌体抗氧化压力的影响第42-43页
   ·Luminescence检测毒力基因对tagD的调控第43-45页
   ·tagD基因启动子区域中ToxT结合序列的确定第45-46页
 3. 小结与讨论第46-48页
第四章 霍乱弧菌TagD蛋白互作及生理功能的研究第48-58页
 第一节 TagD蛋白互作的研究第48-53页
  1. 材料与方法第48-51页
   ·菌株与质粒第48-49页
   ·培养基与培养条件第49页
   ·实验用酶及试剂第49页
   ·蛋白质互作菌株的构建第49-50页
   ·氧化压力下TagD蛋白质自身相互作用的研究第50-51页
   ·氧化压力下TagD蛋白与TrxA相互作用的研究第51页
  2. 结果与分析第51-52页
   ·氧化压力下TagD蛋白质自身相互作用的研究第51页
   ·氧化压力下TagD蛋白与TrxA相互作用的研究第51-52页
  3. 小结与讨论第52-53页
 第二节 TagD蛋白生理功能的研究第53-58页
  1. 材料与方法第53-55页
   ·菌株第53页
   ·培养基与培养条件第53页
   ·乳鼠肠道定殖能力检测第53-54页
   ·斑马鱼肠道定殖能力检测第54-55页
  2. 结果与分析第55-56页
   ·乳鼠肠道定殖能力检测第55页
   ·斑马鱼肠道定殖能力检测第55-56页
  3. 小结与讨论第56-58页
全文总结第58-60页
参考文献第60-66页
附录一 文中所用试剂配方第66-68页
致谢第68页

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