摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
縮略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-20页 |
1. 霍乱与霍乱弧菌 | 第12-17页 |
·霍乱的流行概况 | 第12页 |
·霍乱弧的菌生物学性状及分类 | 第12-13页 |
·霍乱弧菌基因组学 | 第13-14页 |
·霍乱弧菌流行性病原学 | 第14-17页 |
2. ROS与氧胁迫 | 第17-18页 |
3. 过氧化物酶家族 | 第18-20页 |
第二章 霍乱弧菌tagD突变株的生长缺陷及TagD的关键氨基酸位点的研究 | 第20-40页 |
第一节 霍乱弧tagD突变株的生长缺陷 | 第21-33页 |
1. 材料与方法 | 第21-28页 |
·菌株与质粒 | 第21页 |
·培养基与培养条件 | 第21-22页 |
·实验用酶及试剂 | 第22页 |
·基本实验方法 | 第22-24页 |
·tagD突变株的构建 | 第24-27页 |
·tagD回复突变菌株的构建 | 第27页 |
·tagD突变株的生长检测 | 第27-28页 |
·纸片法检测氧化压力下tagD突变株的生长 | 第28页 |
·氧化压力下tagD突变株的生长曲线检测 | 第28页 |
·氧化压力下tagD突变株的存活率检测 | 第28页 |
2. 结果与分析 | 第28-32页 |
·tagD突变株的构建 | 第28-29页 |
·tagD回复突变菌株的构建 | 第29页 |
·tagD突变株的生长检测 | 第29-30页 |
·纸片法检测氧化压力下tagD突变株的生长 | 第30页 |
·氧胁迫下tagD突变株的生长检测 | 第30-31页 |
·氧化压力下tagD突变株的存活率检测 | 第31-32页 |
3. 小结与讨论 | 第32-33页 |
第二节 TagD蛋白抗氧胁迫相关的关键氨基酸位点的研究 | 第33-40页 |
1. 材料与方法 | 第33-36页 |
·菌株与质粒 | 第33页 |
·培养基与培养条件 | 第33-34页 |
·实验用酶及试剂 | 第34页 |
·定点突变回复突变菌株的构建 | 第34-35页 |
·氧化压力下TagD定点突变回复菌株的生长曲线检测 | 第35页 |
·氧化压力下TagD定点突变回复菌株的存活率检测 | 第35-36页 |
2. 结果与分析 | 第36-38页 |
·定点突变回突变复株的构建 | 第36页 |
·氧化压力下TagD定点突变回复突变菌株的生长曲线检测 | 第36-37页 |
·氧化压力下TagD定点突变回复突变菌株的存活率检测 | 第37-38页 |
3. 小结与讨论 | 第38-40页 |
第三章 霍乱弧菌毒力基因的表达与菌株抗氧胁迫能力的研究 | 第40-48页 |
1. 材料与方法 | 第40-42页 |
·菌株与质粒 | 第40-41页 |
·培养基与培养条件 | 第41页 |
·实验用酶及试剂 | 第41页 |
·Luminescence检测菌株的构建 | 第41页 |
·霍乱弧菌毒力基因对菌体抗氧胁迫的影响 | 第41-42页 |
·Luminescence检测毒力基因对tagD的调控 | 第42页 |
2. 结果与分析 | 第42-46页 |
·Luminescence检测菌株的构建 | 第42页 |
·霍乱弧菌毒力基因对菌体抗氧化压力的影响 | 第42-43页 |
·Luminescence检测毒力基因对tagD的调控 | 第43-45页 |
·tagD基因启动子区域中ToxT结合序列的确定 | 第45-46页 |
3. 小结与讨论 | 第46-48页 |
第四章 霍乱弧菌TagD蛋白互作及生理功能的研究 | 第48-58页 |
第一节 TagD蛋白互作的研究 | 第48-53页 |
1. 材料与方法 | 第48-51页 |
·菌株与质粒 | 第48-49页 |
·培养基与培养条件 | 第49页 |
·实验用酶及试剂 | 第49页 |
·蛋白质互作菌株的构建 | 第49-50页 |
·氧化压力下TagD蛋白质自身相互作用的研究 | 第50-51页 |
·氧化压力下TagD蛋白与TrxA相互作用的研究 | 第51页 |
2. 结果与分析 | 第51-52页 |
·氧化压力下TagD蛋白质自身相互作用的研究 | 第51页 |
·氧化压力下TagD蛋白与TrxA相互作用的研究 | 第51-52页 |
3. 小结与讨论 | 第52-53页 |
第二节 TagD蛋白生理功能的研究 | 第53-58页 |
1. 材料与方法 | 第53-55页 |
·菌株 | 第53页 |
·培养基与培养条件 | 第53页 |
·乳鼠肠道定殖能力检测 | 第53-54页 |
·斑马鱼肠道定殖能力检测 | 第54-55页 |
2. 结果与分析 | 第55-56页 |
·乳鼠肠道定殖能力检测 | 第55页 |
·斑马鱼肠道定殖能力检测 | 第55-56页 |
3. 小结与讨论 | 第56-58页 |
全文总结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-66页 |
附录一 文中所用试剂配方 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |