| 缩略词表 | 第1-5页 |
| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-28页 |
| ·海参简介 | 第12-15页 |
| ·海参的分类 | 第12-13页 |
| ·海参的分布 | 第13页 |
| ·海参的养殖 | 第13-14页 |
| ·海参的成分 | 第14-15页 |
| ·营养成分 | 第14页 |
| ·生物活性物质 | 第14-15页 |
| ·离子通道 | 第15-18页 |
| ·离子通道的概念 | 第15页 |
| ·离子通道的研究进展 | 第15-16页 |
| ·离子通道的研究方法 | 第16-18页 |
| ·电压钳位技术 | 第17页 |
| ·单通道电流记录技术 | 第17页 |
| ·通道药物学研究 | 第17页 |
| ·通道蛋白分离、通道重建和基因重组技术 | 第17-18页 |
| ·离子通道的分类 | 第18页 |
| ·钙离子通道 | 第18-20页 |
| ·电压依赖型钙离子通道 | 第19页 |
| ·受体依赖型钙离子通道 | 第19-20页 |
| ·池操纵型钙离子通道 | 第20页 |
| ·机械敏感型钙离子通道 | 第20页 |
| ·漏流钙离子通道 | 第20页 |
| ·电压依赖型钙离子通道 | 第20-25页 |
| ·VDCC 的基本功能及性质 | 第21页 |
| ·VDCC 的组成亚基 | 第21-25页 |
| ·α_1亚基 | 第21-23页 |
| ·β亚基 | 第23-24页 |
| ·α_2-δ亚基 | 第24页 |
| ·γ亚基 | 第24-25页 |
| ·本文的主要研究内容及意义 | 第25-27页 |
| ·本文采用的技术路线 | 第27-28页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第28-48页 |
| ·实验材料 | 第28-30页 |
| ·实验原料 | 第28页 |
| ·实验仪器 | 第28-29页 |
| ·实验试剂 | 第29-30页 |
| ·主要试剂的配制 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-47页 |
| ·海参总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·实验药品的制备与器具的处理 | 第31页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第31页 |
| ·RNA 电泳检测 | 第31-32页 |
| ·简并引物的设计 | 第32-35页 |
| ·SjCaβ cDNA 保守区域的 RT-PCR 扩增 | 第35-40页 |
| ·RT-PCR | 第35-36页 |
| ·以 RT-PCR 产物为模板的二次 PCR | 第36页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第36-37页 |
| ·重组质粒的转化 | 第37-38页 |
| ·蓝白斑法筛选阳性克隆 | 第38页 |
| ·菌落 PCR 检验 | 第38-39页 |
| ·产物的保存 | 第39页 |
| ·产物测序 | 第39-40页 |
| ·SjCaβ基因 3′末端未知序列的克隆 | 第40-42页 |
| ·引物设计 | 第40页 |
| ·反转录反应 | 第40页 |
| ·3′ RACE Outer PCR | 第40-41页 |
| ·3′ RACE Inner PCR | 第41-42页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第42页 |
| ·重组质粒的转化 | 第42页 |
| ·菌落 PCR 检验 | 第42页 |
| ·产物保存 | 第42页 |
| ·产物测序 | 第42页 |
| ·SjCaβ基因 5′末端未知序列的克隆 | 第42-47页 |
| ·引物设计 | 第42页 |
| ·去磷酸反应 | 第42-43页 |
| ·去掉 mRNA 的 5′帽子结构 | 第43-44页 |
| ·5′ RACEAdaptor 连接 | 第44-45页 |
| ·反转录反应 | 第45页 |
| ·5′ RACE Outer PCR | 第45-46页 |
| ·5′ RACE Inner PCR | 第46-47页 |
| ·PCR 产物的回收纯化 | 第47页 |
| ·重组质粒的转化 | 第47页 |
| ·菌落 PCR | 第47页 |
| ·产物保存 | 第47页 |
| ·产物测序 | 第47页 |
| ·SjCaβ基因序列的生物信息学分析方法 | 第47-48页 |
| 第三章 实验结果与分析 | 第48-70页 |
| ·海参肠总 RNA 的质量分析 | 第48页 |
| ·SjCaβ基因克隆 | 第48-59页 |
| ·SjCaβ保守区域 cDNA 的克隆 | 第48-53页 |
| ·RT-PCR 产物电泳分析 | 第48-49页 |
| ·二次 PCR 法扩增 RT-PCR 产物的电泳分析 | 第49页 |
| ·回收纯化 PCR 产物的电泳分析 | 第49-50页 |
| ·菌落 PCR 产物的电泳分析 | 第50-51页 |
| ·SjCaβ保守区域测序结果 | 第51页 |
| ·SjCaβ基因保守区域序列的 BLASTX | 第51-53页 |
| ·SjCaβ 3′端 cDNA 的克隆 | 第53-56页 |
| ·3′ RACE Outer PCR 产物的电泳分析 | 第53-54页 |
| ·3′ RACE Inner PCR 产物的电泳分析 | 第54页 |
| ·3′ RACE PCR 割胶回收产物电泳分析 | 第54页 |
| ·菌落 PCR 产物的电泳分析 | 第54-55页 |
| ·3′ RACE 测序结果 | 第55-56页 |
| ·SjCaβ 5′端 cDNA 的克隆 | 第56-59页 |
| ·5′ RACE Outer PCR 产物的电泳分析 | 第56页 |
| ·5′ RACE Inner PCR 产物的电泳分析 | 第56-57页 |
| ·5′ RACE PCR 割胶回收产物电泳分析 | 第57页 |
| ·菌落 PCR 产物的电泳分析 | 第57-59页 |
| ·5′ RACE 测序结果 | 第59页 |
| ·SjCaβ基因全长序列 | 第59页 |
| ·SjCaβ基因的生物信息学分析 | 第59-70页 |
| ·SjCaβ基因的全序列特征分析 | 第59-62页 |
| ·序列比对和分子系统发育分析 | 第62-65页 |
| ·SjCaβ二级结构预测 | 第65页 |
| ·SjCaβ功能域分析及其三级结构模型 | 第65-70页 |
| 第四章 结论 | 第70-71页 |
| 参考文献 | 第71-77页 |
| 致谢 | 第77页 |
