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整合子介导铜绿假单胞菌获得性耐药机制的研究

摘要第1-10页
ABSTRACT第10-18页
中英文缩略词表第18-19页
第一章 绪论第19-35页
   ·研究背景第19-21页
   ·PA固有耐药机制第21-24页
     ·外膜蛋白低渗透性第21页
     ·染色体编码的AmpC酶第21-22页
     ·主动外排机制第22-24页
   ·PA获得性耐药机制第24-32页
     ·突变耐药第24-25页
     ·输入性耐药第25-32页
   ·PA适应性耐药机制第32-33页
   ·本研究的目的、内容和技术路线第33-35页
     ·研究目的第33-34页
     ·研究内容第34页
     ·技术路线第34-35页
第二章 铜绿假单胞菌耐药性检测及整合子分布第35-46页
   ·材料第35-37页
     ·菌株来源第35-36页
     ·质控菌株第36页
     ·主要试剂第36页
     ·主要试剂配制第36页
     ·主要仪器及设备第36-37页
   ·方法第37-39页
     ·菌株鉴定第37页
     ·药物敏感试验第37页
     ·整合子基因检测第37-39页
     ·统计学分析第39页
   ·结果第39-42页
     ·标本来源第39页
     ·科室分布第39页
     ·PA对14种药物的耐药性,第39-40页
     ·PA主要多重耐药模式第40页
     ·Ⅰ、Ⅱ及Ⅲ类整合子分布第40-41页
     ·Ⅰ类整合子与PA菌株耐药关系第41页
     ·Ⅰ类整合子与PA多重耐药的关系第41-42页
   ·讨论第42-46页
第三章 整合子介导PA耐药机制研究第46-73页
   ·材料第47-48页
     ·菌株和质粒第47-48页
     ·主要试剂第48页
     ·主要试剂配制第48页
     ·主要仪器第48页
   ·方法第48-56页
     ·细菌模板的提取第48-49页
     ·引物的设计第49-50页
     ·PCR扩增第50-52页
     ·PCR产物双酶切分析第52页
     ·PCR产物纯化、克隆及测序第52-54页
     ·质粒电转化第54-56页
   ·结果第56-69页
     ·整合子可变区PCR检测结果第56-58页
     ·双酶切检测结果第58-59页
     ·基因序列分析结果第59-69页
     ·电转化结果第69页
   ·讨论第69-73页
第四章 OXA-251酶特性分析第73-92页
   ·材料第73-75页
     ·菌株来源第73-75页
     ·抗生素药物粉剂第75页
     ·主要试剂第75页
     ·主要仪器第75页
   ·方法第75-81页
     ·生物信息学分析OXA-251酶基因结构分析第75-76页
     ·菌株MIC测定第76-77页
     ·bla OXA-10及bla OXA-251全编码基因的获取第77-78页
     ·目的基因的克隆第78-80页
     ·等电点的测定第80-81页
     ·野生株及转化子MIC的检测第81页
   ·结果第81-90页
     ·OXA-251生物信息学分析结果第81-86页
     ·携带blaOXA-251的PA菌株药敏结果第86-87页
     ·blaOXA-10、blaOXA-251全编码区PCR结果第87页
     ·blaOXA-10、blaOXA-251基因克隆结果第87-88页
     ·等电点测定结果第88-89页
     ·野生株与转化子药敏结果第89-90页
   ·讨论第90-92页
第五章 主要结论及展望第92-93页
   ·主要结论第92页
   ·展望第92-93页
参考文献第93-107页
读博期间发表的论文和参与的课题第107-108页
致谢第108页

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