| 摘要 | 第1-5页 |
| ABSTRACT | 第5-9页 |
| 1 引言与文献综述 | 第9-24页 |
| ·粘附斑解体与细胞迁移 | 第9-13页 |
| ·Calpain与粘附斑水解 | 第13-18页 |
| ·Calpain水解talin蛋白与粘附斑水解 | 第18-21页 |
| ·重组PCR诱导定点突变 | 第21-22页 |
| ·本文的研究目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-53页 |
| ·材料 | 第24-32页 |
| ·仪器设备 | 第24-26页 |
| ·主要试剂和耗材 | 第26-27页 |
| ·菌种与细胞 | 第27页 |
| ·常用溶液和培养基的配制与保存 | 第27-32页 |
| ·方法与步骤 | 第32-53页 |
| ·细胞培养 | 第32-35页 |
| ·Calpain 2诱导细胞骨架蛋白水解对粘附斑解体效率影响的检测 | 第35-41页 |
| ·Talin头部基因定点突变及重组质粒的构建 | 第41-51页 |
| ·建立研究磷酸化位点对calpain水解talin影响的检测方法 | 第51-53页 |
| 3 结果与分析 | 第53-62页 |
| ·Calpain 2诱导细胞骨架蛋白水解对粘附斑解体效率影响的检测 | 第53-59页 |
| ·免疫荧光检测,EGF诱导激活calpain 2后,CHO细胞粘附斑解体随时间变化的特征 | 第53-56页 |
| ·免疫荧光检测,不同浓度PKA抑制calpain2下,CHO细胞粘附斑解体的效率 | 第56-58页 |
| ·免疫沉淀和免疫印迹检测EGF诱导激活calpain 2后,CHO细胞粘附斑解体随时间变化的特征 | 第58页 |
| ·免疫沉淀和免疫印迹检测不同浓度PKA抑制calpain2下,CHO细胞粘附斑解体随时间变化的特征 | 第58-59页 |
| ·Talin头部基因定点突变及重组质粒的构建 | 第59-60页 |
| ·建立研究磷酸化位点对calpain水解talin影响的检测方法 | 第60-62页 |
| 4 讨论 | 第62-67页 |
| ·Calpain 2诱导细胞骨架蛋白水解对粘附斑解体效率影响的检测 | 第62-64页 |
| ·Talin头部基因定点突变及重组质粒的构建 | 第64-66页 |
| ·Talin头部基因片段定点突变设计讨论 | 第64-65页 |
| ·构建重组质粒时遇到的困难 | 第65-66页 |
| ·建立研究磷酸化位点对calpain水解talin影响的检测方法的讨论 | 第66-67页 |
| 5 结语 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-79页 |
| 附录 | 第79-80页 |
| 攻读学位期间科研成果 | 第80-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
