| 摘要 | 第1-3页 |
| ABSTRACT | 第3-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-20页 |
| ·FMDV 检测技术 | 第9-12页 |
| ·病毒分离法 | 第9-10页 |
| ·酶联免疫吸附法 | 第10页 |
| ·病毒中和试验 | 第10-11页 |
| ·补体结合试验 | 第11页 |
| ·间接血凝试验 | 第11页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第11页 |
| ·乳胶凝集试验 | 第11页 |
| ·免疫层析快速诊断试纸条 | 第11-12页 |
| ·FMDV 分子生物学诊断技术 | 第12-13页 |
| ·聚合酶链反应 | 第12页 |
| ·核酸探针技术 | 第12页 |
| ·等电聚焦技术 | 第12-13页 |
| ·核苷酸序列分析 | 第13页 |
| ·基因芯片技术 | 第13页 |
| ·单克隆抗体在 FMDV 中的应用 | 第13-16页 |
| ·区分自然感染动物以及疫苗免疫动物 | 第13-15页 |
| ·建立快速诊断 FMDV 的方法 | 第15页 |
| ·FMDV 抗原位点的分析及定位 | 第15-16页 |
| ·FMDV 受体结合位点的研究 | 第16页 |
| ·FMDV 抗原结构与生物学功能相关性研究 | 第16页 |
| ·口蹄疫病毒抗原位点的研究进展 | 第16-19页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第19-20页 |
| 第二章 口蹄疫病毒非结构蛋白 3D 的原核表达 | 第20-31页 |
| ·材料 | 第20-23页 |
| ·载体、感受态细胞及阳性质粒 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20页 |
| ·溶液及配制 | 第20-22页 |
| ·仪器与设备 | 第22-23页 |
| ·方法 | 第23-26页 |
| ·重组质粒的转化 | 第23页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第23页 |
| ·表达产物的 SDS-PAGE 电泳 | 第23-24页 |
| ·重组蛋白的大量表达 | 第24页 |
| ·表达产物的可溶性分析 | 第24-25页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第25-26页 |
| ·表达产物的 Western-blot 检测 | 第26页 |
| ·结果 | 第26-29页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 检测 | 第26页 |
| ·3D 蛋白的可溶性分析 | 第26-28页 |
| ·3D 蛋白的纯化 | 第28页 |
| ·3D 蛋白的 Western-blot 检测 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 抗口蹄疫病毒 3D 蛋白单克隆抗体的制备及鉴定 | 第31-52页 |
| ·材料 | 第31-33页 |
| ·抗原、细胞及实验动物 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31-32页 |
| ·溶液及配制 | 第32-33页 |
| ·仪器与设备 | 第33页 |
| ·方法 | 第33-42页 |
| ·动物免疫 | 第33页 |
| ·小鼠效价测定 | 第33页 |
| ·筛选方法的建立 | 第33-35页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第35-38页 |
| ·杂交瘤细胞株冻存及复苏 | 第38页 |
| ·单克隆抗体的大量生产 | 第38-39页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第39页 |
| ·单克隆抗体性质的鉴定 | 第39-42页 |
| ·结果 | 第42-50页 |
| ·小鼠效价的测定 | 第42-43页 |
| ·间接 ELISA 方法的建立 | 第43-44页 |
| ·阳性杂交瘤细胞株的筛选 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体亚型鉴定 | 第45页 |
| ·杂交瘤细胞染色体的鉴定 | 第45页 |
| ·腹水效价的测定 | 第45-46页 |
| ·单克隆抗体 Western-blot 的检测 | 第46页 |
| ·单抗腹水酸碱热稳定性的检测 | 第46-47页 |
| ·杂交瘤细胞抗体分泌稳定性的检测 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体特异性的检测 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 抗口蹄疫病毒 3D 蛋白单克隆抗体识别新位点的鉴定 | 第52-64页 |
| ·材料 | 第52-53页 |
| ·酶及主要试剂 | 第52页 |
| ·载体及感受态细胞 | 第52页 |
| ·溶液及配制 | 第52-53页 |
| ·方法 | 第53-58页 |
| ·3D 蛋白分段设计与引物合成 | 第53-54页 |
| ·3D1～3D4 片段扩增及回收 | 第54-55页 |
| ·目的基因与载体的酶切及回收 | 第55页 |
| ·目的基因与载体的连接转化 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的提取与鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第57-58页 |
| ·结果 | 第58-62页 |
| ·PCR 扩增产物的琼脂糖凝胶电泳 | 第58页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第58-60页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 的鉴定 | 第60-61页 |
| ·表达产物的 Western-blot 分析 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| 全文结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 导师简介 | 第70-71页 |
| 作者简介 | 第71-72页 |