缩略词表 | 第1-5页 |
中文摘要 | 第5-6页 |
英文摘要 | 第6-7页 |
前言 | 第7-9页 |
第一部分 Real-time PCR 检测 miR-200a 在不同级别胶质瘤细胞和组织中的表达 | 第9-14页 |
1 材料 | 第9-11页 |
·实验材料 | 第9页 |
·主要仪器 | 第9-10页 |
·主要试剂及常用溶液配制 | 第10页 |
·主要试剂的配制 | 第10-11页 |
2 实验方法 | 第11-13页 |
·细胞培养 | 第11-12页 |
·胶质瘤细胞和组织的 miRNA 提取、逆转录和 Real-time PCR | 第12-13页 |
3 结果 | 第13-14页 |
第二部分 miR-200a 对 U87 细胞迁移、侵袭及增值的影响 | 第14-22页 |
1 材料 | 第14-16页 |
·实验材料 | 第14页 |
·主要仪器 | 第14-15页 |
·主要试剂及常用溶液配制 | 第15-16页 |
·主要试剂的配制 | 第16页 |
2 实验方法 | 第16-19页 |
·细胞培养 | 第16页 |
·miR-200a 抑制剂和模拟物转染 U87 细胞 | 第16-17页 |
·Transwell 细胞侵袭和迁移实验 | 第17页 |
·划痕实验 | 第17-18页 |
·MTS 检测 miR-200a 对 U87 细胞增值的影响 | 第18页 |
·MTS检测miR-200a对U87细胞增值的影响 | 第18-19页 |
·统计学处理 | 第19页 |
3 结果 | 第19-22页 |
第三部分 miR-200a 的靶基因预测、筛选和验证 | 第22-45页 |
1 材料 | 第22-26页 |
·实验材料 | 第22页 |
·主要仪器 | 第22-23页 |
·主要试剂及常用溶液配制 | 第23-24页 |
·主要试剂的配制(其余同前) | 第24-26页 |
2 实验方法 | 第26-34页 |
·miR-200a 的靶基因预测、归类分析 | 第26页 |
·Western blot 检测 miR-200a 是否调节目标靶基因蛋白表达 | 第26-28页 |
·使用荧光素酶报告系统分析验证 miR-200a 的潜在靶基因 | 第28-34页 |
3 结果 | 第34-45页 |
·miR-200a的靶基因预测、归类分析 | 第34-37页 |
·Western blot分析验证miR-200a调控靶基因PTEN和NCAM1的蛋白表达 | 第37-39页 |
·使用荧光素酶报告系统分析验证miR-200a的潜在靶基因 | 第39-45页 |
讨论 | 第45-49页 |
结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-52页 |
致谢 | 第52-53页 |
综述 | 第53-60页 |
参考文献 | 第58-60页 |