| 摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 缩略词表（Abbreviations) | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-35页 |
| 1. 研究背景 | 第12-13页 |
| 2. 文献综述 | 第13-34页 |
| ·柑橘EST研究进展 | 第13-17页 |
| ·植物低温研究进展 | 第17-26页 |
| ·几种信号途径与低温驯化的关系 | 第26-31页 |
| ·淀粉的合成与降解 | 第31-33页 |
| ·β-淀粉酶在抗寒中的作用 | 第33-34页 |
| 3. 本研究的目的、意义和内容 | 第34-35页 |
| 第二章 枳叶片低温抑制差减杂交cDNA文库构建 | 第35-68页 |
| 1. 引言 | 第35页 |
| 2. 材料与方法 | 第35-48页 |
| ·植物材料与低温处理 | 第35-36页 |
| ·相对电导率及H_2O_2含量测定 | 第36页 |
| ·总RNA及mRNA分离 | 第36-38页 |
| ·抑制差减杂交cDNA文库构建 | 第38-44页 |
| ·反Northern blotting | 第44-45页 |
| ·测序及序列分析 | 第45-46页 |
| ·半定量PCR检测差异基因表达 | 第46-47页 |
| ·β-淀粉酶和谷胱甘肽转移酶(GST)酶活及总糖含量测定 | 第47-48页 |
| ·数据分析 | 第48页 |
| 3. 结果与分析 | 第48-61页 |
| ·低温处理下枳叶片相对电导率及H_2O_2含量测定 | 第48-49页 |
| ·SSH cDNA文库构建 | 第49-52页 |
| ·反Northern blotting检测 | 第52-54页 |
| ·差异片段测序及序列分析 | 第54-55页 |
| ·半定量PCR验证差异基因表达 | 第55-58页 |
| ·差异基因不同低温时间点的表达 | 第58-60页 |
| ·酶的活性及可溶性糖含量测定 | 第60-61页 |
| 4. 讨论 | 第61-66页 |
| ·SSH是筛选低温响应基因的有效方法 | 第62-63页 |
| ·细胞壁脯氨酸富集蛋白在低温驯化中的作用 | 第63-65页 |
| ·低温胁迫下的渗透平衡 | 第65-66页 |
| ·低温胁迫下的氧化平衡 | 第66页 |
| 5. 本章小结 | 第66-68页 |
| 第三章 枳β-淀粉酶(PtrBAMs)基因家族的分子克隆 | 第68-82页 |
| 1. 引言 | 第68页 |
| 2. 材料与方法 | 第68-72页 |
| ·枳β-淀粉酶1(PtrBAM1)全长克隆 | 第68-69页 |
| ·枳β-淀粉酶基因家族的全长克隆 | 第69-70页 |
| ·枳β-淀粉酶基因家族的生物学信息分析 | 第70页 |
| ·枳β-淀粉酶基因家族在不同处理下的表达分析 | 第70-72页 |
| 3. 结果与分析 | 第72-78页 |
| ·PtrBAM1的全长克隆 | 第72-73页 |
| ·PtrBAM2-8的全长克隆 | 第73页 |
| ·PtrBAM1-8的生物学信息分析 | 第73-77页 |
| ·PtrBAM1-8在不同处理下的表达分析 | 第77-78页 |
| 4. 讨论 | 第78-81页 |
| ·PtrBAMs基因和蛋白序列的生物信息学分析 | 第78-79页 |
| ·PtrBAMs在不同处理下的基因表达 | 第79-81页 |
| 5. 本章小结 | 第81-82页 |
| 第四章 枳β-淀粉酶1(PtrBAM1)功能鉴定 | 第82-99页 |
| 1. 引言 | 第82页 |
| 2. 材料与方法 | 第82-86页 |
| ·BMA1 RNAi柠檬的遗传转化 | 第82-83页 |
| ·植株生长条件及处理 | 第83页 |
| ·淀粉染色 | 第83-84页 |
| ·透射电镜观察 | 第84页 |
| ·生理指标实验 | 第84页 |
| ·PtrBAM1启动子与PtrCBF ORF克隆 | 第84-85页 |
| ·酵母单杂 | 第85-86页 |
| ·统计分析 | 第86页 |
| 3. 结果与分析 | 第86-95页 |
| ·PtrBAM1 β-淀粉酶活性检测 | 第86-88页 |
| ·低温冻害表型观察和伤害指标测定 | 第88-91页 |
| ·低温处理过程中烟草β-淀粉酶活性、麦芽糖和可溶性糖含量的测定 | 第91-93页 |
| ·PtrBAM1基因与PtrCBF蛋白的互作 | 第93-95页 |
| 4. 讨论 | 第95-98页 |
| ·PtrBAM1具有淀粉水解功能 | 第95页 |
| ·超表达PtrBAM1增强了转基因烟草抗寒性 | 第95-97页 |
| ·PtrBAM1受CBF调控 | 第97-98页 |
| 5. 本章小结 | 第98-99页 |
| 参考文献 | 第99-115页 |
| 附录Ⅰ.正反库差异表达序列信息 | 第115-118页 |
| 附录Ⅱ.PtrPRP附图 | 第118-120页 |
| 附录Ⅲ.PtrBAMs附图及附表 | 第120-123页 |
| 附录Ⅳ.图版及说明 | 第123-127页 |
| 附录Ⅴ.文章发表 | 第127-128页 |
| 致谢 | 第128-129页 |
