| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略词表 | 第10-11页 |
| 引言 | 第11-13页 |
| 第一部分 文献综述 | 第13-21页 |
| 1 低温弱光胁迫与冷驯化 | 第13页 |
| 2 低温弱光对植物的胁迫效应 | 第13-14页 |
| ·低温弱光胁迫对生理功能的破坏 | 第13页 |
| ·低温弱光对生长发育的影响 | 第13-14页 |
| ·低温弱光对光合作用和呼吸作用的影响 | 第14页 |
| 3 植物对低温弱光胁迫的响应机制 | 第14-16页 |
| ·膜脂过氧化和保护酶系统响应低温弱光胁迫 | 第14-15页 |
| ·低温弱光胁迫响应基因的研究进展 | 第15-16页 |
| 4 蛋白质组学技术在植物环境胁迫响应机制中的应用 | 第16-20页 |
| ·蛋白质组学的概念产生背景 | 第16-17页 |
| ·蛋白质组学的方法和技术 | 第17-19页 |
| ·植物环境胁迫的蛋白质组学研究进展 | 第19-20页 |
| ·植物低温弱光胁迫响应的蛋白质组学研究进展 | 第20页 |
| 5 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二部分 研究报告 | 第21-67页 |
| 第一章 低温弱光下萝卜叶片蛋白质组学研究 | 第21-33页 |
| 摘要 | 第21-22页 |
| 1 材料和方法 | 第22-24页 |
| ·植物材料和胁迫处理 | 第22页 |
| ·叶片蛋白质的提取 | 第22页 |
| ·蛋白质样品溶解及浓度测定 | 第22页 |
| ·双向电泳检测与图像采集 | 第22-23页 |
| ·质谱鉴定与数据库检索 | 第23-24页 |
| ·差异点的RT-PCR表达分析 | 第24页 |
| 2. 结果分析 | 第24-30页 |
| ·低温弱光胁迫条件对萝卜叶片生长发育的影响 | 第24-25页 |
| ·低温弱光胁迫条件下萝卜叶片蛋白表达谱的双向电泳分析 | 第25页 |
| ·部分差异蛋白质的质谱鉴定与功能分析 | 第25-29页 |
| ·mRNA水平上的基因表达 | 第29-30页 |
| 3 讨论 | 第30-33页 |
| 第二章 萝卜叶片蛋白质提取方法的改进 | 第33-43页 |
| 摘要 | 第33-34页 |
| 1 材料和方法 | 第34-37页 |
| ·材料 | 第34页 |
| ·总蛋白质提取方法 | 第34-35页 |
| ·蛋白质样品溶解及浓度测定 | 第35-36页 |
| ·电泳检测与图像采集 | 第36-37页 |
| 2 结果分析 | 第37-41页 |
| ·萝卜叶片总蛋白质SDS-PAGE | 第37-38页 |
| ·胶条pH范围对萝卜叶片2-DE图谱的影响 | 第38-39页 |
| ·两种不同提取方法对萝卜叶片2-DE图谱的影响 | 第39-41页 |
| 3. 讨论 | 第41-43页 |
| 第三章 利用DDRT技术分离萝卜低温弱光胁迫相关基因 | 第43-53页 |
| 摘要 | 第43-44页 |
| 1 材料和方法 | 第44-45页 |
| ·植物材料和胁迫处理 | 第44页 |
| ·总RNA的提取 | 第44页 |
| ·cDNA第一条链的合成和DDRT-PCR | 第44-45页 |
| ·PCR产物的聚丙烯酰胺电泳展示 | 第45页 |
| ·差异cDNA的二次扩增与克隆、测序 | 第45页 |
| ·差异片段的RT-PCR表达分析 | 第45页 |
| 2 结果与分析 | 第45-51页 |
| ·萝卜总RNA的提取 | 第45-46页 |
| ·萝卜低温弱光响应mRNA差异显示分析 | 第46-47页 |
| ·差异表达基因片段的再扩增 | 第47-48页 |
| ·萝卜低温弱光响应基因片段的DDRT分析 | 第48-49页 |
| ·响应低温弱光胁迫的差异表达基因片段的功能分类 | 第49-50页 |
| ·差异片段的RT-PCR表达分析 | 第50-51页 |
| 3 讨论 | 第51-53页 |
| ·mRNA差异显示技术的优缺点 | 第51-52页 |
| ·差异表达片段在低温弱光胁迫下的功能 | 第52-53页 |
| 第四章 萝卜冷胁迫相关基因克隆 | 第53-67页 |
| 摘要 | 第53-54页 |
| 1 材料和方法 | 第54-58页 |
| ·植物材料和低温弱光胁迫处理 | 第54页 |
| ·菌株与质粒 | 第54页 |
| ·所需试剂 | 第54页 |
| ·萝卜基因组DNA与总RNA的提取 | 第54-55页 |
| ·反转录cDNA第一条链的合成 | 第55页 |
| ·引物设计与合成 | 第55页 |
| ·萝卜冷驯化相关基因基因组DNA及cDNA特异扩增 | 第55-56页 |
| ·COR14、LOS2、MYB4基因的克隆 | 第56-58页 |
| ·序列测定及分析 | 第58页 |
| 2 结果与分析 | 第58-65页 |
| ·萝卜冷驯化相关基因的DNA与cDNA扩增 | 第58-59页 |
| ·萝卜冷驯化相关基因的DNA与cDNA克隆及序列分析 | 第59-65页 |
| ·萝卜RsCOR14、RsMYB4、RsLOS2基因的表达分析 | 第65页 |
| 3 讨论 | 第65-67页 |
| 全文结论 | 第67-69页 |
| 参考文献 | 第69-77页 |
| 论文发表情况 | 第77-79页 |
| 致谢 | 第79页 |
