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miR-199a-5p在电离辐射诱导乳腺癌细胞自噬中作用的研究

前言第1-5页
摘要第5-9页
Abstract第9-19页
第一章 绪论第19-47页
   ·自噬(autophagy)第20-33页
     ·自噬的形成过程第20-23页
     ·自噬相关通路第23-27页
     ·自噬相关的应激反应第27-29页
     ·病原体感染诱导的自噬第29页
     ·自噬与肿瘤第29-30页
     ·自噬的抑癌机制及其相关基因第30-32页
     ·自噬的促存活机制第32-33页
   ·microRNA(miRNA)第33-40页
     ·miRNA 的来源第34页
     ·miRNA 调控靶基因的机制第34-35页
     ·miRNA 靶基因预测及验证的方法第35-36页
     ·miRNA 在肿瘤发生及治疗中的作用第36-39页
     ·miRNA 的新发现——植物 miRNA 入侵人体第39页
     ·miRNA 在肿瘤诊断上的应用第39-40页
   ·miRNA 与自噬第40-44页
     ·miRNA 抑制自噬第40-41页
     ·miRNA 激活自噬第41页
     ·自噬对 miRNA 的调控作用第41-42页
     ·miR-199a第42页
     ·miR-199a 在不同组织细胞的表达谱及功能第42-44页
   ·立题依据第44-47页
第二章 材料与方法第47-67页
   ·主要试剂及器材第47-49页
     ·试剂第47-49页
     ·器材第49页
   ·主要仪器第49-50页
   ·主要实验材料和方法第50-67页
     ·细胞株第50页
     ·胰酶的配制第50页
     ·D-Hanks 液的配制第50-51页
     ·细胞脂质体转染过表达 miRNA mimic第51页
     ·蛋白质免疫印记法(Western Blot)第51-56页
     ·RNA 提取第56页
     ·照射条件第56页
     ·细胞增殖检测第56-57页
     ·细胞周期检测第57页
     ·荧光素酶载体构建第57-59页
     ·荧光素酶载体点突变第59-62页
     ·荧光素酶报告基因分析(Liciferase reporter assay)第62-63页
     ·GFP-LC3 形态学分析自噬第63-64页
     ·应用生物信息学对靶基因的预测第64页
     ·Quantitative real-time (qRT-PCR)第64-65页
     ·细菌培养技术第65-66页
     ·统计学方法第66-67页
第三章 实验结果第67-83页
   ·miR-199a-5p 抑制电离辐射诱导 MCF7 乳腺癌细胞的自噬第67-70页
     ·电离辐射诱导 MCF7 细胞自噬和促进 miR-199a-5p 的表达第67页
     ·miR-199a-5p 抑制电离辐射诱导 MCF7 乳腺癌细胞的自噬第67-70页
   ·miR-199a-5p 在 MCF7 细胞中抑制靶基因 DRAM1 和 BECN1的表达第70-75页
     ·miR-199a-5p 靶基因的预测第70页
     ·DRAM1 和 BECN1 荧光素酶载体的构建第70-72页
     ·miR-199a-5p 靶基因 DRAM1 和 BECN1 预测结合位点的突变第72-73页
     ·MCF7 细胞中过表达 miR-199a-5p 抑制 DRAM1 和 BECN13’UTR 载体荧光素酶活性第73-74页
     ·过表达 miR-199a-5p 抑制 MCF7 细胞中 DRAM1 和 BECN1蛋白表达第74-75页
   ·miR-199a-5p 在 MDA-MB-231 细胞中上调 DRAM1 和 BECN1蛋白的表达、促进自噬和增强 IR 诱导的自噬第75-78页
     ·电离辐射对 MDA-MB-231 细胞 DRAM1 和 BECN1 表达以及自噬的影响第75-76页
     ·miR-199a-5p 促进 MDA-MB-231 细胞自噬并促进电离辐射诱导的自噬第76-77页
     ·在 MDA-MB-231 中 miR-199a-5p 上调靶基因 DRAM1 和BECN1 的表达第77-78页
   ·miR-199a-5p 增加电离辐射对 MDA-MB-231 细胞增殖活性抑制作用第78-80页
     ·电离辐射改变 MDA-MB-231 细胞中 miR-199a-5p 的表达第78-79页
     ·miR-199a-5p 增加电离辐射对 MDA-MB-231 细胞增殖活性抑制作用第79-80页
   ·miR-199a-5p 对细胞周期的影响第80-83页
第四章 讨论第83-91页
结论第91-93页
参考文献第93-127页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第127-129页
致谢第129页

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