前言 | 第1-5页 |
摘要 | 第5-9页 |
Abstract | 第9-19页 |
第一章 绪论 | 第19-47页 |
·自噬(autophagy) | 第20-33页 |
·自噬的形成过程 | 第20-23页 |
·自噬相关通路 | 第23-27页 |
·自噬相关的应激反应 | 第27-29页 |
·病原体感染诱导的自噬 | 第29页 |
·自噬与肿瘤 | 第29-30页 |
·自噬的抑癌机制及其相关基因 | 第30-32页 |
·自噬的促存活机制 | 第32-33页 |
·microRNA(miRNA) | 第33-40页 |
·miRNA 的来源 | 第34页 |
·miRNA 调控靶基因的机制 | 第34-35页 |
·miRNA 靶基因预测及验证的方法 | 第35-36页 |
·miRNA 在肿瘤发生及治疗中的作用 | 第36-39页 |
·miRNA 的新发现——植物 miRNA 入侵人体 | 第39页 |
·miRNA 在肿瘤诊断上的应用 | 第39-40页 |
·miRNA 与自噬 | 第40-44页 |
·miRNA 抑制自噬 | 第40-41页 |
·miRNA 激活自噬 | 第41页 |
·自噬对 miRNA 的调控作用 | 第41-42页 |
·miR-199a | 第42页 |
·miR-199a 在不同组织细胞的表达谱及功能 | 第42-44页 |
·立题依据 | 第44-47页 |
第二章 材料与方法 | 第47-67页 |
·主要试剂及器材 | 第47-49页 |
·试剂 | 第47-49页 |
·器材 | 第49页 |
·主要仪器 | 第49-50页 |
·主要实验材料和方法 | 第50-67页 |
·细胞株 | 第50页 |
·胰酶的配制 | 第50页 |
·D-Hanks 液的配制 | 第50-51页 |
·细胞脂质体转染过表达 miRNA mimic | 第51页 |
·蛋白质免疫印记法(Western Blot) | 第51-56页 |
·RNA 提取 | 第56页 |
·照射条件 | 第56页 |
·细胞增殖检测 | 第56-57页 |
·细胞周期检测 | 第57页 |
·荧光素酶载体构建 | 第57-59页 |
·荧光素酶载体点突变 | 第59-62页 |
·荧光素酶报告基因分析(Liciferase reporter assay) | 第62-63页 |
·GFP-LC3 形态学分析自噬 | 第63-64页 |
·应用生物信息学对靶基因的预测 | 第64页 |
·Quantitative real-time (qRT-PCR) | 第64-65页 |
·细菌培养技术 | 第65-66页 |
·统计学方法 | 第66-67页 |
第三章 实验结果 | 第67-83页 |
·miR-199a-5p 抑制电离辐射诱导 MCF7 乳腺癌细胞的自噬 | 第67-70页 |
·电离辐射诱导 MCF7 细胞自噬和促进 miR-199a-5p 的表达 | 第67页 |
·miR-199a-5p 抑制电离辐射诱导 MCF7 乳腺癌细胞的自噬 | 第67-70页 |
·miR-199a-5p 在 MCF7 细胞中抑制靶基因 DRAM1 和 BECN1的表达 | 第70-75页 |
·miR-199a-5p 靶基因的预测 | 第70页 |
·DRAM1 和 BECN1 荧光素酶载体的构建 | 第70-72页 |
·miR-199a-5p 靶基因 DRAM1 和 BECN1 预测结合位点的突变 | 第72-73页 |
·MCF7 细胞中过表达 miR-199a-5p 抑制 DRAM1 和 BECN13’UTR 载体荧光素酶活性 | 第73-74页 |
·过表达 miR-199a-5p 抑制 MCF7 细胞中 DRAM1 和 BECN1蛋白表达 | 第74-75页 |
·miR-199a-5p 在 MDA-MB-231 细胞中上调 DRAM1 和 BECN1蛋白的表达、促进自噬和增强 IR 诱导的自噬 | 第75-78页 |
·电离辐射对 MDA-MB-231 细胞 DRAM1 和 BECN1 表达以及自噬的影响 | 第75-76页 |
·miR-199a-5p 促进 MDA-MB-231 细胞自噬并促进电离辐射诱导的自噬 | 第76-77页 |
·在 MDA-MB-231 中 miR-199a-5p 上调靶基因 DRAM1 和BECN1 的表达 | 第77-78页 |
·miR-199a-5p 增加电离辐射对 MDA-MB-231 细胞增殖活性抑制作用 | 第78-80页 |
·电离辐射改变 MDA-MB-231 细胞中 miR-199a-5p 的表达 | 第78-79页 |
·miR-199a-5p 增加电离辐射对 MDA-MB-231 细胞增殖活性抑制作用 | 第79-80页 |
·miR-199a-5p 对细胞周期的影响 | 第80-83页 |
第四章 讨论 | 第83-91页 |
结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-127页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第127-129页 |
致谢 | 第129页 |