| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-10页 |
| 1 引言 | 第10-20页 |
| ·动物乳腺生物反应器概念和原理 | 第10-12页 |
| ·动物乳腺生物反应器的操作流程 | 第12-13页 |
| ·动物乳腺生物反应器的优缺点 | 第13-14页 |
| ·动物乳腺生物反应器的优点 | 第13页 |
| ·动物乳腺生物反应器存在的问题 | 第13-14页 |
| ·动物乳腺生物反应器的应用 | 第14页 |
| ·动物乳腺生物反应器中关于改善乳成分研究的简介 | 第14-15页 |
| ·动物乳腺生物反应器的发展趋势 | 第15-16页 |
| ·乳糖不耐症 | 第16页 |
| ·糖苷酶 | 第16-18页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶 | 第17-18页 |
| ·嗜热古菌β-糖苷酶的活性位点 | 第18页 |
| ·密码子优化 | 第18-20页 |
| 2 实验一载体构建 | 第20-37页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·生物材料 | 第20页 |
| ·实验试剂及溶液配制 | 第20-21页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-27页 |
| ·密码子优化方法 | 第21-23页 |
| ·载体构建中质粒 DNA 的提取方法 | 第23页 |
| ·载体构建中质粒载体克隆步骤 | 第23-24页 |
| ·pLOX-EGFP-BLG-LacS 载体构建 | 第24-27页 |
| ·结果与分析 | 第27-35页 |
| ·LacS 基因的密码子优化结果 | 第27-29页 |
| ·密码子优化结果软件分析预测 | 第29-30页 |
| ·牛β－乳球蛋白（BLG）基因 5’端调控序列扩增电泳结果 | 第30-31页 |
| ·pMD-19BLG 质粒构建及鉴定结果 | 第31-32页 |
| ·pUC57-BLG-LacS 质粒的构建及鉴定结果 | 第32-33页 |
| ·pLOX-EGFP 质粒的构建及鉴定结果 | 第33-34页 |
| ·乳腺特异性表达载体 pLOX-EGFP-BLG-LacS 的构建及鉴定结果 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 3 实验二乳腺特异性表达载体转染小鼠乳腺癌细胞 | 第37-44页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·生物材料 | 第37页 |
| ·实验试剂及溶液配制 | 第37页 |
| ·实验仪器及耗材 | 第37-38页 |
| ·实验方法 | 第38-41页 |
| ·细胞的解冻复苏 | 第38页 |
| ·传代培养 | 第38页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞 G418 敏感度的检测 | 第38-39页 |
| ·鼠乳腺癌细胞的转染 | 第39页 |
| ·转基因阳性鼠乳腺癌细胞的 DNA 水平整合检测 | 第39-40页 |
| ·转基因阳性鼠乳腺癌细胞中目的基因 mRNA 表达检测 | 第40-41页 |
| ·结果与分析 | 第41-43页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞的转染结果 | 第41-42页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖苷酶基因整合检测结果 | 第42页 |
| ·小鼠乳腺癌细胞中嗜热菌糖苷酶基因表达检测结果 | 第42-43页 |
| ·讨论 | 第43-44页 |
| 4 结论 | 第44-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-52页 |
| 附录 | 第52-53页 |
| 作者简介 | 第53页 |
