| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-18页 |
| ·引言 | 第11页 |
| ·细胞分裂 | 第11-12页 |
| ·Stra8基因的发现 | 第12-13页 |
| ·RA诱导精原细胞启动减数分裂的研究 | 第13页 |
| ·Stra8基因的功能 | 第13-14页 |
| ·Stra8基因表达调控 | 第14-15页 |
| ·RA与Stra8基因在出生后的动物体或培养的细胞上的研究 | 第15-17页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第17-18页 |
| 第二章 Stra8基因cDNA全序列克隆 | 第18-34页 |
| 1. 引言 | 第18页 |
| 2. 材料和方法 | 第18-23页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·试剂和仪器 | 第18页 |
| ·总RNA的提取 | 第18-19页 |
| ·反转录扩增cDNA(RT-PCR) | 第19页 |
| ·Stra8基因分子克隆 | 第19-22页 |
| ·Stra8基因PCR产物回收和克隆 | 第22页 |
| ·转化 | 第22页 |
| ·Stra8基因的序列分析 | 第22-23页 |
| 3 实验结果与分析 | 第23-32页 |
| ·总RNA质量测定 | 第23页 |
| ·Stra8基因的PCR扩增 | 第23-24页 |
| ·序列结果 | 第24页 |
| ·序列结果的生物信息学分析 | 第24-29页 |
| ·Stra8基因同源性和系统进化树分析 | 第29-32页 |
| 4. 讨论 | 第32-34页 |
| 第三章 梅山猪Stra8基因时空表达谱的构建 | 第34-42页 |
| 1 引言 | 第34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-36页 |
| ·实验动物 | 第34-35页 |
| ·试剂和仪器 | 第35页 |
| ·RNA提取及cDNA合成 | 第35页 |
| ·Stra8基因在梅山猪组织的时空表达谱 | 第35-36页 |
| ·数据的统计与分析 | 第36页 |
| 3 实验结果 | 第36-40页 |
| ·RT-PCR检测Stra8基因在成年梅山猪各组织表达 | 第36-37页 |
| ·荧光定量PCR检测Stra8基因在梅山猪不同时间段睾丸的表达量 | 第37-40页 |
| 4. 讨论 | 第40-42页 |
| 第四章 Stra8基因真核表达载体的构建和亚细胞定位 | 第42-48页 |
| 1 引言 | 第42页 |
| 2 材料与方法 | 第42-44页 |
| ·实验材料 | 第42-43页 |
| ·试剂和仪器 | 第43页 |
| ·引物设计与合成 | 第43页 |
| ·Stra8基因cDNA的扩增 | 第43页 |
| ·融合表达载体的构建 | 第43-44页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-Stra8转染NIH-3T3细胞 | 第44页 |
| 3 结果 | 第44-47页 |
| ·Stra8基因的克隆 | 第44-45页 |
| ·融合表达载体pEGFP-N1-Stra8的鉴定 | 第45-46页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-Stra8重组质粒转染NIH-3T3细胞 | 第46-47页 |
| 4 讨论 | 第47-48页 |
| 第五章 Stra8转染猪精原干细胞表达的初步研究 | 第48-63页 |
| 1 引言 | 第48页 |
| 2 实验材料 | 第48-49页 |
| ·实验动物及材料 | 第48页 |
| ·试剂和仪器 | 第48-49页 |
| 3 实验方法 | 第49-53页 |
| ·猪支持细胞的分离培养 | 第49页 |
| ·猪支持细胞的传代 | 第49页 |
| ·猪支持细胞的油红O染色 | 第49-50页 |
| ·猪支持细胞饲养层细胞的制备 | 第50页 |
| ·猪精原干细胞的分离培养 | 第50-51页 |
| ·猪精原干细胞的鉴定 | 第51-53页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-Stra8转染猪精原干细胞 | 第53页 |
| ·重组质粒pEGFP-Nl-StraS转染猪精原干细胞 | 第53页 |
| 4. 实验结果 | 第53-61页 |
| ·猪Sertoli细胞的分离培养与传代 | 第53-54页 |
| ·猪Sertoli细胞油红O染色 | 第54页 |
| ·猪Sertoli细胞饲养层制备 | 第54-55页 |
| ·猪精原干细胞的分离培养与传代 | 第55-56页 |
| ·猪精原干细胞的鉴定 | 第56-59页 |
| ·重组质粒pEGFP-N1-Stra8转染猪精原干细胞 | 第59-60页 |
| ·pEGFP-N1-Stra8转染猪精原干细胞的发育 | 第60-61页 |
| 5. 讨论 | 第61-63页 |
| 全文结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-73页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第73-75页 |
