| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-19页 |
| ·植物DNA甲基化 | 第9-11页 |
| ·DNA甲基化机制 | 第9-10页 |
| ·DNA甲基化调节基因表达的机制 | 第10页 |
| ·植物DNA甲基化的生物学功能 | 第10-11页 |
| ·植物MBD蛋白 | 第11-15页 |
| ·MBD蛋白的结构特点 | 第11页 |
| ·MBD蛋白的功能 | 第11-14页 |
| ·小麦MBD蛋白 | 第14-15页 |
| ·酵母双杂交系统介绍 | 第15-19页 |
| ·酵母双杂交原理 | 第15-16页 |
| ·酵母双杂交系统的特点 | 第16页 |
| ·酵母双杂交系统的缺陷及改进 | 第16-17页 |
| ·酵母双杂交系统的应用 | 第17页 |
| ·本文选择的酵母双杂交系统 | 第17-19页 |
| 2 引言 | 第19-20页 |
| 3 材料与方法 | 第20-39页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株 | 第20页 |
| ·质粒载体 | 第20页 |
| ·工具酶及试剂盒 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·PCR引物 | 第20-21页 |
| ·LB培养基 | 第21页 |
| ·酵母培养基 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-39页 |
| ·总RNA提取及质量鉴定 | 第22-23页 |
| ·目的基因的3’RACE克隆 | 第23-26页 |
| ·目的基因的5’RACE克隆 | 第26-30页 |
| ·酵母双杂诱饵载体的构建和酵母转化 | 第30-31页 |
| ·酵母双杂诱饵蛋白自激活和毒性检测 | 第31-33页 |
| ·Western blot检测诱饵蛋白的表达 | 第33-37页 |
| ·酵母双杂交文库筛选互作蛋白 | 第37-38页 |
| ·测序确认编码互作蛋白的基因 | 第38-39页 |
| 4 结果与分析 | 第39-55页 |
| ·TaMBD2基因的全长 cDNA序列分析 | 第39页 |
| ·总RNA的提取和质量检测 | 第39页 |
| ·小麦TaMBD2全长 cDNA的克隆及序列分析 | 第39页 |
| ·小麦TaMBD2编码蛋白质的结构特性分析 | 第39-42页 |
| ·酵母双杂诱饵载体PGBKT7-TaMBD2在酵母细胞中的表达 | 第42-45页 |
| ·酵母双杂诱饵载体PGBKT7-TaMBD2的构建和鉴定 | 第42-44页 |
| ·Western blot检测诱饵蛋白在酵母细胞中的表达 | 第44-45页 |
| ·诱饵蛋白的自激活检测 | 第45页 |
| ·诱饵蛋白的毒性检测 | 第45-46页 |
| ·阳性对照和阴性对照结果分析 | 第46-47页 |
| ·TaMBD2互作蛋白筛选结果分析 | 第47-55页 |
| 5 结论与讨论 | 第55-58页 |
| ·获得了小麦甲基结合蛋白基因TaMBD2的cDNA全长 | 第55页 |
| ·构建了酵母诱饵表达载体PGBKT7-TaMBD2 | 第55页 |
| ·利用酵母双杂交系统筛选TaMBD2互作蛋白 | 第55-58页 |
| 参考文献 | 第58-62页 |
| Abstract | 第62-63页 |
