| 课题资助资金 | 第1-6页 |
| 缩略词表 | 第6-8页 |
| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 文献综述 | 第12-27页 |
| 1.副溶血弧菌生物学特性 | 第12-13页 |
| ·形态 | 第12页 |
| ·生长条件 | 第12-13页 |
| 2.副溶血弧菌的流行性 | 第13页 |
| 3.副溶血弧菌的毒力因子及致病机制 | 第13-17页 |
| ·溶血素 | 第13-14页 |
| ·酶类 | 第14-15页 |
| ·黏附因子 | 第15页 |
| ·Ⅲ型分泌系统 | 第15-17页 |
| 4.副溶血弧菌生物膜研究现状 | 第17-27页 |
| ·鞭毛 | 第18-19页 |
| ·菌毛 | 第19页 |
| ·多糖 | 第19-22页 |
| ·环二鸟苷酸(c-di-GMP) | 第22-24页 |
| ·弧菌的密度感应(Quorum sensing QS)系统 | 第24-27页 |
| 第一章 副溶血弧菌生物膜表型实验平台的建立 | 第27-42页 |
| 1.引言 | 第27-28页 |
| 2.材料 | 第28-29页 |
| ·菌株 | 第28页 |
| ·主要培养基 | 第28-29页 |
| 3.方法 | 第29-32页 |
| ·菌种的准备 | 第29页 |
| ·生长曲线的测定 | 第29页 |
| ·菌落表面褶皱实验条件的优化 | 第29-31页 |
| ·营养环境的优化 | 第29-30页 |
| ·培养方式的优化 | 第30-31页 |
| ·培养时间的优化 | 第31页 |
| ·生物膜基质的刚果红染色条件的优化 | 第31页 |
| ·生物膜的结晶紫染色实验条件的摸索 | 第31-32页 |
| 4.结果与分析 | 第32-39页 |
| ·生长曲线 | 第32-33页 |
| ·菌落表面褶皱 | 第33-36页 |
| ·营养环境的选择 | 第33-34页 |
| ·褶皱培养方式的选择 | 第34-35页 |
| ·褶皱中预培养静置时间的选择 | 第35-36页 |
| ·生物膜基质的刚果红染色结果 | 第36-37页 |
| ·生物膜的结晶紫染色实验 | 第37-39页 |
| 5.讨论 | 第39-41页 |
| 6.总结 | 第41-42页 |
| 第二章 LacZ报告基因融合实验平台的建立 | 第42-49页 |
| 1.材料和方法 | 第42-45页 |
| ·材料 | 第42-43页 |
| ·菌株与质粒 | 第42页 |
| ·主要试剂 | 第42-43页 |
| ·重组质粒的构建 | 第43-44页 |
| ·引物设计与PCR扩增 | 第43-44页 |
| ·质粒与PCR产物的酶切与连接 | 第44页 |
| ·连接产物的转化 | 第44页 |
| ·重组克隆的鉴定 | 第44页 |
| ·LacZ融合实验 | 第44-45页 |
| ·重组质粒的转化与筛选 | 第44页 |
| ·β-半乳糖营酶活性检测 | 第44-45页 |
| 2.实验结果 | 第45-47页 |
| ·重组质粒的构建 | 第45-46页 |
| ·靶基因启动子区的扩增 | 第45页 |
| ·阳性克隆的鉴定 | 第45-46页 |
| ·OpaR蛋白对VPA1513的转录调控 | 第46-47页 |
| ·LacZ实验菌株的鉴定 | 第46-47页 |
| ·OpaR抑制VPA1513的转录 | 第47页 |
| 3.讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57页 |