摘要 | 第1-4页 |
ABSTRACT | 第4-9页 |
缩写符号说明 | 第9-10页 |
第一章 文献综述 | 第10-24页 |
·植物体 RLKs 的结构、分类与功能 | 第10-14页 |
·植物 RLKs 的结构 | 第10-11页 |
·植物 RLKs 的分类 | 第11页 |
·植物 LRR-RLKs 亚结构域特征 | 第11-12页 |
·LRR-RLKs 的生物学功能 | 第12-14页 |
·CLE 多肽激素 | 第14-17页 |
·CLE 多肽激素的结构 | 第14-15页 |
·CLE 多肽激素的分类 | 第15-17页 |
·导管分化抑制因子 TDIF 及其生理功能 | 第17-22页 |
·TDIF 的受体 TDR/PXY | 第18-19页 |
·TDIF/TDR 信号识别在维管系统发育中的作用机制 | 第19-22页 |
·展望 | 第22-24页 |
第二章 与杨树生长发育相关的 LRR-RLKs 的生物信息学分析 | 第24-40页 |
·杨树相关基因的生物信息学分析 | 第24-25页 |
·同源序列的查找 | 第24页 |
·多序列比对 | 第24页 |
·构建系统进化树 | 第24-25页 |
·目的基因结构及编码的蛋白序列分析 | 第25页 |
·目的基因的表达特异性分析 | 第25页 |
·结果与分析 | 第25-40页 |
·杨树相关的功能候选基因的查找 | 第25-27页 |
·构建系统进化树 | 第27-29页 |
·目的基因及编码的蛋白质序列分析 | 第29-38页 |
·杨树功能候选基因的表达分析 | 第38-40页 |
第三章 构建杨树生长发育相关的 LRR-RLK 基因的 RNAi 载体 | 第40-56页 |
·材料与方法 | 第42-50页 |
·植物材料 | 第42-43页 |
·酶与试剂盒 | 第43页 |
·RNAi 部位选择及引物设计 | 第43页 |
·毛果杨全基因组 DNA 的提取 | 第43-44页 |
·attB-PCR 产物的合成及纯化回收 | 第44-45页 |
·BP 反应 | 第45-46页 |
·LR 反应 | 第46-48页 |
·表达载体转化农杆菌感受态细胞 | 第48-50页 |
·结果与分析 | 第50-56页 |
·杨树功能候选基因 RNAi 区段选择及 PCR 引物设计 | 第50-51页 |
·毛果杨基因组 PCR 检测 | 第51-52页 |
·attB-PCR 产物的检测 | 第52页 |
·菌落 PCR 检测 BP 反应阳性克隆 | 第52-53页 |
·菌落 PCR 检测 LR 反应阳性克隆 | 第53-54页 |
·RNAi 表达载体转化农杆菌 C58(pMP90)感受态细胞 | 第54-56页 |
第四章 RNAi 表达载体对欧洲山杨×银白杨的遗传转化及分子鉴定 | 第56-64页 |
·材料与方法 | 第56-60页 |
·材料和试剂 | 第56页 |
·相关培养基、抗生素及激素配制方法 | 第56-58页 |
·相关 PCR 引物设计 | 第58页 |
·根癌农杆菌介导 717 杨树的遗传转化 | 第58-59页 |
·转基因杨树的分子鉴定 | 第59-60页 |
·结果与讨论 | 第60-64页 |
·转基因 717 杨树的基因组 PCR 检测 | 第60-62页 |
·基因组 PCR 验证阳性转化子 | 第62-64页 |
第五章 全文结论及展望 | 第64-66页 |
·研究总结 | 第64-65页 |
·后续研究 | 第65-66页 |
参考文献 | 第66-72页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
附录一 多序列比对结果 | 第73-74页 |
附录二 PtPXYa 和 PtPXYb 基因的 RNAi 片段 | 第74-75页 |
附录三 pDONOR201 载体图谱及卡那霉素抗性基因序列 | 第75-76页 |
附录四 目的载体 pH7GWIWG2(I)图谱及 35S 启动子序列 | 第76-77页 |
附录五 717 杨树遗传转化不同阶段的实验照片 | 第77-79页 |
致谢 | 第79页 |