| 中文摘要 | 第1-8页 |
| 英文摘要 | 第8-10页 |
| 前言 | 第10-12页 |
| 第一部分 COPD大鼠模型构建及气道成纤维细胞原代培养 | 第12-20页 |
| 1 | 第12-13页 |
| ·主要试剂与仪器 | 第12-13页 |
| ·常用试剂配置 | 第13页 |
| 2.构建COPD大鼠模型 | 第13-16页 |
| ·实验动物 | 第13页 |
| ·实验分组 | 第13-14页 |
| ·实验方法 | 第14-16页 |
| ·COPD模型大鼠造模方法及鉴定 | 第14页 |
| ·组织标本采集及原代培养方法 | 第14-15页 |
| ·细胞传代培养 | 第15页 |
| ·细胞冻存 | 第15页 |
| ·细胞复苏 | 第15-16页 |
| ·成纤维细胞的纯化 | 第16页 |
| ·成纤维细胞的鉴定 | 第16页 |
| 3 实验观测指标 | 第16-17页 |
| 4 结果 | 第17-20页 |
| ·COPD大鼠造模鉴定结果 | 第17-18页 |
| ·COPD大鼠和正常大鼠气道成纤维细胞原代培养鉴定结果 | 第18-19页 |
| ·成纤维细胞纯化及波形蛋白鉴定 | 第19-20页 |
| 第二部分：重组大鼠质粒pEGFP-rHSG/Mfn2的构建及体外转染对COPD大鼠气道成纤维细胞增值影响 | 第20-43页 |
| 一、重组大鼠质粒pEGFP-rHSG/Mfn2的构建 | 第20-30页 |
| 1.材料与仪器 | 第20-23页 |
| 2 实验方法 | 第23-28页 |
| ·从大鼠气道成纤维细胞细胞中抽提总RNA | 第23-24页 |
| ·RNA反转录成cDNA | 第24页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·基因的PCR扩增 | 第25-26页 |
| ·目的片段的与目的载体的连接 | 第26-27页 |
| ·抽提质粒 | 第27页 |
| ·质粒鉴定 | 第27-28页 |
| 3 实验结果 | 第28-30页 |
| 二、体外转染对COPD大鼠气道成纤维细胞增值影响 | 第30-43页 |
| 1 稀释脂质体转染成纤维细胞 | 第30页 |
| 2 血球计数板计数 | 第30页 |
| 3 MTT转染不同时间细胞生长增殖能力测定 | 第30-31页 |
| 4 Western blot法检测转染后各组rHSG、TGF-β1、PDGF蛋白表达情况 | 第31-33页 |
| 5 RT-PCR检测rHSG、TGF-β1、PDGFmRNA的表达 | 第33-37页 |
| 6 统计学处理数据 | 第37页 |
| 7 结果 | 第37-43页 |
| 讨论 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-49页 |
| 附录一 缩略语表 | 第49-50页 |
| 附录二 综述 | 第50-59页 |
| 参考文献 | 第56-59页 |
| 附录三 致谢 | 第59-60页 |
| 附录四 个人简介 | 第60页 |
