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基于荧光通用引物的多重定量RT-PCR基因表达谱分析平台的构建、优化及应用

摘要第1-7页
ABSTRACT第7-12页
第1章 前言第12-25页
   ·基因表达分析技术平台的现状第12-19页
     ·基于芯片的基因表达分析技术介绍第13-14页
     ·非基于芯片的基因表达分析技术介绍第14-18页
     ·其他技术第18页
     ·主流技术对比与总结第18-19页
   ·基于荧光通用引物的多重RT-PCR平台的原理介绍第19-21页
   ·克隆性发育启动调控基因的研究进展及意义第21-22页
   ·实验设计思路第22-24页
     ·基于荧光通用引物的多重RT-PCR平台的构建和优化第22页
     ·定位QTL区段内候选基因的表达分析第22-24页
   ·本实验的研究意义第24-25页
第2章 实验材料与方法第25-32页
   ·实验材料第25-27页
     ·小鼠饲养与取样第25页
     ·主要仪器和试剂第25-26页
     ·软件与网络资源第26-27页
   ·实验方法第27-29页
     ·引物设计第27-28页
     ·RNA制备第28-29页
     ·下游嵌合特异引物逆转录反应第29页
     ·上游嵌合特异引物引导通用引物的PCR反应第29页
     ·测序仪检测PCR反应产物第29页
   ·平台优化及评估第29-31页
     ·灵敏度第29-30页
     ·平台优化实验第30页
     ·重复性实验第30页
     ·样本检测及方法比较第30-31页
   ·数据分析第31-32页
第3章 结果与分析第32-46页
   ·引物设计及验证第32-33页
     ·通用引物设计第32页
     ·看家基因嵌合特异引物设计及验证第32-33页
   ·RNA抽提质量及浓度检测第33-35页
   ·DNase Ⅰ处理及RT-PCR优化第35-37页
     ·DNase Ⅰ处理优化及验证第35-37页
     ·RT-PCR优化第37页
   ·平台评估及优化第37-42页
     ·平台检测灵敏度测试第37-38页
     ·引物优化第38-41页
     ·平台重复性实验第41-42页
   ·样本检测与比较第42-46页
     ·样本的平台检测结果第42-44页
     ·样本平台检测差异基因的real-time qPCR验证第44-46页
第4章 讨论第46-49页
   ·平台定量原理及与传统的RT-PCR的比较第46页
   ·平台优化及影响因素第46-47页
   ·样本的检测与比较第47-49页
第5章 结论与展望第49-50页
参考文献第50-56页
课题来源第56-57页
攻读硕士学位期间发表学术论文目录第57-58页
致谢第58页

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