| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-12页 |
| 引言 | 第12-16页 |
| 第一章 草鱼肌肉生成抑素 MSTN2 的克隆及功能研究 | 第16-37页 |
| ·材料，仪器和试剂 | 第16-18页 |
| ·实验用鱼和胚胎 | 第16-17页 |
| ·主要生化试剂 | 第17页 |
| ·仪器设备 | 第17-18页 |
| ·方法 | 第18-27页 |
| ·总 RNA 提取 | 第18页 |
| ·cDNA 全长克隆 | 第18-21页 |
| ·核苷酸序列测定及分析 | 第21页 |
| ·RT-PCR 分析 | 第21-23页 |
| ·整胚原位杂交 | 第23-24页 |
| ·草鱼 MSTN2 体外转录载体的构建 | 第24-26页 |
| ·MSTN2 加帽 mRNA 的制备 | 第26页 |
| ·草鱼胚胎的显微注射 | 第26-27页 |
| ·过表达 MSTN2 的草鱼胚胎的原位杂交 | 第27页 |
| ·结果 | 第27-35页 |
| ·草鱼 MSTN2 的克隆及序列分析 | 第27-29页 |
| ·同源性比较 | 第29-30页 |
| ·草鱼 MSTN2 的 mRNA 在不同胚胎时期的表达情况 | 第30-31页 |
| ·MSTN2 mRNA 在草鱼成鱼不同组织中的表达 | 第31-32页 |
| ·草鱼 MSTN2 过表达载体的构建和加帽 mRNA 的合成 | 第32-33页 |
| ·MSTN2 的 mRNA 过表达对草鱼胚胎的影响 | 第33-34页 |
| ·MSTN2 过表达对下游基因的影响 | 第34-35页 |
| ·讨论 | 第35-37页 |
| 第二章 鱼类肌肉生成抑素的反义链 antimstn1 的转基因研究 | 第37-48页 |
| ·实验材料 | 第37-38页 |
| ·实验用鱼和卵 | 第37页 |
| ·主要试剂 | 第37-38页 |
| ·仪器设备 | 第38页 |
| ·实验方法 | 第38-43页 |
| ·反义 antimstn1 载体的构建 | 第38-39页 |
| ·草鱼、鲫鱼和团头鲂的饲养与受精卵的获得 | 第39页 |
| ·草鱼、鲫鱼和团头鲂的显微注射 | 第39-40页 |
| ·转基因鱼的养殖 | 第40页 |
| ·转基因鱼的标记 | 第40-41页 |
| ·转基因鱼的 DNA 提取与检测 | 第41-43页 |
| ·实验结果 | 第43-46页 |
| ·pTgf2-EF1α-antimstn1 反义载体的构建 | 第43-44页 |
| ·转基因鱼的阳性个体检测 | 第44页 |
| ·转基因鱼阳性个体生长指标测定 | 第44-46页 |
| ·讨论 | 第46-48页 |
| 第三章 Tgf2转座子介导的养殖鱼类插入诱变研究 | 第48-65页 |
| ·材料，仪器与试剂 | 第48-49页 |
| ·实验用鱼和卵 | 第48页 |
| ·主要仪器 | 第48页 |
| ·主要试剂 | 第48-49页 |
| ·实验方法 | 第49-51页 |
| ·供体载体和辅助质粒的构建 | 第49页 |
| ·体外转录 gfTP | 第49-50页 |
| ·草鱼、鲫鱼和团头鲂的饲养和受精卵的获得 | 第50页 |
| ·草鱼、鲫鱼和团头鲂的显微注射 | 第50页 |
| ·插入突变鱼的养殖 | 第50页 |
| ·插入突变鱼的标记 | 第50页 |
| ·插入突变鱼的 DNA 提取与检测 | 第50-51页 |
| ·实验结果 | 第51-62页 |
| ·插入诱变的 4 种供体质粒和编码转座酶的辅助质粒 | 第51-52页 |
| ·插入诱变的鱼体胚胎期的荧光观察 | 第52-55页 |
| ·插入诱变阳性个体的 PCR 检测 | 第55-56页 |
| ·阳性整合个体中的突变表型 | 第56-61页 |
| ·插入诱变阳性个体的生长性状的测定 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-65页 |
| 结论与展望 | 第65-67页 |
| 参考文献 | 第67-72页 |
| 致谢 | 第72-73页 |
| 硕士期间发表的论文 | 第73页 |
