| 摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·实验目的与意义 | 第12页 |
| ·流感疫苗的研究 | 第12-14页 |
| ·流感疫苗生产技术 | 第12-13页 |
| ·禽流感灭活疫苗的研究 | 第13页 |
| ·禽流感基因工程活载体疫苗的研究 | 第13-14页 |
| ·禽流感DNA疫苗的研究 | 第14页 |
| ·禽流感通用疫苗的研究 | 第14页 |
| ·杆状病毒表达系统 | 第14-18页 |
| ·杆状病毒表达系统的概述 | 第15页 |
| ·杆状病毒表达系统的构建 | 第15-16页 |
| ·杆状病毒表达系统的优点 | 第16页 |
| ·杆状病毒表达系统中常用的昆虫细胞系 | 第16-17页 |
| ·昆虫细胞中的糖基化修饰 | 第17-18页 |
| ·杆状病毒表达系统在禽流感疫苗研究中的应用 | 第18-23页 |
| ·重组HA蛋白疫苗的研究 | 第18-19页 |
| ·重组NA疫苗(rNA)的研究 | 第19-20页 |
| ·杆状病毒表达系统表达核蛋白的研究 | 第20页 |
| ·杆状病毒表达系统表达基质蛋白(M蛋白)的研究 | 第20页 |
| ·流感VLPs疫苗的研究 | 第20-22页 |
| ·HA表面展示和转导的流感疫苗 | 第22-23页 |
| ·展望 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-36页 |
| ·试验材料 | 第24-25页 |
| ·毒株、细胞与实验动物 | 第24页 |
| ·重组质粒、载体和疫苗 | 第24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·主要仪器 | 第24-25页 |
| ·分子生物学软件 | 第25页 |
| ·试验方法 | 第25-36页 |
| ·PCR引物设计与合成 | 第25页 |
| ·重组转移载体pFastBacDual-HA的构建及鉴定 | 第25-28页 |
| ·重组转移载体pFastBacDual-HA-M1的构建及鉴定 | 第28-29页 |
| ·重组杆状病毒的制备及鉴定 | 第29-31页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第31-32页 |
| ·H5亚型AIV VLPs疫苗对BALB/c小鼠免疫效力的评价 | 第32-34页 |
| ·H5亚型AIV VLPs疫苗对SPF鸡免疫效力的评价 | 第34-36页 |
| 3 结果 | 第36-54页 |
| ·重组表达载体的构建及鉴定 | 第36-38页 |
| ·PCR扩增目的基因 | 第36页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第36-38页 |
| ·重组杆粒的鉴定 | 第38页 |
| ·重组杆状病毒的鉴定 | 第38-40页 |
| ·重组杆状病毒的PCR鉴定 | 第38-40页 |
| ·重组杆状病毒TCID50的检测 | 第40页 |
| ·重组蛋白的表达及鉴定 | 第40-42页 |
| ·SDS-PAGE检测重组蛋白的表达 | 第40页 |
| ·重组蛋白的western blot分析 | 第40-41页 |
| ·流感VLPs的透射电镜观察 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白的血凝活性测定 | 第42页 |
| ·重组蛋白的免疫组织化学法检测 | 第42页 |
| ·重组蛋白浓度的测定 | 第42页 |
| ·疫苗免疫效果的评价 | 第42-54页 |
| ·BALB/c小鼠免疫效果评价 | 第42-47页 |
| ·疫苗保护小鼠抵抗致病性禽流感病毒的攻击 | 第47-48页 |
| ·SPF鸡免疫效果评价 | 第48-52页 |
| ·疫苗保护SPF鸡抵抗高致病性禽流感病毒攻击 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| ·流感VLPs的构建 | 第54-55页 |
| ·疫苗免疫试验分析 | 第55-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-64页 |
| 附录 | 第64-66页 |
| 攻读硕士期间发表的论文 | 第66页 |
