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苹果隐花色素基因MdCRY1和MdCRY2的克隆及功能鉴定

符号说明第1-9页
中文摘要第9-10页
Abstract第10-12页
1 引言第12-22页
   ·光对植物生长发育的影响第12-13页
     ·光和植物种子萌发第12页
     ·光对植物叶片生长的影响第12页
     ·光对植物茎生长的影响第12-13页
     ·光对植物叶绿素合成的影响第13页
     ·光对花青素合成的影响第13页
   ·光受体第13-15页
   ·隐花色素第15-20页
     ·隐花色素的结构第15-16页
     ·隐花色素的功能第16-18页
     ·隐花色素的信号传导第18-20页
   ·本研究的目的意义第20-22页
2 材料与方法第22-43页
   ·试验材料第22-26页
     ·植物材料第22页
     ·植物材料培养与处理第22页
     ·菌株及载体第22页
     ·酶、试剂盒、生化试剂、培养基等第22-24页
     ·仪器与设备第24页
     ·PCR 引物第24-26页
   ·试验方法第26-43页
     ·植物总 RNA 的提取第26-27页
     ·总 RNA 含量与纯度检测第27页
     ·植物 RNA 的纯化(除 DNA)方法第27-28页
     ·反转录 cDNA 第一链的合成第28-29页
     ·反转录产物质量检测第29页
     ·cDNA 纯化第29页
     ·cDNA 末端加尾第29-30页
     ·植物基因组 DNA 的提取及纯化第30-31页
     ·基因克隆第31-34页
     ·目的片段的回收第34页
     ·连接反应第34-35页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备和转化第35-36页
     ·根癌农杆菌 LBA4404 和 GV3101 感受态细胞的制备与转化第36页
     ·MdCRY1、MdCRY2 基因载体的构建第36-37页
     ·酵母双杂交(Yeast-two-hybrid)试验第37-39页
     ·双分子荧光互补(BiFC)实验第39-40页
     ·转基因植物材料的获得第40-41页
     ·转基因植株的生物学鉴定分析第41页
     ·拟南芥相关指标测定第41-43页
3 结果与分析第43-60页
   ·苹果隐花色素基因 MdCRY1 及 MdCRY2 全长 cDNA 的分子克隆第43-44页
     ·苹果 MdCRY1 基因的 RACE 扩增和全长 cDNA 序列分离第43-44页
     ·苹果 MdCRY2 基因的 RACE 扩增和全长 cDNA 序列分离第44页
   ·苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因的序列分析第44-50页
     ·MdCRY1、MdCRY2 基因组序列结构分析第44-46页
     ·MdCRY1、MdCRY2 氨基酸序列分析及同源关系比对第46-50页
   ·苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因的时空表达分析第50-52页
     ·MdCRY1 的时空表达分析第50-51页
     ·MdCRY2 的时空表达分析第51-52页
   ·苹果 MdCRY1、MdCRY2 基因与拟南芥相应突变体的功能互补第52-58页
     ·MdCRY1 与拟南芥 cry1 突变体的功能互补第53-56页
     ·MdCRY2 与拟南芥 cry2 突变体的功能互补第56-58页
   ·苹果 MdCRY1、MdCRY2 与拟南芥 AtCOP1 的蛋白互作第58-60页
4 讨论第60-62页
5 结论第62-63页
参考文献第63-71页
致谢第71页

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