C-myc单克隆抗体的制备及鉴定
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-8页 |
| 引言 | 第8-17页 |
| 1 材料与方法 | 第17-27页 |
| ·材料 | 第17-21页 |
| ·实验动物和细胞 | 第17页 |
| ·主要试剂 | 第17-18页 |
| ·仪器设备及耗材 | 第18页 |
| ·试剂配制 | 第18-21页 |
| ·方法 | 第21-27页 |
| ·双酶切PET28a 质粒载体的构建 | 第21页 |
| ·c-myc 抗原的IPTG 诱导表达与纯化 | 第21-22页 |
| ·Western Blot | 第22页 |
| ·动物免疫 | 第22页 |
| ·小鼠血清收集 | 第22页 |
| ·ELISA 法检测抗血清效价 | 第22-23页 |
| ·细胞培养 | 第23页 |
| ·滋养细胞的制备 | 第23页 |
| ·免疫脾细胞悬液的制备 | 第23-24页 |
| ·细胞融合 | 第24页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第24页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第24-25页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的扩大化培养 | 第25页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第25页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第25-27页 |
| 2 结果 | 第27-39页 |
| ·原核表达及纯化的c-myc 蛋白 | 第27-29页 |
| ·3 次免疫后小鼠血清效价检测 | 第29-30页 |
| ·SP2/0 骨髓瘤细胞 | 第30页 |
| ·小鼠脾细胞 | 第30-31页 |
| ·滋养细胞 | 第31-32页 |
| ·融合细胞 | 第32-33页 |
| ·亚克隆细胞 | 第33-34页 |
| ·杂交瘤细胞上清液及腹水单抗效价的检测 | 第34-35页 |
| ·单抗的亚型鉴定 | 第35-36页 |
| ·杂交瘤细胞上清和腹水中抗体浓度的测定 | 第36-37页 |
| ·腹水抗体分子量的测定 | 第37页 |
| ·杂交瘤细胞染色体 | 第37-39页 |
| 3 讨论 | 第39-42页 |
| 结论 | 第42-43页 |
| 参考文献 | 第43-47页 |
| 附录A Western Blot | 第47-49页 |
| 附录B 杂交瘤细胞染色体鉴定 | 第49-50页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |
