| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-13页 |
| 1 前言 | 第13-34页 |
| ·VLCPUFAS 的研究进展 | 第13-26页 |
| ·VLCPUFAs 的命名及分类 | 第14-15页 |
| ·VLCPUFAs 的生物学功能 | 第15-17页 |
| ·VLCPUFAs 对人体健康具有重要作用 | 第15-16页 |
| ·VLCPUFAs 在日用品方面的应用 | 第16页 |
| ·VLCPUFAs 参与植物防御信号途径 | 第16-17页 |
| ·VLCPUFAs 与环境保护 | 第17页 |
| ·VLCPUFAs 的来源 | 第17页 |
| ·VLCPUFAs 合成相关基因 | 第17-19页 |
| ·脂肪酸去饱和酶 | 第17-18页 |
| ·脂肪酸链延长酶 | 第18-19页 |
| ·VLCPUFAs 的生物合成途径 | 第19-22页 |
| ·VLCPUFAs 在转基因植物中的生产 | 第22-26页 |
| ·密码子优化基因表达 | 第26-28页 |
| ·密码子优化基因表达的研究进展 | 第26-27页 |
| ·密码子优化的方法 | 第27-28页 |
| ·油脂合成过程中相关基因的研究进展 | 第28-32页 |
| ·乙酰辅酶 A 羧化酶 | 第30页 |
| ·甘油-3-磷酸脱氢酶 | 第30-31页 |
| ·酰基转移酶 | 第31-32页 |
| ·本研究的目的和意义 | 第32-34页 |
| 2 材料与方法 | 第34-46页 |
| ·实验材料 | 第34-35页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第34页 |
| ·马铃薯致病疫霉及生长条件 | 第34页 |
| ·酿酒酵母 YPH500 及生长条件 | 第34页 |
| ·球等鞭金藻及生长条件 | 第34页 |
| ·菌株及质粒 | 第34页 |
| ·酶及生化试剂 | 第34-35页 |
| ·本论文所用引物见附录 | 第35页 |
| ·实验方法 | 第35-46页 |
| ·基因组 DNA 提取 | 第35页 |
| ·总 RNA 的提取 | 第35-36页 |
| ·RNA 甲醛变性胶电泳检测 | 第36-37页 |
| ·反转录 cDNA 第一链的合成 | 第37-38页 |
| ·PCR 扩增 | 第38页 |
| ·连接反应 | 第38页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第38-39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第39页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的转化 | 第39页 |
| ·碱法小量提取质粒 DNA | 第39-40页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第40页 |
| ·DNA 片段的回收 | 第40-41页 |
| ·表达载体的构建 | 第41页 |
| ·酿酒酵母的转化 | 第41页 |
| ·酿酒酵母的诱导表达及菌体收集 | 第41-42页 |
| ·根癌农杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第42-43页 |
| ·根癌农杆菌冻融法感受态细胞的制备 | 第42页 |
| ·根癌农杆菌电转化感受态制备 | 第42-43页 |
| ·冻融法转化农杆菌 | 第43页 |
| ·电击法转化农杆菌 | 第43页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥遗传转化 | 第43-44页 |
| ·种子处理 | 第43-44页 |
| ·移栽拟南芥 | 第44页 |
| ·拟南芥转化 | 第44页 |
| ·转基因植株分析 | 第44-45页 |
| ·脂肪酸的提取及分析 | 第45-46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-68页 |
| ·超长链多不饱和脂肪酸合成关键酶基因的密码子优化 | 第46-63页 |
| ·球等鞭金藻中Δ9 链延长酶基因的克隆与密码子优化 | 第46-55页 |
| ·球等鞭金藻脂肪酸成分分析 | 第46页 |
| ·球等鞭金藻Δ9 链延长酶基因的克隆 | 第46-47页 |
| ·球等鞭金藻Δ9 链延长酶在拟南芥中表达时密码子使用频率分析 | 第47-49页 |
| ·Δ9 链延长酶中偏好性最强的 CGC 密码子的优化 | 第49-50页 |
| ·Δ9 链延长酶 N 端密码子的优化 | 第50-51页 |
| ·优化后的Δ9 链延长酶基因植物表达载体的构建 | 第51-52页 |
| ·转基因拟南芥的脂肪酸成分分析 | 第52-55页 |
| ·马铃薯致病疫霉中Δ6 去饱和酶基因的克隆与密码子优化 | 第55-63页 |
| ·马铃薯致病疫霉的脂肪酸成分分析 | 第55-56页 |
| ·马铃薯致病疫霉Δ6 去饱和酶基因的克隆 | 第56-57页 |
| ·马铃薯致病疫霉Δ6 去饱和酶在酵母中表达时密码子使用频率分析 | 第57-59页 |
| ·Δ6 去饱和酶中偏好性最强的 CGC 密码子的优化 | 第59-60页 |
| ·Δ6 去饱和酶 N 端密码子的优化 | 第60页 |
| ·优化后的Δ6 去饱和酶基因酵母表达载体的构建 | 第60-61页 |
| ·转基因酵母的脂肪酸成分分析 | 第61-63页 |
| ·油脂合成过程中相关基因的克隆 | 第63-68页 |
| ·甘油-3-磷酸脱氢酶基因的克隆 | 第64-66页 |
| ·乙酰辅酶 A 羧化酶酶基因的克隆 | 第66-68页 |
| 4 讨论 | 第68-72页 |
| 5 结论 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-83页 |
| 附录 | 第83-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第90页 |
