摘要 | 第1-8页 |
ABSTRACT | 第8-13页 |
第一章 文献综述 | 第13-20页 |
·SH2B1 基因研究进展 | 第13-16页 |
·SH2B1 结构与分布 | 第13页 |
·SH2B1 作为接头蛋白的作用机制 | 第13-14页 |
·SH2B1 与代谢、生长 | 第14-16页 |
·SH2B1 目前研究概况 | 第16页 |
·MYOG 基因研究进展 | 第16-18页 |
·MRFs 家族概况 | 第16-17页 |
·MYOG 与肌肉发育 | 第17-18页 |
·MYOG 多态性研究 | 第18页 |
·研究的目的和意义 | 第18-20页 |
第二章 SH2B1 基因遗传变异研究 | 第20-39页 |
·材料与方法 | 第20-24页 |
·试验材料 | 第20-21页 |
·试验动物 | 第20页 |
·试验试剂 | 第20页 |
·仪器设备 | 第20-21页 |
·主要试剂和溶液的配制 | 第21页 |
·试验方法 | 第21-24页 |
·血样的采集 | 第22页 |
·牛全血基因组DNA 的提取 | 第22页 |
·DNA 质量检测、纯化及稀释 | 第22页 |
·PCR 反应所用引物的设计 | 第22页 |
·PCR 反应条件优化 | 第22-23页 |
·测序 | 第23页 |
·PCR 产物的CRS-PCR-RFLP 分析 | 第23-24页 |
·资料的统计与分析 | 第24页 |
·结果与分析 | 第24-35页 |
·牛基因组DNA 样品的检测 | 第24页 |
·SH2B1 基因多态性检测 | 第24-28页 |
·SH2B1 基因各基因座PCR 产物琼脂糖凝胶电泳检测 | 第24-25页 |
·SH2B1 基因各基因座混合DNA 扩增后的测序结果 | 第25-26页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点的CRS-PCR-RFLP 检测 | 第26-28页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点不同基因型的DNA 测序验证 | 第28页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点的群体遗传学分析 | 第28-29页 |
·SH2B1 基因编码区多态位点的连锁不平衡分析 | 第29-30页 |
·SH2B1 基因单倍型分析 | 第30页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点与生长性状的关联分析 | 第30-35页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点与郏县红牛生长性状的关联分析 | 第31-32页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点与南阳牛生长性状的关联分析 | 第32-34页 |
·SH2B1 基因编码区各多态位点与秦川牛生长性状的关联分析 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35-37页 |
·SH2B1 基因在5 个黄牛群体中的遗传多样性 | 第36页 |
·位点间连锁不平衡在不同品种间的差异 | 第36页 |
·SH2B1 基因单倍型在不同品种间的分布差异 | 第36-37页 |
·SH2B1 多态性与黄牛生长性状的相关分析 | 第37页 |
·小结 | 第37-39页 |
第三章 MYOG 基因的克隆及原核表达研究 | 第39-48页 |
·材料与方法 | 第39-44页 |
·试验材料 | 第39-41页 |
·试验试剂 | 第39页 |
·仪器设备 | 第39-40页 |
·溶液的配制 | 第40-41页 |
·菌株和载体 | 第41页 |
·试验方法 | 第41-44页 |
·引物的设计与合成 | 第41-42页 |
·Overlap-PCR 方法克隆MYOG 基因CDS 全长 | 第42页 |
·目的基因与空载体的双酶切 | 第42页 |
·载体与目的基因的连接反应 | 第42页 |
·连接产物转化JM109 感受态细胞 | 第42-43页 |
·重组质粒的筛选与鉴定 | 第43页 |
·阳性重组质粒转化BL21(DE3)感受态细胞 | 第43页 |
·目的蛋白诱导表达条件的优化 | 第43页 |
·目的蛋白的Western blot 检测 | 第43-44页 |
·结果与分析 | 第44-47页 |
·Overlap-PCR 扩增MYOG 基因CDS 区 | 第44页 |
·MYOG 基因原核表达载体pET28a-MYOG 的构建 | 第44-45页 |
·目的蛋白的诱导表达 | 第45-46页 |
·目的蛋白的Western blot 检测 | 第46-47页 |
·讨论 | 第47页 |
·Overlap-PCR 方法克隆目的基因 | 第47页 |
·MYOG 基因在BL21(DE3)宿主菌中的表达 | 第47页 |
·小结 | 第47-48页 |
第四章 结论与创新点 | 第48-49页 |
·结论 | 第48页 |
·创新点 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录 | 第54-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
作者简介 | 第58页 |