| 摘要 | 第1-11页 |
| ABSTRACT | 第11-23页 |
| 第一章 哺乳动物胚胎干细胞和诱导多能干细胞的研究进展 | 第23-54页 |
| 前言 | 第23-24页 |
| 1 有蹄类家畜ES细胞研究概况及其建系的影响因素 | 第24-29页 |
| ·有蹄类家畜ES细胞的研究概况 | 第24-25页 |
| ·影响有蹄类家畜ES细胞建系的因素 | 第25-29页 |
| 2 哺乳动物iPSCs的研究 | 第29-54页 |
| ·体细胞重编程的方法 | 第29-33页 |
| ·特异性转录因子促使体细胞重编程的机理 | 第33-39页 |
| ·iPSCs的研究进展 | 第39-46页 |
| ·有蹄类家畜iPSCs的生产 | 第46-49页 |
| ·iPSCs与疾病模型 | 第49-51页 |
| ·iPSCs应用中需要解决的问题及前景展望 | 第51-54页 |
| 第二章 水牛iPSCs相关特异性转录因子的克隆与分析 | 第54-73页 |
| 摘要 | 第54页 |
| 前言 | 第54-55页 |
| 1 试验材料与方法 | 第55-61页 |
| ·试验材料 | 第55-59页 |
| ·试验方法 | 第59-61页 |
| 2 试验结果 | 第61-69页 |
| ·总RNA的提取 | 第61-62页 |
| ·水牛特异性转录因子RT-PCR鉴定 | 第62页 |
| ·水牛特异性转录因子pMD18-T重组质粒鉴定 | 第62-63页 |
| ·水牛Oc4和Nanog基因组DNA的PCR扩增 | 第63-64页 |
| ·序列提交 | 第64页 |
| ·水牛特异性转录因子蛋白结构预测和进化树分析 | 第64-69页 |
| 3 分析与讨论 | 第69-72页 |
| ·水牛iPSCs相关转录因子的克隆 | 第69-70页 |
| ·水牛iPSCs相关转录因子的蛋白结构分析 | 第70-72页 |
| 4 结论 | 第72-73页 |
| 第三章 水牛iPSC逆转录病毒载体的构建 | 第73-88页 |
| 摘要 | 第73页 |
| 前言 | 第73-74页 |
| 1 材料和方法 | 第74-80页 |
| ·材料 | 第74-75页 |
| ·试验方法 | 第75-80页 |
| 2 试验结果 | 第80-84页 |
| ·水牛iPSCs相关转录因子的逆转录病毒载体构建 | 第80-82页 |
| ·病毒滴度的检测 | 第82-83页 |
| ·逆转录病毒感染水牛胎儿成纤维细胞的试验 | 第83-84页 |
| ·水牛特异性转录因子小鼠iPSCs模型 | 第84页 |
| 3 分析与讨论 | 第84-87页 |
| ·iPSCs携带转录因子载体的选择 | 第85页 |
| ·逆转录病毒感染水牛成纤维细胞 | 第85-86页 |
| ·水牛特异性转录因子诱导鼠iPSCs | 第86-87页 |
| 4 结论 | 第87-88页 |
| 第四章 水牛iPSCs生产效率影响因素的研究 | 第88-104页 |
| 摘要 | 第88页 |
| 前言 | 第88-89页 |
| 1 材料和方法 | 第89-93页 |
| ·材料 | 第89-91页 |
| ·试验方法 | 第91-93页 |
| 2 试验结果 | 第93-99页 |
| ·水牛成纤维表达转录因子的检测 | 第93-94页 |
| ·不同转录因子组合生产水牛iPSCs | 第94-96页 |
| ·SV40 large T antigen和hTERT提高水牛iPSCs的生产效率 | 第96-97页 |
| ·PFT-α提高水牛iPSCs的生产效率 | 第97-98页 |
| ·水牛iPSCs的传代培养和核型分析 | 第98-99页 |
| ·p53与水牛iPSCs重编程的关系 | 第99页 |
| 3 分析与讨论 | 第99-102页 |
| ·特异性转录因子组合诱导水牛iPSCs | 第100页 |
| ·水牛iPSCs克隆的形成过程 | 第100-101页 |
| ·AP染色统计水牛iPSCs阳性克隆 | 第101页 |
| ·p53表达水平与水牛iPSCs重编程的关系 | 第101-102页 |
| ·SV40 large T antigen通过抑制p53表达提高水牛iPSCs的形成效率 | 第102页 |
| 4 结论 | 第102-104页 |
| 第五章 水牛iPSCs生物学特性和多能性相关基因甲基化状态的研究 | 第104-125页 |
| 摘要 | 第104-105页 |
| 前言 | 第105-106页 |
| 1 材料和方法 | 第106-112页 |
| ·材料 | 第106-109页 |
| ·试验方法 | 第109-112页 |
| 2 试验结果 | 第112-120页 |
| ·水牛iPSCs的形态学特征 | 第112页 |
| ·水牛iPSCs多能性标志基因的检测 | 第112-114页 |
| ·水牛iPSCs多能性相关基因QPCR检测 | 第114-115页 |
| ·水牛iPSCs外源转基因的沉默检测 | 第115-116页 |
| ·水牛iPSCs多能性相关基因的甲基化模式 | 第116-117页 |
| ·水牛iPSCs的体外分化能力 | 第117-118页 |
| ·水牛iPSCs的体内分化能力 | 第118-119页 |
| ·水牛iPSCs核移植胚胎的体外发育情况 | 第119-120页 |
| 3 分析和讨论 | 第120-123页 |
| ·水牛iPSCs形态学分析 | 第120页 |
| ·biPSCs多能性相关基因的表达 | 第120-121页 |
| ·重编程过程中外源转基因表达和沉默 | 第121-122页 |
| ·重编程与多能性相关基因甲基化模式 | 第122-123页 |
| ·水牛iPSCs的分化潜能鉴定 | 第123页 |
| 4 结论 | 第123-125页 |
| 第六章 兔iPSCs的生产和生物学特性鉴定 | 第125-142页 |
| 摘要 | 第125页 |
| 前言 | 第125-126页 |
| 1 材料和方法 | 第126-131页 |
| ·材料 | 第126-129页 |
| ·试验方法 | 第129-131页 |
| 2 试验结果 | 第131-138页 |
| ·兔iPSCs的形成过程 | 第131-132页 |
| ·兔iPSCs的形态学特征和传代培养 | 第132-133页 |
| ·兔iPSCs多能性标志基因的检测 | 第133-135页 |
| ·兔iPSCs外源转基因的沉默检测 | 第135-136页 |
| ·兔iPSCs多能性相关基因的甲基化模式 | 第136-137页 |
| ·兔iPSCs体外分化初步研究 | 第137页 |
| ·兔iPSCs体内分化初步研究 | 第137-138页 |
| 3 分析和讨论 | 第138-140页 |
| ·iPSCs相关转录因子的保守性 | 第138-139页 |
| ·兔成纤维细胞不易重编程 | 第139页 |
| ·完全重编程的兔iPSCs | 第139-140页 |
| ·维持兔干细胞多能性的相关信号路径 | 第140页 |
| 4 结论 | 第140-142页 |
| 参考文献 | 第142-155页 |
| 附件 | 第155-157页 |
| 英文缩写-中文对照表 | 第157-158页 |
| 致谢 | 第158-159页 |
| 攻读博士期间发表文章 | 第159页 |
