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新疆盐生植物灰绿藜NHX1基因转化新疆大叶苜蓿植株再生及分子检测的研究

中文摘要第1-5页
英文摘要第5-11页
图表说明第11-14页
缩略语第14-15页
第一部分 文献综述第15-33页
 1. 紫花苜蓿营养价值及应用前景第16页
 2.紫花苜蓿在我国的资源分布和研究概况第16-17页
 3.转基因苜蓿研究进展第17-25页
   ·抗病毒、抗虫、抗除草剂转基因苜蓿的研究第18-19页
   ·抗逆性转基因苜蓿的研究第19-22页
   ·改善苜蓿品质的研究第22-23页
   ·可饲性疫苗的研究第23页
   ·作为生物反应器的研究第23-25页
 4 转基因苜蓿的遗传转化方法第25-27页
 5 苜蓿组织培养植株再生的研究进展第27-30页
   ·苜蓿组织培养中的外植体第27-28页
   ·苜蓿组织培养的培养基、激素和其他调节物质第28-29页
   ·苜蓿组织培养中基因型的选择第29-30页
   ·苜蓿组织培养中存在的问题第30页
 6.NHX1 基因的作用机理及研究概况第30-33页
第二部分 实验部分第33-75页
 第一章 新疆大叶紫花苜蓿(Medicago sativa.L)子叶、下胚轴、 根的植株再生第33-53页
  1. 材料第33页
  2. 方法第33-38页
   ·基础培养基第33-34页
   ·培养条件第34页
   ·种子表面的无菌处理与无菌苗的获得第34页
   ·诱导愈伤组织培养基第34-35页
   ·芽分化培养基第35页
   ·生根培养基第35页
   ·愈伤的诱导第35-37页
   ·芽的分化第37-38页
   ·生根第38页
   ·移栽花盆第38页
   ·计算方法第38页
  3. 结果第38-49页
   ·愈伤组织的诱导第38-44页
   ·再生芽的生成第44-48页
   ·生根第48页
   ·移栽第48-49页
  4. 讨论第49-53页
   ·激素对愈伤组织生长状态和芽分化的影响第49页
   ·培养基和激素配比对愈伤形成和芽分化的影响第49-50页
   ·水解酪蛋白(CH)对愈伤组织生长和芽分化的影响第50页
   ·外植体对植株再生的影响第50页
   ·愈伤组织培养时间对芽分化能力的影响第50-53页
 第二章 灰绿藜 NHX1 基因植物表达载体的构建第53-59页
  1. 材料与试剂第54页
  2. 方法第54-57页
   ·目的片段的获得第54-55页
   ·目的片段与载体pBIN438 的连接第55页
   ·大肠杆菌DH5α感受态细胞制备第55页
   ·连接产物转化大肠杆菌DH5α感受态细胞第55页
   ·阳性克隆的获得第55-56页
   ·小提质粒第56页
   ·酶切鉴定阳性克隆第56-57页
  3. 结果第57-59页
   ·植物表达载体的构建第57-58页
   ·植物表达载体的鉴定第58-59页
 第三章 农杆菌介导灰绿藜 NHX1 基因转化新疆大叶苜蓿的研究第59-75页
  1. 材料与试剂第59-60页
  2. 方法第60-66页
   ·农杆菌感受态细胞的制备第60-61页
   ·转化农杆菌感受态细胞第61页
   ·阳性克隆的鉴定第61-62页
   ·卡那临界值的测定第62-63页
   ·植物基因的转化第63-64页
   ·植物DNA 的提取第64页
   ·PCR 检测第64-65页
   ·Southern blot第65-66页
   ·NaCl 对种子萌发的胁迫第66页
  3. 结果与讨论第66-75页
   ·载体的转化和鉴定第66-67页
   ·卡那霉素临界值的确定第67-68页
   ·菌液浓度和浸染时间对转化的影响第68-69页
   ·子叶外植体转化的植株再生第69-70页
   ·PCR 检测第70-71页
   ·Southern blot第71页
   ·NaCl 胁迫对苜蓿种子萌发和植株生长的影响第71-75页
结论第75-76页
参考文献第76-84页
致谢第84-85页
个人简历第85页

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