| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 第一章 前言 | 第10-23页 |
| ·食品级表达载体 | 第11-17页 |
| ·糖类利用选择性标记 | 第11-13页 |
| ·营养缺陷型互补标记 | 第13-15页 |
| ·乳酸菌抗性筛选标记 | 第15-17页 |
| ·其他食品级选择标记 | 第17页 |
| ·食品级宿主菌 | 第17-18页 |
| ·乳球菌 | 第17-18页 |
| ·乳杆菌 | 第18页 |
| ·双歧杆菌 | 第18页 |
| ·食品级诱导物 | 第18页 |
| ·乳酸菌的食品级表达系统 | 第18-21页 |
| ·Nisin 诱导的食品级表达系统 | 第18-20页 |
| ·糖诱导的食品级表达系统 | 第20页 |
| ·嘌呤诱导的食品级表达系统 | 第20-21页 |
| ·温控食品级表达系统 | 第21页 |
| ·pH 值诱导食品级表达系统 | 第21页 |
| ·本课题研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| ·研究目的 | 第21页 |
| ·研究意义 | 第21-22页 |
| ·研究内容 | 第22-23页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第23-41页 |
| ·实验材料 | 第23-25页 |
| ·实验菌株 | 第23页 |
| ·主要试剂 | 第23页 |
| ·工具酶 | 第23-24页 |
| ·实验常用溶液 | 第24页 |
| ·实验仪器设备 | 第24-25页 |
| ·分析工具 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-41页 |
| ·培养基的制备 | 第25-26页 |
| ·nisin（乳链菌肽）抗性菌株的筛选 | 第26-27页 |
| ·nisin 抗性基因（NSR）保守序列的克隆 | 第27-30页 |
| ·nisin（乳链菌肽）抗性菌株的鉴定 | 第30-32页 |
| ·nisin（乳链菌肽）抗性菌株发酵液的研究 | 第32页 |
| ·nisin 抗性基因（NSR）全长序列的克隆及测序 | 第32-35页 |
| ·NSR 全长序列的生物信息学分析 | 第35-36页 |
| ·NSR 基因在大肠杆菌中的表达 | 第36-37页 |
| ·pMG36n 载体的构建 | 第37-39页 |
| ·pMG36n 质粒的电转化 | 第39-41页 |
| 第三章 结果与分析 | 第41-63页 |
| ·nisin 抗性菌株的筛选 | 第41-43页 |
| ·nisin 原液活性的验证 | 第41页 |
| ·实验室保藏菌种 nisin 抗性的鉴定 | 第41-42页 |
| ·鲜奶中 nisin 抗性菌的筛选 | 第42-43页 |
| ·nisin 抗性基因（NSR）保守序列的克隆 | 第43-44页 |
| ·nisin 抗性菌质粒的提取 | 第43-44页 |
| ·nisin 抗性菌基因组的提取 | 第44页 |
| ·nisin 抗性基因（NSR）保守序列的扩增 | 第44页 |
| ·nisin 抗性菌株的鉴定 | 第44-47页 |
| ·nisin 抗性菌株的生理生化鉴定 | 第45-46页 |
| ·nisin 抗性菌株的 16S rDNA 鉴定 | 第46-47页 |
| ·nisin 抗性菌株抗性分子机制的初步判定 | 第47-48页 |
| ·nisin 抗性基因（NSR）全长序列的克隆及生物信息学分析 | 第48-57页 |
| ·NSR 全长序列的扩增 | 第48页 |
| ·NSR 全长序列切胶纯化 | 第48-49页 |
| ·重组质粒的检测 | 第49-50页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第50-52页 |
| ·NSR 全长基因测序结果 | 第52页 |
| ·NSR 序列的生物信息学分析 | 第52-57页 |
| ·NSR 基因在大肠杆菌中的表达 | 第57-60页 |
| ·pMG36e 质粒的提取及含酶切位点的 NSR 基因的扩增 | 第57-58页 |
| ·NSR 基因和 pMG36e 质粒双酶切 | 第58-59页 |
| ·NSR 和 pMG36e 的连接以及重组质粒 pMG36e-NSR 的 PCR 鉴定 | 第59-60页 |
| ·pMG36n 载体的构建及电转化 | 第60-63页 |
| ·含相同酶切位点的 NSR 基因（NE）和 pMG36e-片段的扩增 | 第60-61页 |
| ·NE 片段和 pMG36e-片段的双酶切 | 第61页 |
| ·NSR 和 pMG36e-的连接以及重组质粒 pMG36n 的 PCR 鉴定 | 第61-63页 |
| 第四章 结论 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-70页 |
| 致谢 | 第70-71页 |
| 附录 | 第71-83页 |
| 个人简历 | 第83页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第83页 |
