前言 | 第1-19页 |
1. 新城疫病毒病毒囊膜糖蛋白及NDV疫苗研究 | 第7-11页 |
2. 病毒的侵入机制和抗病毒策略 | 第11-19页 |
材料和方法 | 第19-26页 |
1. HR1,2的克隆、表达及纯化 | 第19-23页 |
1.1 载体和基因 | 第19页 |
1.2 质粒构建 | 第19-21页 |
1.3 HR1,2基因的表达 | 第21-22页 |
1.4 蛋白的纯化 | 第22页 |
1.5 化学交联反应 | 第22-23页 |
1.6 蛋白的纯度和分子量测定 | 第23页 |
1.7 圆二色谱实验 | 第23页 |
2. HR1,3,2的克隆表达及纯化 | 第23-26页 |
2.1 载体及基因 | 第23页 |
2.2 质粒构建 | 第23-24页 |
2.3 HR1,3,2基因的表达 | 第24页 |
2.4 Histagged-HR1,3,2的纯化 | 第24页 |
2.5 HR1,3,2氨基酸突变分析 | 第24-25页 |
2.6 突变HR1,3,2的表达 | 第25-26页 |
结果 | 第26-35页 |
1. HR1,2的克隆表达纯化结果 | 第26-31页 |
1.1 HR1,2基因的亚克隆 | 第26-27页 |
1.2 克隆的HR1,2测序结果 | 第27页 |
1.3 His-tagged HR1,2和GST-HR1,2表达结果 | 第27页 |
1.4 His-tagged HR1,2亲和层析纯化结果 | 第27页 |
1.5 GST-HR1,2亲和层析纯化及分子筛纯化结果 | 第27-30页 |
1.6 三聚体形成实验结果 | 第30-31页 |
1.7 质谱分析结果 | 第31页 |
1.8 圆二色谱实验结果 | 第31页 |
2. HR1,3,2的克隆表达及纯化 | 第31-35页 |
2.1 克隆的HR1,3,2及其突变测序结果 | 第31页 |
2.2 HR1,3,2在两个融合表达载体上的表达结果 | 第31页 |
2.3 包涵体洗涤及沉淀条件的摸索结果 | 第31-32页 |
2.4 HR132亲和层析纯化结果 | 第32-33页 |
2.5 突变的HR1,3,2表达结果 | 第33-35页 |
讨论 | 第35-37页 |
结论 | 第37-38页 |
致谢 | 第38-39页 |
参考文献 | 第39-45页 |
附录A | 第45-52页 |
附录B | 第52-61页 |