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递送siRNA的EGFR靶向免疫脂质体的制备及其体内外活性研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-12页
缩略词表第12-13页
前言第13-16页
第一章 TLPD 的制备及抗体类型、连接方式和投入量的优化第16-26页
 一、仪器与材料第16-17页
  (一) 主要仪器设备第16页
  (二) 主要材料和试剂第16-17页
 二、方法与结果第17-23页
  (一) EGFR 靶向免疫脂质体(TLPD)的制备第17-22页
  (二) 抗体类型、连接方式和投入量的优化第22-23页
 三、讨论第23-25页
  (一) LPD(liposome-polycation-DNA)第23-24页
  (二) PEG 和抗体的引入第24页
  (三) 抗体类型、连接方式和投入量的优化第24-25页
 四、本章小结第25-26页
第二章 TLPD-FC 的体外研究第26-35页
 一、仪器与材料第26-27页
  (一) 主要仪器设备第26页
  (二) 细胞株第26页
  (三) siRNA第26页
  (四) 主要材料与试剂第26-27页
 二、方法第27-31页
  (一) TLPD-FC 的制备第27页
  (二) SDS-PAGE 考察Fab’完整性及其连接情况第27-28页
  (三) TLPD-FC 的凝胶阻滞实验第28-29页
  (四) siRNA 包封率测定第29-30页
  (五) TLPD-FC 体外基因沉默效率考察第30-31页
 三、结果与讨论第31-34页
  (一) SDS-PAGE 验证抗体完整性及连接情况第31页
  (二) 凝胶阻滞实验第31-32页
  (三) siRNA 包封率测定第32-33页
  (四) TLPD-FC 的体外基因沉默效率第33-34页
 四、本章小结第34-35页
第三章TLPD-FCC 的性质和体内外活性研究第35-58页
 一、仪器与材料第35-36页
  (一) 主要仪器设备第35页
  (二) 细胞株第35页
  (三) siRNA第35页
  (四) 主要材料与试剂第35-36页
 二、方法第36-41页
  (一) TLPD-FCC 的相关性质第36-37页
   1、透射电镜观察脂质体形态第36页
   2、琼脂糖凝胶电泳考察siRNA 血清降解程度第36页
   3、动态光散射(DLS)实验考察脂质体的血清稳定性第36-37页
  (二) TLPD-FCC 的体外活性研究第37-39页
   1、TLPD-FCC 的转染效率第37-38页
   2、TLPD-FCC 体外基因沉默效率的考察第38-39页
  (三) TLPD-FCC 的体内活性研究第39-41页
   1、裸鼠人乳腺癌肿瘤移植模型的建立第39页
   2、免疫荧光染色法观察乳腺癌实体肿瘤的EGFR 表达第39-40页
   3、组织分布及体内细胞内吞实验第40页
   4、体内基因沉默效率考察第40-41页
 三、结果与讨论第41-56页
  (一) TLPD-FCC 的相关性质第41-46页
   1、TEM(透射电镜)第41-42页
   2、siRNA 血清降解程度第42-43页
   3、动态光散射验证脂质体的体外血清稳定性第43-46页
  (二) TLPD-FCC 的体外活性第46-50页
   1、TLPD-FCC 的转染效率第46-47页
   2、TLPD-FCC 的体外基因沉默效率第47-50页
  (三) TLPD-FCC 的体内活性第50-56页
   1、裸鼠人乳腺癌肿瘤移植模型的建立第50-52页
   2、免疫荧光染色法观察实体肿瘤中 EGFR 的表达第52页
   3、组织分布第52-54页
   4、激光共聚焦观察体内肿瘤细胞对 TLPD-FCC 的内吞第54-55页
   5、体内基因沉默效率第55-56页
 四、本章小结第56-58页
全文小结第58-60页
参考文献第60-63页
阳离子脂质在基因传递中构效关系的研究进展第63-75页
 参考文献第71-75页
在读期间参加科研工作情况第75-76页
致谢第76页

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