摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-12页 |
缩略词表 | 第12-13页 |
前言 | 第13-16页 |
第一章 TLPD 的制备及抗体类型、连接方式和投入量的优化 | 第16-26页 |
一、仪器与材料 | 第16-17页 |
(一) 主要仪器设备 | 第16页 |
(二) 主要材料和试剂 | 第16-17页 |
二、方法与结果 | 第17-23页 |
(一) EGFR 靶向免疫脂质体(TLPD)的制备 | 第17-22页 |
(二) 抗体类型、连接方式和投入量的优化 | 第22-23页 |
三、讨论 | 第23-25页 |
(一) LPD(liposome-polycation-DNA) | 第23-24页 |
(二) PEG 和抗体的引入 | 第24页 |
(三) 抗体类型、连接方式和投入量的优化 | 第24-25页 |
四、本章小结 | 第25-26页 |
第二章 TLPD-FC 的体外研究 | 第26-35页 |
一、仪器与材料 | 第26-27页 |
(一) 主要仪器设备 | 第26页 |
(二) 细胞株 | 第26页 |
(三) siRNA | 第26页 |
(四) 主要材料与试剂 | 第26-27页 |
二、方法 | 第27-31页 |
(一) TLPD-FC 的制备 | 第27页 |
(二) SDS-PAGE 考察Fab’完整性及其连接情况 | 第27-28页 |
(三) TLPD-FC 的凝胶阻滞实验 | 第28-29页 |
(四) siRNA 包封率测定 | 第29-30页 |
(五) TLPD-FC 体外基因沉默效率考察 | 第30-31页 |
三、结果与讨论 | 第31-34页 |
(一) SDS-PAGE 验证抗体完整性及连接情况 | 第31页 |
(二) 凝胶阻滞实验 | 第31-32页 |
(三) siRNA 包封率测定 | 第32-33页 |
(四) TLPD-FC 的体外基因沉默效率 | 第33-34页 |
四、本章小结 | 第34-35页 |
第三章TLPD-FCC 的性质和体内外活性研究 | 第35-58页 |
一、仪器与材料 | 第35-36页 |
(一) 主要仪器设备 | 第35页 |
(二) 细胞株 | 第35页 |
(三) siRNA | 第35页 |
(四) 主要材料与试剂 | 第35-36页 |
二、方法 | 第36-41页 |
(一) TLPD-FCC 的相关性质 | 第36-37页 |
1、透射电镜观察脂质体形态 | 第36页 |
2、琼脂糖凝胶电泳考察siRNA 血清降解程度 | 第36页 |
3、动态光散射(DLS)实验考察脂质体的血清稳定性 | 第36-37页 |
(二) TLPD-FCC 的体外活性研究 | 第37-39页 |
1、TLPD-FCC 的转染效率 | 第37-38页 |
2、TLPD-FCC 体外基因沉默效率的考察 | 第38-39页 |
(三) TLPD-FCC 的体内活性研究 | 第39-41页 |
1、裸鼠人乳腺癌肿瘤移植模型的建立 | 第39页 |
2、免疫荧光染色法观察乳腺癌实体肿瘤的EGFR 表达 | 第39-40页 |
3、组织分布及体内细胞内吞实验 | 第40页 |
4、体内基因沉默效率考察 | 第40-41页 |
三、结果与讨论 | 第41-56页 |
(一) TLPD-FCC 的相关性质 | 第41-46页 |
1、TEM(透射电镜) | 第41-42页 |
2、siRNA 血清降解程度 | 第42-43页 |
3、动态光散射验证脂质体的体外血清稳定性 | 第43-46页 |
(二) TLPD-FCC 的体外活性 | 第46-50页 |
1、TLPD-FCC 的转染效率 | 第46-47页 |
2、TLPD-FCC 的体外基因沉默效率 | 第47-50页 |
(三) TLPD-FCC 的体内活性 | 第50-56页 |
1、裸鼠人乳腺癌肿瘤移植模型的建立 | 第50-52页 |
2、免疫荧光染色法观察实体肿瘤中 EGFR 的表达 | 第52页 |
3、组织分布 | 第52-54页 |
4、激光共聚焦观察体内肿瘤细胞对 TLPD-FCC 的内吞 | 第54-55页 |
5、体内基因沉默效率 | 第55-56页 |
四、本章小结 | 第56-58页 |
全文小结 | 第58-60页 |
参考文献 | 第60-63页 |
阳离子脂质在基因传递中构效关系的研究进展 | 第63-75页 |
参考文献 | 第71-75页 |
在读期间参加科研工作情况 | 第75-76页 |
致谢 | 第76页 |