| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 引言 | 第10-22页 |
| ·苹果病毒病 | 第11页 |
| ·苹果病毒病的为害 | 第11-12页 |
| ·对树势的影响 | 第11-12页 |
| ·对产量的影响 | 第12页 |
| ·对果实品质的影响 | 第12页 |
| ·苹果病毒病的危害特点 | 第12页 |
| ·我国苹果病毒病及防治现状 | 第12-13页 |
| ·苹果脱毒技术 | 第13-17页 |
| ·热处理法 | 第13-14页 |
| ·茎尖培养法 | 第14页 |
| ·热处理+茎尖培养法 | 第14-15页 |
| ·微体嫁接 | 第15页 |
| ·花药培养 | 第15-16页 |
| ·抗病毒剂的应用 | 第16页 |
| ·超低温+茎尖培养 | 第16-17页 |
| ·苹果潜隐性病毒检测 | 第17-22页 |
| ·指示植物生物学检测法 | 第17页 |
| ·电子显微镜技术 | 第17-18页 |
| ·血清学方法 | 第18-19页 |
| ·分子杂交技术 | 第19页 |
| ·双链RNA(dsRNA-double-stranded RNA)分析法 | 第19页 |
| ·聚合酶链式反应(PCR-Polymerase Chain Reaction) | 第19-21页 |
| ·酶联免疫与PCR相结合的方法(PCR-ELISA) | 第21-22页 |
| 2. 材料与方法 | 第22-29页 |
| ·材料及试剂 | 第22页 |
| ·材料 | 第22页 |
| ·试剂 | 第22页 |
| ·主要仪器 | 第22页 |
| ·方法与材料 | 第22-23页 |
| ·创造无RNase的环境 | 第22页 |
| ·植物总RNA的提取 | 第22-23页 |
| ·植物总RNA的纯化 | 第23页 |
| ·RNA提取质量的检测 | 第23-24页 |
| ·RNA纯度及完整性检测 | 第23页 |
| ·RNA纯度的检测 | 第23-24页 |
| ·RNA完整性鉴定 | 第24页 |
| ·RNA得率检测 | 第24页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒 | 第24-27页 |
| ·引物设计 | 第24-25页 |
| ·cDNA合成 | 第25-26页 |
| ·PCR扩增 | 第26-27页 |
| ·PCR条件的优化 | 第27页 |
| ·反应产物的电泳检测 | 第27页 |
| ·PCR检测的灵敏度 | 第27页 |
| ·苹果潜隐性病毒的脱除 | 第27-29页 |
| ·材料与方法 | 第27页 |
| ·苹果试管苗继代 | 第27-28页 |
| ·试管苗热处理+暗培养+茎尖培养法脱除病毒 | 第28页 |
| ·热处理+暗培养+茎尖培养脱毒方法获得的苹果植株病毒检测 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-43页 |
| ·琼脂糖电泳检验总RNA的完整性 | 第29页 |
| ·RT-PCR体系优化 | 第29-36页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒的灵敏度 | 第29-31页 |
| ·Mg~(2+)浓度对潜隐性病毒PCR扩增的影响 | 第31-32页 |
| ·TaqE对潜隐性病毒PCR扩增的影响 | 第32-33页 |
| ·退火温度对潜隐性病毒PCR扩增的影响 | 第33-35页 |
| ·循环次数对潜隐性病毒PCR扩增的影响 | 第35-36页 |
| ·用优化的RT-PCR检测苹果褪绿叶斑病毒、苹果茎沟病毒与苹果茎痘病毒 | 第36-38页 |
| ·苹果潜隐性病毒的脱除 | 第38-43页 |
| ·热处理过程中光/暗培养对试材的影响 | 第38页 |
| ·热处理过程中暗培养对试材生长量的影响 | 第38-39页 |
| ·热处理过程中暗培养对试材存活苗高度的影响 | 第39页 |
| ·热处理过程中暗培养对试材增殖系数的影响 | 第39页 |
| ·热处理过程中培养条件对试材存活率的影响 | 第39-40页 |
| ·脱毒方法的脱毒效果 | 第40-43页 |
| 4 讨论 | 第43-47页 |
| ·RNA提取方法 | 第43-44页 |
| ·RT-PCR检测苹果潜隐性病毒 | 第44-45页 |
| ·苹果潜隐性病毒脱除 | 第45-47页 |
| 5 结论 | 第47-55页 |
| 在读期间发表论文 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 附件 | 第58-61页 |
