摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第1 章绪论 | 第9-22页 |
·课题背景 | 第9-11页 |
·国内外研究现状 | 第11-21页 |
·新基因分析方法 | 第11-14页 |
·TA克隆 | 第14-15页 |
·核酸探针技术 | 第15-17页 |
·原位杂交技术 | 第17-21页 |
·本课题研究的目的和意义 | 第21页 |
·技术路线 | 第21-22页 |
第2章 材料和方法 | 第22-37页 |
·实验材料 | 第22-27页 |
·动物、菌种、细胞 | 第22页 |
·载体 | 第22页 |
·主要试剂及配制 | 第22-25页 |
·主要仪器及耗材 | 第25-26页 |
·软件 | 第26-27页 |
·实验方法 | 第27-36页 |
·原位杂交(ISH)分析 | 第27-33页 |
·半定量RT-PCR、Norther blot分析 | 第33-35页 |
·细胞转染 | 第35-36页 |
·本章小结 | 第36-37页 |
第3章 生物信息分析 | 第37-43页 |
·引言 | 第37页 |
·基因序列信息 | 第37-39页 |
·0610038D11Rik基因序列 | 第37-38页 |
·基因组定位情况 | 第38-39页 |
·氨基酸编码蛋白信息 | 第39-42页 |
·氨基酸物理性质 | 第39页 |
·蛋白的疏水区分析 | 第39页 |
·氨基酸三维结构 | 第39-40页 |
·同源性比对 | 第40-41页 |
·多重序列比对 | 第41页 |
·生物信息预测表达谱 | 第41-42页 |
·脑部原位杂交信息预测 | 第42页 |
·本章小结 | 第42-43页 |
第4章 原位杂交分析 | 第43-53页 |
·引言 | 第43页 |
·T载体的制备 | 第43-44页 |
·质粒提取及酶切 | 第43-44页 |
·制备T载体 | 第44页 |
·扩增产物的克隆及重组质粒的鉴定 | 第44-45页 |
·探针的合成 | 第45-47页 |
·全胚原位杂交分析结果 | 第47页 |
·组织切片原位杂交结果 | 第47-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·本章小结 | 第52-53页 |
第5章 RT-PCR和Northern blot分析目的基因表达 | 第53-56页 |
·引言 | 第53页 |
·总RNA提取结果 | 第53页 |
·半定量RT-PCR | 第53-54页 |
·Northern blot分析 | 第54-55页 |
·讨论 | 第55页 |
·本章小结 | 第55-56页 |
第6章 细胞定位分析 | 第56-59页 |
·表达载体的构建结果 | 第56-57页 |
·菌落 PCR双酶切验证重组体 | 第56-57页 |
·测序结果 | 第57页 |
·细胞定位结果 | 第57-58页 |
·讨论 | 第58页 |
·本章小结 | 第58-59页 |
结论 | 第59-60页 |
参考文献 | 第60-65页 |
附录 | 第65-66页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第66-68页 |
致谢 | 第68页 |