| 中文摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 前言 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-22页 |
| 1 Tpi 的研究进展 | 第9-11页 |
| ·TPI 基本性质 | 第9页 |
| ·空间结构与功能 | 第9-10页 |
| ·催化机理 | 第10页 |
| ·基因工程研究 | 第10-11页 |
| 2 电子克隆及其应用 | 第11-16页 |
| ·表达序列标签(Expressed Sequcence Tags, EST) | 第11-14页 |
| ·表达序列标签(EST)概况 | 第12-14页 |
| ·EST 技术与基因的电子克隆 | 第14-15页 |
| ·电子克隆 | 第14页 |
| ·电子克隆的步骤 | 第14-15页 |
| ·EST 技术的不足及对策 | 第15-16页 |
| 3 分子进化及系统进化树 | 第16-20页 |
| ·分子进化研究的基本方法 | 第17页 |
| ·系统进化树的构建方法 | 第17-20页 |
| ·距离构树法 | 第17-18页 |
| ·特征符构树方法 | 第18-19页 |
| ·方法比较 | 第19-20页 |
| 4. 研究目的、内容及技术路线 | 第20-22页 |
| ·研究目的与内容 | 第20-21页 |
| ·技术路线 | 第21-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-29页 |
| 1 材料与试剂 | 第22-23页 |
| ·实验材料 | 第22页 |
| ·培养基 | 第22页 |
| ·碱性质粒抽提试剂 | 第22页 |
| ·核酸电泳的相关试剂 | 第22-23页 |
| ·常用缓冲夜和试剂 | 第23页 |
| ·其它试剂 | 第23页 |
| 2 实验常用仪器设备 | 第23页 |
| 3 实验方法 | 第23-29页 |
| ·种子序列的获得 | 第23-24页 |
| ·组装序列的EST 候选清单的获取 | 第24页 |
| ·cDNA 序列的拼接组装 | 第24页 |
| ·开放阅读框架（ORF）分析 | 第24页 |
| ·蜜蜂 DNA 基因组的提取 | 第24页 |
| ·PCR 扩增蜜蜂Tpi 基因片段 | 第24-25页 |
| ·琼脂糖凝胶电泳 | 第25页 |
| ·目的片段回收 | 第25-26页 |
| ·连接反应 | 第26页 |
| ·大肠杆菌 E.coli TG1 感受态细胞制备 | 第26页 |
| ·连接产物的转化 | 第26-27页 |
| ·重组质粒的筛选 | 第27页 |
| ·质粒DNA 的制备 | 第27-29页 |
| 第三章 蜜蜂 Tpi 电子克隆 | 第29-40页 |
| 1 种子序列的获得 | 第29-30页 |
| 2 组装序列的 EST 候选清单 | 第30-31页 |
| 3 cDNA 序列的拼接组装 | 第31-33页 |
| 4 蜜蜂基因组比对 | 第33-37页 |
| 5 蛋白质的结构功能域分析 | 第37页 |
| 6 蛋白质同源性分析 | 第37-38页 |
| 7 讨论 | 第38-40页 |
| 第四章 Tpi 基因的分子进化分析 | 第40-46页 |
| 1 分子进化树的构建 | 第40-45页 |
| 2 讨论 | 第45-46页 |
| 第五章 蜜蜂 Tpi 电子克隆序列验证 | 第46-50页 |
| 1 实验材料 | 第46页 |
| 2 实验方法 | 第46页 |
| ·引物的设计与合成 | 第46页 |
| 3 结果与分析 | 第46-50页 |
| ·蜜蜂 DNA 基因组的提取 | 第46页 |
| ·PCR 扩增蜜蜂Tpi 片段 | 第46-47页 |
| ·目的片段回收 | 第47页 |
| ·Am Tpi 基因编码区克隆与分析 | 第47-48页 |
| ·讨论 | 第48-50页 |
| 第六章 西洋蜂基因组 DNA 序列缺口补平方法初探 | 第50-54页 |
| 1 西洋蜂基因组 DNA 序列缺口补平的步骤 | 第50页 |
| 2 西洋蜂基因组 DNA 序列缺口补平方法的应用 | 第50-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| 第七章 结论 | 第54-55页 |
| 1 小结与创新 | 第54页 |
| 2 尚待进一步研究的内容 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-61页 |
| 附录1：Tpi 测序结果 | 第61-62页 |
| 附录2：蜜蜂磷酸甘油醛异构酶基因提交GeneBank | 第62-63页 |
| 附录3：各物种Tpi 基因外显子序列的碱基组成 | 第63-64页 |
| 附录4：研究生在校期间发表的学术论文与研究成果 | 第64-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
