| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-30页 |
| ·引言 | 第12页 |
| ·研究背景 | 第12页 |
| ·研究目的和意义 | 第12页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第12页 |
| ·国内外研究现状 | 第12-28页 |
| ·生物膜系统同植物抗寒性的关系 | 第13-19页 |
| ·其他与植物抗寒性相关的抗寒基因研究 | 第19-24页 |
| ·杨树抗寒育种的研究现状 | 第24-28页 |
| ·论文研究主要内容 | 第28-29页 |
| ·研究技术路线 | 第29-30页 |
| 第二章 材料与方法 | 第30-49页 |
| ·引言 | 第30页 |
| ·毛白杨去饱和酶基因PTFAD2的克隆以及转基因杨树研究 | 第30-45页 |
| ·试验材料及其来源 | 第30-32页 |
| ·毛白杨RNA提取 | 第32页 |
| ·毛白杨cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·毛白杨PtFAD2基因的电子克隆 | 第33-34页 |
| ·毛白杨PtFAD2全长cDNA编码序列的分子克隆 | 第34-35页 |
| ·PtFAD2基因序列分析 | 第35-36页 |
| ·植物超量表达载体pBin438-PtFAD2的构建 | 第36-37页 |
| ·植物RNAi表达载体pBI121-PtFAD2-RNAi的构建 | 第37-39页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第39页 |
| ·农杆菌介导的目的基因叶盘法转化84K杨 | 第39-40页 |
| ·转基因植株的PCR筛选 | 第40-41页 |
| ·Realtime PCR检测转基因植株FAD2的转录表达量 | 第41页 |
| ·转基因植株的Southern blot分析 | 第41-42页 |
| ·PtFAD2转基因植株叶片脂肪酸提取与组分分析 | 第42-43页 |
| ·PtFAD2转基因植株的扦插扩繁与生长期4℃低温试验分析 | 第43页 |
| ·PtFAD2转基因植株的扦插扩繁与萌芽期-4℃低温试验分析 | 第43页 |
| ·PtFAD2转基因植株枝条电解质渗透率测定 | 第43-45页 |
| ·毛白杨亚油酸去饱和酶基因PTFAD3的克隆以及遗传转化84K杨的研究 | 第45-49页 |
| ·试验材料及其来源 | 第45页 |
| ·毛白杨RNA提取 | 第45页 |
| ·毛白杨cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| ·毛白杨PtFAD3基因的电子克隆 | 第45页 |
| ·毛白杨PtFAD3全长cDNA编码序列的分子克隆 | 第45页 |
| ·PtFAD3基因序列分析 | 第45-46页 |
| ·植物超量表达载体pBI121-PtFAD3的构建 | 第46-47页 |
| ·植物RNAi表达载体pBI121-PtFAD3-RNAi的构建 | 第47-48页 |
| ·表达载体转化农杆菌 | 第48页 |
| ·农杆菌介导的目的基因叶盘法转化84K杨 | 第48页 |
| ·转基因植株的PCR筛选 | 第48页 |
| ·Realtime PCR检测转基因植株PtFAD3的转录表达量 | 第48页 |
| ·转基因植株的Southern blot检测 | 第48页 |
| ·PtFAD3转基因植株叶片脂肪酸提取与组分分析 | 第48页 |
| ·PtFAD3转基因植株的扦插扩繁与4℃低温试验分析 | 第48页 |
| ·PtFAD3转基因植株的扦插扩繁与萌芽期-4℃低温试验分析 | 第48页 |
| ·PtFAD3转基因叶片电解质渗出率测定 | 第48-49页 |
| 第三章 结果与分析 | 第49-81页 |
| ·PTFAD2基因的克隆与转基因研究 | 第49-62页 |
| ·PtFAD2基因cDNA编码序列全长克隆与分析 | 第49-50页 |
| ·PtFAD2基因序列同源性比较及聚类分析 | 第50-52页 |
| ·植物表达载体pBin438-PtFAD2的酶切鉴定 | 第52-53页 |
| ·中间载体pHurricane-PtFAD2的酶切鉴定 | 第53页 |
| ·中间载体pHurricane-PtFAD2-RNAi的酶切鉴定 | 第53-54页 |
| ·RNAi载体pBI121-PtFAD2-RNAi的酶切鉴定 | 第54-55页 |
| ·农杆菌介导的PtFAD2基因遗传转化 | 第55-56页 |
| ·抗性植株中NPT-Ⅱ基因的PCR分析及阳性植株的移栽温室 | 第56页 |
| ·PtFAD2转基因植株FAD2基因表达量分析结果 | 第56-57页 |
| ·PtFAD2转基因抗性植株DNA印迹杂交分析 | 第57-58页 |
| ·PtFAD2转基因植株叶片脂肪酸组分分析结果 | 第58页 |
| ·PtFAD2转基因植株生长期低温处理试验 | 第58-59页 |
| ·PtFAD2转基因植株萌芽期低温处理试验 | 第59-61页 |
| ·PtFAD2转基因植株萌芽期叶片电解质渗出率测定 | 第61-62页 |
| ·毛白杨PTFAD3基因的克隆与转化84K杨的研究 | 第62-75页 |
| ·毛白杨PtFAD3基因cDNA编码序列全长克隆与分析 | 第62-63页 |
| ·毛白杨PtFAD3基因序列同源性比较及聚类分析 | 第63-65页 |
| ·植物表达载体pBI121-PtFAD3的双酶切鉴定 | 第65-66页 |
| ·中间载体pHurricane-PtFAD3的酶切鉴定 | 第66页 |
| ·中间载体pHurricane-PtFAD3-RNAi的酶切鉴定 | 第66-67页 |
| ·RNAi载体pBI121-PtFAD3-RNAi的酶切鉴定 | 第67-68页 |
| ·农杆菌介导的PtFAD3基因遗传转化 | 第68页 |
| ·PtFAD3转基因抗性植株中NPT-Ⅱ基因的PCR分析及阳性植株的移栽温室 | 第68-69页 |
| ·PtFAD3转基因植株FAD3表达量分析结果 | 第69页 |
| ·PtFAD3转基因植株的DNA印迹杂交分析 | 第69-70页 |
| ·PtFAD3转基因植株叶片脂肪酸组分分析结果 | 第70-71页 |
| ·PtFAD3转基因植株生长期低温处理试验 | 第71-72页 |
| ·PtFAD3转基因植株萌芽期低温处理试验 | 第72-74页 |
| ·PtFAD3转基因植株萌芽期叶片电解质渗出率统计 | 第74-75页 |
| ·转基因植株抗寒性综合比较统计分析 | 第75-81页 |
| ·PtFAD2和PtFAD3转基因植株脂肪酸不饱和指数和三烯酸综合比较 | 第75页 |
| ·PtFAD2和PtFAD3转基因植株萌芽期低温处理存活率比较 | 第75-78页 |
| ·超量表达转基因植株叶片电解质渗出率统计分析 | 第78-81页 |
| 第四章 结论与讨论 | 第81-86页 |
| ·PtFAD2和PtFAD3的克隆 | 第81-82页 |
| ·PtFAD2和PtFAD3的在杨树中超量和抑制表达 | 第82-83页 |
| ·杨树抗寒性与三烯酸含量密切相关 | 第83-84页 |
| ·电解质渗出率可用来衡量杨树抗寒性 | 第84页 |
| ·杨树抗寒基因工程育种展望 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-93页 |
| 附录 | 第93-95页 |
| 在读期间的学术研究 | 第95-96页 |
| 致谢 | 第96页 |
