摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
缩略词表(ABBREVIATION) | 第9-11页 |
1 绪论 | 第11-27页 |
·滞绿突变体的研究现状及应用前景 | 第11-20页 |
·滞绿的定义 | 第11-12页 |
·滞绿突变体的4 个类型 | 第12-13页 |
·突变体滞绿的成因 | 第13-17页 |
·滞绿突变的应用 | 第17-19页 |
·结语 | 第19-20页 |
·RNA 干扰研究进展 | 第20-22页 |
·RNAi 作用机制 | 第20页 |
·RNAi 的研究策略 | 第20-21页 |
·RNAi 的应用 | 第21-22页 |
·植物启动子的研究 | 第22-23页 |
·植物启动子定义 | 第22页 |
·植物启动子的类型 | 第22页 |
·植物启动子的结构 | 第22-23页 |
·植物启动子研究的重要性 | 第23页 |
·课题意义、内容和目标 | 第23-27页 |
·课题意义 | 第23-24页 |
·研究内容和目标 | 第24-25页 |
·本项目的特色与创新之处 | 第25-27页 |
2 LESGR1 基因的克隆及表达研究 | 第27-55页 |
·材料与试剂 | 第27-29页 |
·供试材料、质粒、菌株、试剂 | 第27页 |
·主要仪器设备 | 第27-28页 |
·常用试剂配制 | 第28-29页 |
·实验方法 | 第29-32页 |
·种植、样品处理及采集 | 第29-30页 |
·番茄总RNA 提取 | 第30页 |
·番茄基因组DNA 提取 | 第30-31页 |
·JM109 感受态细胞的制备——CaCL_2 法 | 第31-32页 |
·小量碱裂解法提取质粒DNA | 第32页 |
·核酸的电泳及纯度、浓度测定 | 第32页 |
·LESGR1 基因全长CDNA 的克隆 | 第32-35页 |
·引物设计 | 第32-33页 |
·RNA 的提取 | 第33页 |
·反转录(RT) | 第33页 |
·PCR 扩增 | 第33-34页 |
·PCR 产物的纯化、连接及转化 | 第34页 |
·阳性转化子的鉴定 | 第34-35页 |
·番茄LeSGR1 基因序列的分析 | 第35页 |
·LESGR1 基因组DNA 及其启动子的克隆 | 第35-37页 |
·LeSGR1 基因组DNA 的克隆 | 第35-36页 |
·LeSGR1 启动子的克隆、测序及分析 | 第36-37页 |
·LESGR1 表达模式的研究 | 第37-38页 |
·Northern 探针的制备 | 第37-38页 |
·Northern 杂交 | 第38页 |
·结果与讨论 | 第38-55页 |
·LeSGR1 基因cDNA 的克隆及其序列分析 | 第38-45页 |
·LeSGR1 基因组DNA 的克隆及分析 | 第45-48页 |
·LeSGR1 基因启动子的克隆及分析 | 第48-50页 |
·LeSGR1 的表达模式的研究 | 第50-55页 |
3 滞绿基因LESGR1 的功能研究 | 第55-73页 |
·材料与试剂 | 第55页 |
·试验方法 | 第55-64页 |
·gf 滞绿突变体叶绿素含量的测定 | 第55页 |
·gf 中SGR 基因的克隆 | 第55-56页 |
·RNAi 沉默载体的构建 | 第56-60页 |
·35S∷LeSGR1 超表达载体的构建 | 第60-63页 |
·番茄转化 | 第63-64页 |
·结果与讨论 | 第64-73页 |
·叶绿素的含量 | 第64-65页 |
·gf 突变体中SGR 基因的克隆和比对 | 第65-66页 |
·RNAi 载体的构建 | 第66-68页 |
·35S∷LeSGR1 超表达载体构建 | 第68-69页 |
·番茄的转化 | 第69-73页 |
4 结论与展望 | 第73-76页 |
·主要结论 | 第73-74页 |
·后续研究工作的展望 | 第74-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
参考文献 | 第77-84页 |
附录 | 第84-92页 |