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番茄滞绿基因LeSGR1的克隆和功能研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
缩略词表(ABBREVIATION)第9-11页
1 绪论第11-27页
   ·滞绿突变体的研究现状及应用前景第11-20页
     ·滞绿的定义第11-12页
     ·滞绿突变体的4 个类型第12-13页
     ·突变体滞绿的成因第13-17页
     ·滞绿突变的应用第17-19页
     ·结语第19-20页
   ·RNA 干扰研究进展第20-22页
     ·RNAi 作用机制第20页
     ·RNAi 的研究策略第20-21页
     ·RNAi 的应用第21-22页
   ·植物启动子的研究第22-23页
     ·植物启动子定义第22页
     ·植物启动子的类型第22页
     ·植物启动子的结构第22-23页
     ·植物启动子研究的重要性第23页
   ·课题意义、内容和目标第23-27页
     ·课题意义第23-24页
     ·研究内容和目标第24-25页
     ·本项目的特色与创新之处第25-27页
2 LESGR1 基因的克隆及表达研究第27-55页
   ·材料与试剂第27-29页
     ·供试材料、质粒、菌株、试剂第27页
     ·主要仪器设备第27-28页
     ·常用试剂配制第28-29页
   ·实验方法第29-32页
     ·种植、样品处理及采集第29-30页
     ·番茄总RNA 提取第30页
     ·番茄基因组DNA 提取第30-31页
     ·JM109 感受态细胞的制备——CaCL_2 法第31-32页
     ·小量碱裂解法提取质粒DNA第32页
     ·核酸的电泳及纯度、浓度测定第32页
   ·LESGR1 基因全长CDNA 的克隆第32-35页
     ·引物设计第32-33页
     ·RNA 的提取第33页
     ·反转录(RT)第33页
     ·PCR 扩增第33-34页
     ·PCR 产物的纯化、连接及转化第34页
     ·阳性转化子的鉴定第34-35页
     ·番茄LeSGR1 基因序列的分析第35页
   ·LESGR1 基因组DNA 及其启动子的克隆第35-37页
     ·LeSGR1 基因组DNA 的克隆第35-36页
     ·LeSGR1 启动子的克隆、测序及分析第36-37页
   ·LESGR1 表达模式的研究第37-38页
     ·Northern 探针的制备第37-38页
     ·Northern 杂交第38页
   ·结果与讨论第38-55页
     ·LeSGR1 基因cDNA 的克隆及其序列分析第38-45页
     ·LeSGR1 基因组DNA 的克隆及分析第45-48页
     ·LeSGR1 基因启动子的克隆及分析第48-50页
     ·LeSGR1 的表达模式的研究第50-55页
3 滞绿基因LESGR1 的功能研究第55-73页
   ·材料与试剂第55页
   ·试验方法第55-64页
     ·gf 滞绿突变体叶绿素含量的测定第55页
     ·gf 中SGR 基因的克隆第55-56页
     ·RNAi 沉默载体的构建第56-60页
     ·35S∷LeSGR1 超表达载体的构建第60-63页
     ·番茄转化第63-64页
   ·结果与讨论第64-73页
     ·叶绿素的含量第64-65页
     ·gf 突变体中SGR 基因的克隆和比对第65-66页
     ·RNAi 载体的构建第66-68页
     ·35S∷LeSGR1 超表达载体构建第68-69页
     ·番茄的转化第69-73页
4 结论与展望第73-76页
   ·主要结论第73-74页
   ·后续研究工作的展望第74-76页
致谢第76-77页
参考文献第77-84页
附录第84-92页

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