中文摘要 | 第1-11页 |
英文摘要 | 第11-13页 |
缩略词表 | 第13-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-27页 |
1 西番莲研究概况 | 第14-19页 |
·西番莲种质资源现状 | 第14页 |
·我国西番莲品种选育简况 | 第14-15页 |
·西番莲的利用价值及其前景 | 第15-16页 |
·我国西番莲产业存在的问题及对策 | 第16-19页 |
·品种单一化 | 第16-17页 |
·病虫害发生严重 | 第17-18页 |
·果实加工问题 | 第18-19页 |
2 染色体微分离、微切割与微克隆技术及其在植物科学研究上的应用 | 第19-27页 |
·染色体微分离、微切割与微克隆技术原理 | 第19页 |
·植物染色体微分离、微切割与微克隆技术发展历史 | 第19-21页 |
·染色体微分离、微切割与微克隆技术程序 | 第21-24页 |
·材料的选择和细胞同步化 | 第21页 |
·染色体标本制备 | 第21-22页 |
·目标染色体的识别 | 第22页 |
·染色体微切割、微分离 | 第22-23页 |
·染色体DNA微克隆 | 第23-24页 |
·微克隆的鉴定 | 第24页 |
·植物染色体微分离、微切割与微克隆技术的应用与展望 | 第24-27页 |
·染色体结构及进化的研究 | 第25页 |
·构建高密度的分子标记连锁图谱 | 第25页 |
·目的基因的定位与克隆 | 第25-27页 |
第二章 西番莲核型研究 | 第27-37页 |
1 材料和方法 | 第27-29页 |
·供试材料 | 第27页 |
·染色体标本制作 | 第27-28页 |
·浸种 | 第27页 |
·光照处理 | 第27页 |
·预处理 | 第27页 |
·固定 | 第27-28页 |
·解离 | 第28页 |
·染色制片观察 | 第28页 |
·分析方法 | 第28-29页 |
·种子萌发 | 第28页 |
·处理效果 | 第28页 |
·染色体核型分析 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-34页 |
·不同浸种时间对西番莲种子萌发的影响 | 第29页 |
·光照对西番莲种子萌发的影响 | 第29页 |
·不同预处理对根尖细胞分裂相的影响 | 第29-32页 |
·8-羟基喹琳处理 | 第30页 |
·对二氯苯处理 | 第30-31页 |
·饱和α-溴萘处理 | 第31页 |
·秋水仙素处理 | 第31页 |
·4℃低温处理 | 第31-32页 |
·不同酶解时间对染色体微分离的影响 | 第32-33页 |
·核型分析 | 第33-34页 |
·染色体的数目和倍数 | 第33页 |
·核型 | 第33-34页 |
3 讨论 | 第34-37页 |
·种子萌发 | 第34-35页 |
·制片 | 第35-36页 |
·核型分析 | 第36-37页 |
第三章 西番莲染色体的微分离与微扩增 | 第37-44页 |
1 材料与方法 | 第37-40页 |
·材料 | 第37页 |
·方法 | 第37-39页 |
·染色体标本制备 | 第37页 |
·染色体的显微分离 | 第37-38页 |
·单染色体的体外扩增 | 第38-39页 |
·蛋白酶K消化 | 第38页 |
·LA—PCR | 第38-39页 |
·DOP—PCR | 第39页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第39-40页 |
2 结果与分析 | 第40-41页 |
·西番莲单染色体的显微分离 | 第40页 |
·单染色体体外扩增 | 第40-41页 |
·LA—PCR扩增 | 第40页 |
·DOP—PCR扩增 | 第40-41页 |
3 讨论 | 第41-44页 |
·单染色体的显微分离 | 第41-42页 |
·不同扩增方式对片段大小的影响 | 第42页 |
·不同扩增方式对文库覆盖率的影响 | 第42-43页 |
·不同扩增方法对文库插入片段组成的影响 | 第43-44页 |
第四章 西番莲单染色体扩增产物的鉴定 | 第44-50页 |
1 材料与方法 | 第44-48页 |
·供试材料 | 第44页 |
·西番莲基因组DNA提取 | 第44-45页 |
·DNA浓度与质量分析 | 第45页 |
·西番莲基因组DNA的酶切及纯化 | 第45页 |
·Southern转膜 | 第45-46页 |
·探针标记 | 第46页 |
·探针效率的估计 | 第46-47页 |
·预杂交 | 第47页 |
·杂交 | 第47页 |
·杂交后洗膜 | 第47页 |
·显色反应 | 第47-48页 |
·保存 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-49页 |
·西番莲基因组DNA提取 | 第48页 |
·Southern杂交分析 | 第48-49页 |
3 讨论 | 第49-50页 |
·西番莲基因组DNA的除糖 | 第49页 |
·Southern杂交 | 第49-50页 |
第五章 西番莲单染色体DNA文库的建立 | 第50-55页 |
1 材料与方法 | 第50-52页 |
·材料 | 第50页 |
·方法 | 第50-52页 |
·西番莲单染色体PCR扩增产物的纯化 | 第50页 |
·与载体连接 | 第50-51页 |
·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第51页 |
·连接产物的转化 | 第51-52页 |
·PCR检测 | 第52页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第52页 |
·质粒提取 | 第52页 |
·质粒酶切 | 第52页 |
2 结果与分析 | 第52-53页 |
·PCR检测结果 | 第53页 |
·染色体DNA文库分析 | 第53页 |
3 讨论 | 第53-55页 |
第六章 西番莲染色体的AFLP标记 | 第55-61页 |
1 材料与方法 | 第55-57页 |
·材料 | 第55页 |
·方法 | 第55-57页 |
·基因组DNA的提取 | 第55页 |
·AFLP研究方法 | 第55-56页 |
·染色体微扩增 | 第55页 |
·基因组DNA的酶切、连接和扩增 | 第55-56页 |
·选择性扩增 | 第56页 |
·琼脂糖凝胶电泳 | 第56-57页 |
2 结果与分析 | 第57-59页 |
·基因组DNA酶切 | 第58页 |
·基因组DNA的AFLP | 第58页 |
·染色体的AFLP | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-61页 |
小结 | 第61-62页 |
参考文献 | 第62-71页 |
致谢 | 第71页 |