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西番莲(Passiflora edulis Sims)染色体微分离与单染色体DNA文库的构建

中文摘要第1-11页
英文摘要第11-13页
缩略词表第13-14页
第一章 文献综述第14-27页
 1 西番莲研究概况第14-19页
   ·西番莲种质资源现状第14页
   ·我国西番莲品种选育简况第14-15页
   ·西番莲的利用价值及其前景第15-16页
   ·我国西番莲产业存在的问题及对策第16-19页
     ·品种单一化第16-17页
     ·病虫害发生严重第17-18页
     ·果实加工问题第18-19页
 2 染色体微分离、微切割与微克隆技术及其在植物科学研究上的应用第19-27页
   ·染色体微分离、微切割与微克隆技术原理第19页
   ·植物染色体微分离、微切割与微克隆技术发展历史第19-21页
   ·染色体微分离、微切割与微克隆技术程序第21-24页
     ·材料的选择和细胞同步化第21页
     ·染色体标本制备第21-22页
     ·目标染色体的识别第22页
     ·染色体微切割、微分离第22-23页
     ·染色体DNA微克隆第23-24页
     ·微克隆的鉴定第24页
   ·植物染色体微分离、微切割与微克隆技术的应用与展望第24-27页
     ·染色体结构及进化的研究第25页
     ·构建高密度的分子标记连锁图谱第25页
     ·目的基因的定位与克隆第25-27页
第二章 西番莲核型研究第27-37页
 1 材料和方法第27-29页
   ·供试材料第27页
   ·染色体标本制作第27-28页
     ·浸种第27页
     ·光照处理第27页
     ·预处理第27页
     ·固定第27-28页
     ·解离第28页
     ·染色制片观察第28页
   ·分析方法第28-29页
     ·种子萌发第28页
     ·处理效果第28页
     ·染色体核型分析第28-29页
 2 结果与分析第29-34页
   ·不同浸种时间对西番莲种子萌发的影响第29页
   ·光照对西番莲种子萌发的影响第29页
   ·不同预处理对根尖细胞分裂相的影响第29-32页
     ·8-羟基喹琳处理第30页
     ·对二氯苯处理第30-31页
     ·饱和α-溴萘处理第31页
     ·秋水仙素处理第31页
     ·4℃低温处理第31-32页
   ·不同酶解时间对染色体微分离的影响第32-33页
   ·核型分析第33-34页
     ·染色体的数目和倍数第33页
     ·核型第33-34页
 3 讨论第34-37页
   ·种子萌发第34-35页
   ·制片第35-36页
   ·核型分析第36-37页
第三章 西番莲染色体的微分离与微扩增第37-44页
 1 材料与方法第37-40页
   ·材料第37页
   ·方法第37-39页
     ·染色体标本制备第37页
     ·染色体的显微分离第37-38页
     ·单染色体的体外扩增第38-39页
       ·蛋白酶K消化第38页
       ·LA—PCR第38-39页
       ·DOP—PCR第39页
   ·琼脂糖凝胶电泳第39-40页
 2 结果与分析第40-41页
   ·西番莲单染色体的显微分离第40页
   ·单染色体体外扩增第40-41页
     ·LA—PCR扩增第40页
     ·DOP—PCR扩增第40-41页
 3 讨论第41-44页
   ·单染色体的显微分离第41-42页
   ·不同扩增方式对片段大小的影响第42页
   ·不同扩增方式对文库覆盖率的影响第42-43页
   ·不同扩增方法对文库插入片段组成的影响第43-44页
第四章 西番莲单染色体扩增产物的鉴定第44-50页
 1 材料与方法第44-48页
   ·供试材料第44页
   ·西番莲基因组DNA提取第44-45页
   ·DNA浓度与质量分析第45页
   ·西番莲基因组DNA的酶切及纯化第45页
   ·Southern转膜第45-46页
   ·探针标记第46页
   ·探针效率的估计第46-47页
   ·预杂交第47页
   ·杂交第47页
   ·杂交后洗膜第47页
   ·显色反应第47-48页
   ·保存第48页
 2 结果与分析第48-49页
   ·西番莲基因组DNA提取第48页
   ·Southern杂交分析第48-49页
 3 讨论第49-50页
   ·西番莲基因组DNA的除糖第49页
   ·Southern杂交第49-50页
第五章 西番莲单染色体DNA文库的建立第50-55页
 1 材料与方法第50-52页
   ·材料第50页
   ·方法第50-52页
     ·西番莲单染色体PCR扩增产物的纯化第50页
     ·与载体连接第50-51页
     ·大肠杆菌感受态细胞的制备第51页
     ·连接产物的转化第51-52页
     ·PCR检测第52页
     ·琼脂糖凝胶电泳第52页
     ·质粒提取第52页
     ·质粒酶切第52页
 2 结果与分析第52-53页
   ·PCR检测结果第53页
   ·染色体DNA文库分析第53页
 3 讨论第53-55页
第六章 西番莲染色体的AFLP标记第55-61页
 1 材料与方法第55-57页
   ·材料第55页
   ·方法第55-57页
     ·基因组DNA的提取第55页
     ·AFLP研究方法第55-56页
       ·染色体微扩增第55页
       ·基因组DNA的酶切、连接和扩增第55-56页
     ·选择性扩增第56页
     ·琼脂糖凝胶电泳第56-57页
 2 结果与分析第57-59页
   ·基因组DNA酶切第58页
   ·基因组DNA的AFLP第58页
   ·染色体的AFLP第58-59页
 3 讨论第59-61页
小结第61-62页
参考文献第62-71页
致谢第71页

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